Detecção e caracterização molecular de micoplasmas hemotrópicos em mamíferos da área de preservação da Usina Hidrelétrica de Itaipu

Abstract

Resumo: Micoplasmas hemotrópicos, ou hemoplasmas, são bactérias que se associam a hemácias de várias espécies de mamíferos, incluindo seres humanos. Estes microrganismos podem causar anemia hemolítica, mas infecções subclínicas são frequentemente relatadas e pouco se sabe a respeito das consequências e evolução de infecções crônicas por esses agentes. O presente estudo teve por objetivo verificar a ocorrência de micoplasmas hemotrópicos em mamíferos da área de preservação da Usina Hidrelétrica de Itaipu e realizar a identificação molecular da bactéria. Amostras de primatas não humanos e de quatis foram analisadas por técnicas de microscopia e métodos moleculares e foi avaliada se a infecção por hemoplasma estava associada a alterações clínicas e/ou laboratoriais, origem e sexo do animal. As amostras também foram testadas para outros microrganismos para verificar possíveis coinfecções, incluindo Anaplasma spp., Babesia spp., Mycoplasma haemofelis, 'Candidatus Mycoplasma haemominutum', 'Candidatus Mycoplasma turicensis', Hepatozoon spp., Leishmania spp., Neorickettsia risticii, Rickettsia rickettsii e Bartonella spp. Um total de 42 amostras foram analisadas, 14 de bugio-preto ( Alouatacaraya), 24 de macaco-prego ( 2 de sagui (?Callithrixjacchus) e 2 de quati ( Nasuanasua). Dentre os primatas 10/40 (25,0%) tiveram resultado positivo para hemoplasma. Animais nascidos em vida livre e bugios-pretos machos foram mais suscetíveis a apresentarem infecção. Apesar de alguns macacos apresentarem anemia, não houve associação significativa desta com a infecção por hemoplasma. As médias dos valores de proteína plasmática total e volume corpuscular médio estavam significativamente elevados em bugios-pretos positivos para hemoplasma. As sequências de Mycoplasma sp. encontradas nos bugios apresentaram maior identidade com a espécie 'Ca. M. kahanei', porém na análise filogenética ficaram posicionadas em ciados separados, dentro do grupo classificado como haemosuis. Também foi detectada, pela primeira vez, a ocorrência de hemoplasmas em quatis, evidenciados por microscopia de luz, sistema confocal e microscopia eletrônica de varredura. Os animais não apresentaram sinais clínicos, apesar de um deles estar infectado com Mycoplasma haemofelis, espécie considerada patogênica para gatos e já encontrada em ser humano. Em um dos quatis foi detectado Mycoplasma sp. semelhante a hemoplasmas encontrados em capivaras, mas na análise filogenética essas sequências foram colocadas em diferentes ciados, dentro do grupo haemofelis. Nenhum animal apresentou resultado positivo para os outros microrganismos testados. Três espécies de hemoplasmas foram detectadas nos mamíferos da área de preservação da Itaipu. Os impactos relacionados à cronicidade da infecção devem ser investigados em refúgios biológicos, reservas ecológicas e criadouros de animais silvestres, especialmente para aquelas espécies consideradas vulneráveis ou em risco de extinção. Além disso, deve-se considerar o potencial risco de transmissão para seres humanos, animais domésticos e outros animais silvestres. Palavras-chave: Micoplasma hemotrópico. Hemoplasma. Animais silvestres. Doenças transmitidas por vetores.

Abstract: Hemotropic mycoplasmas, or hemoplasmas, are erythrocyte-associated bacteria hosted by several mammalian species, including human beings. These agents can cause hemolytic anemia, but subclinical infections are frequently reported and little is known about consequences and evolution of chronic cases. The aim of the present study was to verify the occurrence of hemotropic mycoplasmas in mammals from the preservation area of the Itaipu Hydroelectric Power Plant and to perform the molecular identification of the bacteria. Nonhuman primates and coatis samples were analyzed by microscopy and molecular methods and the association between hemoplasma infection and clinical and/or laboratory abnormalities, origin or sex of the animal was evaluated. In order to investigate the presence of coinfections, samples were tested to other microorganisms, including Anaplasma spp., Babesia spp., Mycoplasma haemofelis, 'Candidatus Mycoplasma haemominutum', 'Candidatus Mycoplasma turicensis', Hepatozoon spp., Leishmania spp., Neorickettsia risticii, Rickettsia rickettsii and Bartonella spp. A total of 42 samples were analyzed, including 14 from black howler monkeys ( caraya), 24 from black-horned capuchins ( Sapajusnigritus), 2 from marmoset monkeys ( jacchus) and 2 from coatis ( Nasuanasua). Among nonhuman primates, (25.0%) tested positive for hemoplasma. Wild-born animals were more likely to test positive, as well as male black howler monkeys. Although some monkeys had anemia, no significant association was found between hemoplasma infection and anemia. The mean total plasma protein and mean corpuscular volume were significantly higher in black howler monkeys testing positive for hemoplasmas. The Mycoplasma sp. sequences found in the black howler monkeys were most closely related to 'Ca. M. kahanei', but in the phylogenetic analysis, they were positioned in separate clades, within the group classified as haemosuis. It was also detected, for the first time, the occurrence of hemoplasmas in coatis, evidenced by light microscopy, confocal and scanning electron microscopy. Both animals showed no clinical signs, although one of them was infected with Mycoplasma haemofelis, species considered pathogenic to cats and already found in human. A Mycoplasma sp. detected in one of the coatis appeared to be similar to hemoplasmas found in capybaras, but in the phylogenetic analysis they were positioned in different clades, within the haemofelis group. Samples tested negative for all the remaining microorganisms analyzed. Three hemoplasma species were detected in the mammals of the preservation area of Itaipu. Impacts related to the chronicity of hemoplasma infection should be investigated in wildlife sanctuaries, ecological reserves and breeding colonies of wild animals, especially for vulnerable species. In addition, the potential risk of transmission to human beings, domestic animals and other wild animals should be considered. Keywords: Hemotropic mycoplasma. Hemoplasma. Wild animal. Vector-borne disease.