Avaliação in vitro da atividade anti-leishmania da ivermectina e dipropionato de imidocarb sobre Leishmania braziliensis e Leishmania infantum
Resumo
Resumo: As leishmanioses compõem um grupo de doenças tropicais infecciosas, endêmicas e prioritárias globalmente. Frente à indisponibilidade vacinal, baixa disponibilidade, alto custo e toxicidade de fármacos, o uso de drogas comercializadas para tratamento de outras doenças, que não àquelas tradicionalmente propostas pelo fabricante, é desejável. Neste contexto destacam-se os fármacos Ivermectina (IVM) e Dipropionato de Imidocarb (DPI), cuja potencial atividade anti-leishmania pode ser investigada. O objetivo geral é avaliar a atividade anti-leishmania dos fármacos veterinários IVM e DPI. Os materiais e métodos compreendem experimentação in vitro, realizada por meio de teste de viabilidade das promastigotas (obtido pelo teste MTT) e amastigotas (obtido por leitura no equipamento Operetta®) de L. braziliensis e L. infantum frente aos fármacos, teste de citotoxicidade das linhagens celulares VERO e THP-1 frente aos fármacos. Para as formas amastigotas foi empregada a linhagem THP-1 como células hospedeiras. A curva de crescimento das promastigotas de L. braziliensis e L. infantum frente aos fármacos IVM e DPI foi realizada ao longo de oito dias consecutivos. Os resultados foram analisados com auxílio de testes estatísticos; p<0,05 representou diferença estatística significativa entre o teste e o grupo controle. A análise da viabilidade da IVM frente à promastigota de L. braziliensis e de L. infantum apresentou diferença estatística em todas as concentrações. A viabilidade do DPI frente à promastigota de L. braziliensis apresentou diferença estatística entre as concentrações de 100 e 1,23 ug/mL; e entre 100 a 3,7 ug/mL frente à promastigota de L. infantum. Quanto à citotoxicidade da IVM frente às células VERO, houve diferença em todas as concentrações; quanto ao DPI houve diferença estatística apenas na concentração de 333,33ug/mL. No teste de citotoxicidade da IVM frente às células THP-1 houve diferença estatística nas duas maiores concentrações, 100 e 33,33ug/mL; para DPI a análise mostrou não haver diferença nas diversas concentrações. Na análise da viabilidade das amastigotas de L. braziliensis com IVM, não houve diferença entre as concentrações testadas, diferentemente dos testes com amastigotas de L. infantum, em que houve diferença estatística das concentrações mais altas, 17 e 3,4ug/mL. Na viabilidade das amastigotas de L. braziliensis com DPI, houve diferença estatística nas concentrações 25, 5 e 1ug/mL; para amastigotas de L. infantum houve diferença nas concentrações de 25 e 5 ug/mL. A IVM foi eficaz contra os parasitos, porém tóxica contra as células; o DPI foi eficaz contra os parasitos e apresentou baixa toxicidade para as células. Conclui-se que o reposicionamento de DPI para o tratamento de leishmanioses causadas por L. braziliensis e L. infantum é promissor considerando a atividade anti-leishmania com baixa toxicidade demonstrada in vitro. Resultado esse inédito e promissor para futuros ensaios in vivo. Abstract: Leishmaniases make up a group of infectious, endemic and priority tropical diseases globally. Faced with vaccine unavailability, low availability, high cost and drug toxicity, the use of drugs marketed for the treatment of other diseases, other than those traditionally proposed by the manufacturer, is desirable. In this context, the drugs Ivermectin (IVM) and Imidocarb Dipropionate (DPI) stand out, whose potential anti-leishmania activity can be investigated. The general objective is to evaluate the anti-leishmanial activity of the veterinary drugs IVM and DPI. The materials and methods include in vitro experimentation, carried out by means of a viability test of promastigotes (obtained by the MTT test) and amastigotes (obtained by reading in the Operetta® equipment) of L. braziliensis and L. infantum against drugs, cytotoxicity test of VERO and THP-1 cell lines against drugs. For amastigotes, the THP-1 cell line was used as host cells. The growth curve of L. braziliensis and L. infantum promastigotes against the drugs IVM and DPI was carried out over eight consecutive days. The results were analyzed with the aid of statistical tests; p<0.05 represented a statistically significant difference between the test and the control group. The viability analysis of IVM against the promastigotes of L. braziliensis and L. infantum showed statistical difference in all concentrations. The viability of DPI against the promastigote of L. braziliensis showed statistical difference between the concentrations of 100 and 1.23 ug/mL; and between 100 and 3.7 ug/mL against the promastigotes of L. infantum. As for the cytotoxicity of IVM against VERO cells, there was difference in all concentrations; as for the DPI, there was a statistical difference only in the concentration of 333.33ug/mL. In the IVM cytotoxicity test against THP-1 cells, there was a statistical difference in the two highest concentrations, 100 and 33.33ug/mL; for DPI the analysis showed no difference in the different concentrations. In the viability analysis of L. braziliensis amastigotes with IVM, there was no difference between the tested concentrations, unlike the tests with L. infantum amastigotes, in which there was a statistical difference in the highest concentrations, 17 and 3.4ug/mL. In the viability of L. braziliensis amastigotes with DPI, there was statistical difference in the concentrations 25, 5 and 1ug/mL; for amastigotes of L. infantum there was a difference in the concentrations of 25 and 5 ug/mL. IVM was effective against parasites, but toxic against cells; DPI was effective against parasites and showed low toxicity to cells. It is concluded that the repositioning of DPI for the treatment of leishmaniasis caused by L. braziliensis and L. infantum is promising considering the anti-leishmanial activity with low toxicity demonstrated in vitro. This unprecedented and promising result for future in vivo tests.
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