Avaliação da expressão do miR-142-5p e miR-150-5p em carcinomas primários de mama dos subtipos Luminal A e triplo negativo

Abstract

Resumo: O câncer de mama é o segundo mais incidente no mundo com 2,1 milhões de casos até o e 2018. Novas perspectivas para o diagnóstico, direcionamento terapêutico e prognóstico tem o através da análise de miRNAs. Os miRNAs são uma classe de pequenas moléculas de RNA odificadoras com aproximadamente 18–25 nucleotídeos que desempenham papel importante senvolvimento de diversas doenças humanas, incluindo o câncer. Dentre os miRNAs, estão possíveis candidatos para biomarcadores do câncer de mama, os miR-142-5p e miR-150-5p. etivo geral deste trabalho é verificar a expressão dos miR-142-5p e miR-150-5p em tecido al e não tumoral (adjacente ao tumor) de mulheres com carcinomas primários de mama e ar se há concordância com os resultados de expressão obtidos na biópsia liquida, buindo, assim, na avaliação destes como potenciais biomarcadores. Setenta e três amostras ais e 60 não-tumorais (CT) foram submetidas à extração de RNA total, incluindo mRNAs e As, realizada por meio do kit comercial miRNeasy® Mini Kit (Qiagen). As reações de PCR tativa em tempo real (RT-qPCR) para avaliação dos níveis de expressão dos miRNAs foram das por meio de ensaios TaqMan®. Além disso, os bancos de Dados "The Cancer Genome (TCGA) e "OncomiR Cancer Database" (OMCD) foram utilizados para análise in silico. A e de expressão dos miRNAs miR-142-5p e miR-150-5p foi realizada em todas as 133 ras. O miR-142-5p apresentou nível de expressão mais elevado nas amostras de tecido al quando comparadas com CT (p<0,05). Foi realizada análise comparando o subtipo luminal A triplo negativo (TN). O miR-142-5p apresentou alto nível de expressão no subtipo TN quando arado ao grupo CT (p<0,05). O miR-150-5p demonstrou baixo nível de expressão nas amostras ais quando comparadas ao grupo CT (p<0,005). Na análise entre os subtipos, o miR-150-5p é cativamente menos expresso no subgrupo LA quando comparado ao CT (p<0,005). A ssão do miR-142-5p apresentou comportamento semelhante aos resultados obtidos na biópsia (análise em microvesículas) na comparação entre tumores e controles, contribuindo, assim, valiação destes como potenciais biomarcadores para diagnóstico. Esse achado é pondente ao encontrado na análise in silico, porém é divergente do padrão predominante na ura. Em resumo, não encontramos um padrão concordante com os resultados provenientes da a líquida (com exceção da comparação entre amostras tumorais e não-tumorais) ou da maioria sultados publicados, em especial para o miR-150-5p demonstrando a necessidade de maior nização nos estudos envolvendo miRNAs para que possa ser finalmente demonstrado seu cial para utilização na prática clínica.

Abstract: Cancer is the second most incident in the world with 2.1 million cases until 2018. New ectives for diagnosis, therapeutic targeting and prognosis have emerged through the analysis of As. MiRNAs are a class of small non-coding RNA molecules with approximately 18–25 otides that play an important role in the development of several human diseases, including r. Among the miRNAs, the miR-142-5p and miR-150-5p are possible candidates for biomarkers ast cancer, The general objective of this work is to verify the expression of miR-142-5p and 50-5p in tumoral and non-tumoral tissue (adjacent to the tumor) of women with primary breast omas and to verify if there is agreement with the expression results obtained in liquid biopsy, ontributing to their evaluation as potential biomarkers. Seventy-three tumor and 60 non-tumor samples were subjected to total RNA extraction, including mRNAs and miRNAs, performed the commercial miRNeasy® Mini Kit (Qiagen). The real-time quantitative PCR reactions (RT- ) to evaluate the expression levels of the miRNAs were performed using TaqMan® assays. In on, the databases "The Cancer Genome Atlas" (TCGA) and "OncomiR Cancer Database" D) were used for in silico analysis. Expression analysis of miRNAs miR-142-5p and miR-150- s performed on all 133 samples. MiR-142-5p showed a higher level of expression in tumor samples when compared to CT (p <0.05). An analysis was performed comparing the luminal pe A (LA) and triple negative (TN). MiR-142-5p showed higher level of expression in the TN pe when compared to the CT group (p <0.05). MiR-150-5p demonstrated lower level of ssion in tumor samples when compared to the CT group (p <0.005). In the analysis between pes, miR-150-5p was significantly less expressed in the LA subgroup when compared to CT (p 5). The miR-142-5p expression showed a behavior similar to the results obtained in liquid analysis (microvesicles) when comparing tumors and controls, thus contributing to their ation as potential biomarkers for diagnosis. This finding corresponds to that found in the in silico is, but it diverges from the predominant pattern in the literature. In summary, we did not find a n consistent with the results from liquid biopsy (except for the comparison between tumor and mor samples) or from most of the published results, especially for miR-150-5p demonstrating eed for a better standardization in studies involving miRNAs so that its potential for use in l practice can finally be demonstrated.