Estudo dos óleos essenciais e do extrato bruto aquoso obtido de folhas de Piper amalago L.

Abstract

Resumo: Piper amalago L. (Piperaceae) é uma planta medicinal encontrada na América Central e do Sul que possui atividades anti-inflamatória, antimicrobiana, anti-litíase e usada como agente cicatrizante de feridas, queimaduras, abcessos, furúnculos e picadas de insetos. O objetivo deste estudo foi analisar a composição química e a atividade antimicrobiana de óleos voláteis e os possíveis efeitos do extrato aquoso liofilizado obtidos de folhas de P. amalago em diferentes concentrações e em diferentes tempos de incubação, utilizando o modelo in vitro de fibroblastos de camundongo (3T3). O óleo essencial foi obtido por hidrodestilação e a análise da atividade antimicrobiana foi realizada em discos de papel filtro impregnados com óleo volátil contra cepas de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Enterococcus faecalis e Escherichia coli. O extrato aquoso foi testado em fibroblastos de camundongo (3T3) em diferentes concentrações por 24 horas para a avaliação da viabilidade celular através do vermelho neutro; da viabilidade celular pelo MTT; da adesão celular e do grau de espraiamento; da determinação de proliferação celular pelo cristal de violeta; da análise morfológica através de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura; detecção de microfilamentos de actina através de citoquímica de fluorescência. No tempo de exposição por 96 horas ao extrato, os ensaios foram realizados para determinar a concentração de hidroxiprolina e a atividade da metaloproteinase MMP2. No estudo dos óleos voláteis obtidos de folhas de Piper amalago foram identificados 28 compostos que representam 99,35% de seus constituintes. Na análise de atividade antimicrobiana, o óleo essencial resultou em zona de inibição para as cepas de Enterococcus faecalis e Staphylococcus aureus. O extrato aquoso obtido de folhas de P. amalago sobre a linhagem de fibroblastos (3T3) apresentou as seguintes atividades: modulação positiva no grau de disseminação celular, proliferação celular, adesão, coesão intercelular e produção de colágeno. Esses resultados endossam o uso etnofarmacológico de P. amalago como agente cicatrizante de feridas e queimaduras pelas comunidades da América Central e do Brasil, podendo ser importante no desenvolvimento de novos fitomedicamentos. Palavras-chave: Jaborandi-manso. Óleos voláteis. Extrato aquoso. Atividade antimicrobiana. Fibroblastos 3T3. ABSTRACT Piper amalago L. (Piperaceae) é uma planta medicinal encontrada na América Central e do Sul que possui atividades anti-inflamatória, antimicrobiana, anti-litíase e usada como agente cicatrizante de feridas, queimaduras, abcessos, furúnculos e picadas de insetos. O objetivo deste estudo foi analisar a composição química e a atividade antimicrobiana de óleos voláteis e os possíveis efeitos do extrato aquoso liofilizado obtidos de folhas de P. amalago em diferentes concentrações e em diferentes tempos de incubação, utilizando o modelo in vitro de fibroblastos de camundongo (3T3). O óleo essencial foi obtido por hidrodestilação e a análise da atividade antimicrobiana foi realizada em discos de papel filtro impregnados com óleo volátil contra cepas de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Enterococcus faecalis e Escherichia coli. O extrato aquoso foi testado em fibroblastos de camundongo (3T3) em diferentes concentrações por 24 horas para a avaliação da viabilidade celular através do vermelho neutro; da viabilidade celular pelo MTT; da adesão celular e do grau de espraiamento; da determinação de proliferação celular pelo cristal de violeta; da análise morfológica através de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura; detecção de microfilamentos de actina através de citoquímica de fluorescência. No tempo de exposição por 96 horas ao extrato, os ensaios foram realizados para determinar a concentração de hidroxiprolina e a atividade da metaloproteinase MMP2. No estudo dos óleos voláteis obtidos de folhas de Piper amalago foram identificados 28 compostos que representam 99,35% de seus constituintes. Na análise de atividade antimicrobiana, o óleo essencial resultou em zona de inibição para as cepas de Enterococcus faecalis e Staphylococcus aureus. O extrato aquoso obtido de folhas de P. amalago sobre a linhagem de fibroblastos (3T3) apresentou as seguintes atividades: modulação positiva no grau de disseminação celular, proliferação celular, adesão, coesão intercelular e produção de colágeno. Esses resultados endossam o uso etnofarmacológico de P. amalago como agente cicatrizante de feridas e queimaduras pelas comunidades da América Central e do Brasil, podendo ser importante no desenvolvimento de novos fitomedicamentos.

Abstract: Piper amalago L. (Piperaceae) is a medicinal plant found in Central and South America that has anti-inflammatory, antimicrobial, anti-lithiasis activities and used as a healing agent for wounds, burns, abscesses, boils, and insect bites. The aim of this study was to analyze the chemical composition and antimicrobial activity of volatile oils and the possible effects of the lyophilized aqueous extract obtained from P. amalago leaves at different concentrations and at different incubation times, using the in vitro mouse fibroblast model (3T3). The essential oil was obtained by hydro distillation and the analysis of antimicrobial activity was performed on filter paper discs impregnated with volatile oil against Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Enterococcus faecalis and Escherichia coli strains. The aqueous extract was tested on mouse fibroblasts (3T3) at different concentrations for 24 hours to assess cell viability through neutral red; cell viability by MTT; cell adhesion and degree of spreading; determination of cell proliferation by crystal violet; morphological analysis through light microscopy and scanning electron microscopy; detection of actin microfilaments by fluorescence cytochemistry. At the 96-hour exposure time to the extract, assays were performed to determine the hydroxyproline concentration and the metalloproteinase MMP2 activity. In the study of volatile oils obtained from P. amalago leaves, 28 compounds were identified that represent 99.35% of its constituents. In the analysis of antimicrobial activity, the essential oil resulted in an inhibition zone for the strains of Enterococcus faecalis and Staphylococcus aureus. The aqueous extract obtained from P. amalago leaves on the fibroblast lineage (3T3) showed the following activities: positive modulation in cell dissemination degree, cell proliferation, adhesion, intercellular cohesion, and collagen production. These results support the ethnopharmacological use of P. amalago as a healing agent for wounds and burns by communities in Central America and Brazil and may be important in the development of new phytomedicines.