Efeito do ácido graxo ômega-3 na cicatrização de anastomose colônica em ratos : estudo tensiométrico, densitometria e histologia do colágeno

Abstract

Resumo: Introdução: A utilização de ácidos graxos poliinsaturados de cadeia longa, tem sido estudado no contexto da cicatrização e regeneração tecidual principalmente em função de suas propriedades antiinflamatórias, antioncogênicas e imunorregulatórias. Estudos prévios demonstraram efeitos benéficos com o uso da imunonutrição enteral contendo diversos elementos (L-arginina, ômega-3 e oligoelementos), porém a ação individual de cada componente na cicatrização de anastomoses colônica ainda permanece desconhecida. O objetivo do presente trabalho é avaliar a influência da suplementação pré-operatória com ômega-3 na cicatrização de anastomoses colônicas de ratos eutróficos. Material e método: Foram utilizados 40 ratos Wistar (Rattus norvegicus albinus, Roentia Mammalia), machos adultos, com peso de 234,4±22,3 gramas, provenientes do Biotério da Universidade Estadual de Maringá. Os animais foram alojados individualmente e divididos em 2 grupos principais recebendo ração ad libitum nas quatro semanas anteriores ao procedimento. Nos sete dias que antecederam ao cirúrgico, o grupo 1 um recebeu suplementação de azeite de oliva e o grupo 2, ômega-3 na forma de emulsões isocalóricas e isovolumétricas na dose de 100 mg/kg/dia. Nos dois grupos a suplementação foi realizada através de gavagem orogástrica sem anestesia, sendo submetidos a duas colotomias seguidas de colorrafia. No 5o PO os ratos foram sacrificados. Foram analisados: evolução do peso; morbidade e mortalidade; avaliação tensiométrica da anastomose colônica;histologia e densitometria do colágeno. A análise estatística foi realizada por meio dos testes t de Student, Mann- Whitney, teste Exato de Fisher e teste Z para comparação de proporções, com p<0,05. Resultados: houve deiscência de anastomose em 4 animais no grupo GAO e 4 no grupo GOM. A taxa de mortalidade no grupo GAO foi de 35,0% (n=7) e 10,0% (n=2) no grupo GOM, com p=0,1973. Não houve difereça na média de peso no início do experimento, no 7o, 14o, 21o dia, no dia da cirurgia e no dia do sacrifício, respectivamente. O valor da força máxima de tração do grupo GAO foi de 1,9±0,3 N e para o grupo GOM 1,7±0,2 com p = 0,357. Observou-se, contudo, uma maior quantidade de colágeno tipo I significativa (p=0,0126) no grupo GOM em relação ao grupo GAO. O Índice de Maturação do Colágeno (IMaC) foi estabelecido para os grupos (GAO - 1,74±0,71; GOM - 1,67±0,5 não sendo observado diferença estatística em relação às médias entre os grupos (p=0,719). Conclusões: A suplementação pré-operatória com ômega-3 está associado a aumento no depósito de colágeno do tipo I nas anastomoses colônicas em ratos no 5o PO. Não foram identificadas diferenças na força de ruptura ou no Índice de Maturação do colágeno. Nas condições do presente estudo foi verificado a presença de maior quantidade de colágeno tipo I nas anastomoses de ratos suplementados com ácido graxo ômega-3. Palavras-chave: Ômega-3. Cicatrização de feridas. Anastomose colônica. Tensiometria. Densitometria do colágeno. Ratos.

Abstract: Background: The use of long-chain polyunsaturated fatty acids, has been studied in the context of healing and tissue regeneration mainly due to its anti-inflammatory, immunoregulatory antioncogenic properties. Previous studies have demonstrated beneficial effects with the use of enteral immunonutrition containing various elements (L-arginine, omega-3, trace elements), but the individual action of each component in the healing of colonic anastomosis remains unclear. The aim of this study is to evaluate the influence of preoperative supplementation with omega-3 fatty acids in the healing of colonic anastomoses of normal weight mice. Methods: 40 Wistar rats (Rattus norvegicus albinos, Roentia Mammalia), adult male, weighing 234.4 ± 22.3 grams from the vivarium of the Universidade Estadual de Maringá. The animals were aclimmated individually and divided into two main groups receiving ad libitum in the four weeks prior to the procedure. Seven days prior to surgery, group 1 one received olive oil supplementation and group 2, omega-3 as an isocaloric and isovolumetric emulsions at a dose of 100 mg / kg / day. Both groups received the fatty acids suplementation through orogastric gavage without anesthesia and submitted to two consecutive enteral anastomosis, right and left colon, respectively. In the fifth PO, rats were sacrificed. We evaluated the evolution of weight; morbidity and mortality; strain, histology and densitometry of collagen, of colonic anastomosis. Statistical analysis was performed using the Student t test, Mann-Whitney test, Fisher's exact test and Z-test to compare proportions, with p <0.05. Results: there was anastomotic leakage in 4 animals in each group. The mortality rate in the GAO group was 35.0% (n = 7) and 10.0% (n = 2) in the GOM group, with p = 0.1973. There was no diference in the average weight at the beginning of the experiment, on the 7th, 14th, 21st day, the day of surgery and the day of sacrifice, respectively. The value of the maximum tensile strength of the GAO group was 1.9 ± 0.3 N and the GOM group 1.7 ± 0.2, p = 0.357. There was, however, a larger amount of type I collagen (p = 0.0126) in the GOM group. The maturation index Collagen (CMI) was established for groups (GAO - 1.74 ± 0.71; GOM - 1.67 ± 0.5; p=0,719) and it was not observed difference between them. Conclusions: Preoperative supplementation with omega-3 is associated with increased collagen deposition of type I fibers in colonic anastomoses in rats on the 5th PO. No differences were observed in the breaking strength or collagen maturation index. Key-words: Omega-3. Wound healing. Colonic anastomosis. Tensiometers. Collagen densitometry. Rats.