Identificação humana e fatores que influenciam a deposição e recuperação de DNA em amostras obtidas por contato

Abstract

Resumo: A análise de sequências de DNA vem sendo uma ferramenta útil para as investigações criminais, permitindo a identificação de criminosos e vítimas. O DNA de contato é cada vez mais utilizado nas rotinas forenses, porém pouco é conhecido a respeito dos fatores determinantes para a deposição de DNA e sua recuperação em objetos. O presente estudo se destinou a avaliar se há diferença na deposição de DNA de acordo com a ancestralidade dos indivíduos em diferentes superfícies, sendo porosas ou não porosas, e se a atividade física são fatores determinantes para a deposição, além da comparação entre sexos. Para tanto, foram analisados grupos de indivíduos com diferentes componentes de ancestralidades, sendo estes de origem predominantemente: europeia, africana, oriental e miscigenados. Foram coletadas amostras de 56 indivíduos, sendo 28 homens e 28 mulheres com idade entre 18 e 50 anos, saudáveis e não aparentados. Os participantes manipularam um dispositivo de coleta com 2 superfícies porosas (tecido de algodão e papel) e não porosas (metal e plástico) por 15 segundos sem lavagem de mãos nos 30min anteriores à coleta. As superfícies foram retiradas, o DNA foi extraído por método orgânico e quantificado por PCR em tempo real. A amplificação dos marcadores de interesse foi feita com o kit GlobalFiler™ PCR Amplification (Life Technologies Corporation, CA, USA) e PowerPlex® Fusion 6C System (Promega® Corporation, WI, USA). Os perfis genéticos foram observados por meio de genotipagem por eletroforese capilar e os resultados analisados por testes não paramétricos de comparação de medianas. Um maior número de alelos pode ser identificado em indivíduos com ancestralidade predominantemente europeia (77,7%) e africana (57,4%) em comparação com asiáticos (18,7%) e miscigenados (30,4%) com valor de p<0,0001. Além disso, constatou-se que em metal recupera-se menos DNA em comparação com papel (p<0,0471), plástico (p<0,0165) e tecido (p<0,0013). Indivíduos do sexo masculino depositaram mais DNA do que do sexo feminino (p<0,030), porém em relação à presença ou ausência de suor não houve diferença significativa. O conhecimento prévio da influência desses fatores pode auxiliar na padronização de procedimentos de coleta e ensaios na casuística forense.

Abstract: DNA analysis has been a helpful tool of criminal investigation, allowing the identification of aggressors and victims. Touch DNA is increasingly used in forensic routines, but little is known about the determinant factors for the deposition and recovery of touch DNA in an object. The present study analyzed the differences in DNA deposition according to the ancestry of individuals on different surfaces, and if sweat production are determinant factors for deposition, besides the comparison between male and female. For that, groups of individuals with different ancestral components were analyzed, being predominantly European, African, Eastern and mixed race. Samples were collected from 56 individuals, being 28 men and 28 women aged between 18 and 50 years, healthy, unrelated. Participants handled a device with 2 porous (cotton and paper) and non-porous (metal and plastic) for 15 seconds without hand washing in the 30min prior to collection. The surfaces were removed, DNA was extracted by organic method and quantified by real-time PCR. Amplification of the markers was done with the GlobalFiler ™ PCR Amplification kit (Life Technologies Corporation, CA, USA) and PowerPlex® Fusion 6C System (Promega® Corporation, WI, USA). The genetic profiles were observed through capillary electrophoresis genotyping and the results analyzed by nonparametric tests for comparison of medians. A greater number of alleles were recovered in individuals with predominantly European ancestry (77.7%) and African (57.4%) compared to Asian (18.7%) and mixed (30.4%) with p <0,0001. In addition, it was found that in metal, less DNA was recovered in comparison with paper (p <0.0471), plastic (p <0.0165) and tissue (p <0.0013). Male subjects deposited more DNA than female (p <0030), but in relation to the presence or absence of sweat there was no significant difference. The presence of these influencing factors may contribute to the standardization of collection and testing procedures in forensic casuistry.