MicroRNAs miR-142-5p, 146a-5p e miR150-5p no câncer de mama : potenciais biomarcadores plasmáticos e estudo de efeitos funcionais do miR-146a-5p

Abstract

Resumo: No Brasil foram estimados para 2020-2022 cerca de 61,61 casos de câncer de mama (CM) a cada 100 mil mulheres. Políticas públicas como a mamografia juntamente com análises histológicas e moleculares têm como principal objetivo o diagnóstico precoce da doença. Nos últimos anos, diferentes métodos vêm sendo desenvolvidos para auxiliar também no prognóstico e abordagem terapêutica. Nesse cenário, a identificação de novos biomarcadores, assim como de procedimentos menos invasivos, como a biópsia líquida, vem ganhando espaço. Os miRNAs são explorados no âmbito clínico por atuarem diretamente na regulação da expressão gênica. Além disso, são observados livres e carregados por vesículas extracelulares (VEs) nos fluídos corporais como sangue, facilitando a obtenção. Diante disso, o presente estudo selecionou, a partir de dados públicos e trabalhos anteriores do grupo, três miRNAs (miR-142-5p, miR-146a-5p, miR-150-5p) para avaliação em plasma de pacientes com câncer de mama. Dentre eles, o miR-142-5p apresentou diferença de expressão significativa, sendo menos expresso nas pacientes quando comparadas aos controles (p = 0,0349), demonstrando um potencial diagnóstico. A expressão do miR-150-5p nesse grupo de pacientes não apresentou diferenças de expressão. O papel do miR 146a-5p na patogênese mamária foi explorado através de ensaios funcionais na linhagem MCF-7. A morte por apoptose foi reduzida após o aumento da expressão desse miRNA (p < 0,0001) enquanto observou-se aumento na capacidade de formação de colônias (p = 0,0013), características essenciais para a progressão do CM. Conjuntamente, a expressão da catalase (CAT), um alvo predito de miR-146a 5p, foi avaliada. A análise por western blotting demonstrou que a expressão de CAT acompanhou a maior expressão do miRNA na linhagem MCF-7, indicando uma relação entre ambos, mas que precisa ser mais explorada uma vez que há poucas informações na literatura. Portanto, o presente estudo sugere um importante papel dos miRNAs miR-142-5p e miR-146a-5p no diagnóstico e prognóstico do CM contribuindo para a geração de informações sobre essas moléculas e servindo de impulso para pesquisas futuras.

Abstract: In Brazil, around 61.61 cases of breast cancer (BC) were estimated for 2020-2022 for every 100,000 women. Therefore, public policy such as mammograph together with histological and molecular analysis have as their main objective the early diagnosis of the disease. In recent years, different methods have been developed to also help with prognosis and therapeutic approach. In this scenario, the identification of new biomarkers and minimally invasive procedures, such as liquid biopsy, has been increased. The miRNAs are explored in the clinical scope for acting directly in the regulation of gene expression. Besides, they are observed free and carried by extracellular vesicles (EVs) in body fluids such as blood, making it easier to obtain. Therefore, the present study selected, from public data and previous studies of the group, three miRNAs (miR-142-5p, miR-146a-5p, miR-150-5p) for evaluation in plasma of BC patients. Among them, the miR-142-5p showed a significant difference in expression, being less expressed in patients when compared to controls, demonstrating a diagnostic potential. miR-150-5p expression in this sample does not exhibit differences between groups. The role of miR-146a-5p in BC pathogenesis was explored through functional assays in the MCF-7 cell line. Death by apoptosis was reduced after the increase in the expression of miR-146a-5p while an increase in the ability to form colonies was observed, both essential characteristics for BC progression. In parallel, catalase (CAT) expression, a predicted target of miR-146a-5p, was evaluated. Western blotting analysis showed that CAT expression accompanied the miRNA overexpression in MCF-7 lineage, suggesting a relationship between them. Nonetheless, these results need to be further explored since there is little information in the literature. Therefore, the present study suggests the important role that miR-142 5p and miR-146a-5p can play in the diagnosis and prognosis of BC, contributing to the generation of information about these molecules and serving as an impetus for future research.