Qualidade sanitária de soluções alternativas de abastecimento de água e hortaliças destinadas à alimentação escolar em área rural da Região Metropolitana de Curitiba, Paraná

Abstract

Resumo: O consumo de vegetais crus promove a saúde nutricional, especialmente entre crianças em idade escolar, grupo vulnerável a infecções. Garantir a segurança dos vegetais e da água oferecidos nessas refeições é crucial para prevenir doenças. Este estudo avaliou a qualidade microbiológica e parasitológica de soluções alternativas de abastecimento de água (SAAA), e hortaliças destinadas à alimentação infantil, em área rural da região metropolitana de Curitiba, com baixo desempenho nos Objetivos de Desenvolvimento Sustentável (39,21 pontos). Foram analisadas 140 amostras de hortaliças folhosas produzidas por cooperativa local destinadas à alimentação infantil, e amostras de água de 12 SAAA (8 poços artesianos e 4 nascentes). As hortaliças incluíram alface, escarola, repolho verde, repolho roxo, acelga, brócolis, couve, salsa e cebolinha, sendo divididas em dois grupos para a pesquisa de helmintos e protozoários intestinais e teciduais de relevância em saúde pública. Para tanto, 70 amostras - 30g cada - foram separadas, lavadas manualmente com solução de glicina (1M, pH 5,5), decantadas, centrifugadas e todo o sedimento obtido examinado em microscópio óptico para a pesquisa de ovos de helmintos. Para o segundo grupo, mais 70 amostras foram examinadas, sendo efetuada três réplicas de 30g cada (90 g/amostra). Cada subamostra foi lavada manualmente com 250 ml de glicina, compondo 750 ml de líquido eluente/amostra. O volume final de cada amostra foi submetido à filtração em membrana. O material da membrana foi eluído e concentrado por centrifugação. Parte do sedimento obtido foi utilizado para a extração de DNA e analisado por PCR/qPCR para a pesquisa de Cryptosporidium spp., mediante amplificação do gene COWP, beta-giardina (bg) para Giardia spp., e marcador molecular REP-529 para a pesquisa de Toxoplasma gondii. A avaliação da qualidade sanitária das SAAA foi realizada em duas campanhas, totalizando 48 amostras (24 para pesquisa de protozoários e 24 para bactérias) nos 12 pontos. O isolamento de protozoários foi feito por filtração em membranas, sendo o sedimento resultante analisado pelas metodologias moleculares supracitadas para os mesmos protozoários analisados nas hortaliças. A reação de imunofluorescência direta também foi realizada usando anticorpos monoclonais anti-Cryptosporidium e anti-Giardia, para a pesquisa de oocistos e cistos. Técnicas microbiológicas convencionais foram utilizadas para aferição da qualidade da água. A contaminação por ovos de helmintos foi identificada em 12,85% das hortaliças. Desse total, 88,9% continham ovos de ancilostomatídeos e, 11,1% ovos de Toxocara sp. A contaminação por pelo menos um protozoário patogênico foi identificada em 22,9% dos vegetais. Somente 13,1% das SAAA atenderam ao padrão microbiológico de potabilidade da água. A contaminação por Cryptosporidium spp., foi detectada em 4,2% das amostras hídricas. Os resultados revelam circulação de enteroparasitos em hortaliças cruas consumidas por crianças e água de má qualidade microbiológica nas fontes locais. Ressalta-se a relevância do monitoramento contínuo da qualidade da água e dos vegetais ofertados em refeições escolares visto que parasitoses intestinais agravam a desnutrição infantil e outras condições. Além disso, evidenciam a necessidade de implementação de ações de controle e expansão do saneamento, visando a proteção da população autóctone, além de garantir a segurança de alimentos para outras localidades

Abstract: The consumption of raw vegetables plays a significant role in promoting nutritional health, particularly among school-aged children, who are vulnerable to infections. Ensuring the safety of both vegetables and water is crucial to preventing diseases. This study evaluated the microbiological and parasitological quality of alternative water supply solutions (AWSS) and vegetables used in children's meals in a rural area of the metropolitan region of Curitiba, which shows low performance in the Sustainable Development Goals (39.21 points). A total of 140 samples of leafy vegetables produced by a local cooperative for child nutrition were analyzed, along with water samples from 12 AWSS (8 artesian wells and 4 springs). The vegetables – lettuce, escarole, green cabbage, red cabbage, Swiss chard, broccoli, kale, parsley, and green onion – were divided into two groups to search for intestinal helminths and protozoa relevant for public health. For this, 70 samples (30g each) were separated and manually washed with a Glycine solution (1M, pH 5.5), decanted, centrifuged, and the sediment examined under an optical microscope for helminth eggs. For the second group, an additional 70 samples were analyzed, with three replicates of 30g each (90g/sample). Each subsample was manually washed with 250 ml of Glycine, totaling 750 ml of eluent per sample. The final volume was subjected to membrane filtration, and the membrane material was eluted and concentrated by centrifugation. Part of the sediment was used for DNA extraction and PCR/qPCR analysis to detect Cryptosporidium spp., (COWP gene), Giardia spp. (beta-giardin gene), and Toxoplasma gondii (REP-529 marker). The sanitary quality of the AWSS was assessed in two campaigns, totaling 48 samples (24 for protozoa and 24 for bacteria) from 12 sites. Protozoa isolation was performed by membrane filtration, and the sediment was analyzed using the same molecular methodologies applied to vegetables. Direct immunofluorescence with monoclonal antibodies against Cryptosporidium and Giardia was used for oocyst and cyst detection. Conventional microbiological techniques were applied to assess water quality. Helminth eggs were identified in 12.85% of the vegetables, of which 88.9% contained hookworm eggs and 11.1% contained Toxocara sp., eggs. At least one pathogenic protozoa was detected in 22.9% of vegetable samples. Only 13.1% of AWSS samples met the microbiological standard for drinking water, and contamination by Cryptosporidium spp., was found in 4.2% of water samples. These results reveal the circulation of enteroparasites in raw vegetables consumed by children and poor microbiological quality of local water sources. In addition, it emphasizes the importance of continuous monitoring of water and vegetable quality in school meals, as intestinal parasitosis worsen child malnutrition and other health conditions. Furthermore, they highlight the need for implementing control measures and expanding sanitation to protect local populations and ensure food safety to other regions