Sensibilidade de isolados de Alternaria grandis da batateira do sul do Brasil a fungicidas

Abstract

Resumo: A cultura da batata no Brasil é frequentemente afetada pela pinta preta, uma doença foliar causada por diferentes espécies de fungos do gênero Alternaria. O controle químico é a medida mais utilizada para evitar os danos causados por esses patógenos. São utilizados fungicidas protetores, que apresentam baixo risco de perda de sensibilidade, e fungicidas sistêmicos, que possuem um modo de ação específico, aumentando as chances de seleção de isolados resistentes do patógeno ao longo do tempo. Informações sobre o comportamento de isolados de Alternaria spp. a fungicidas são escassas, principalmente no Sul do Brasil. O objetivo deste trabalho foi, portanto, estudar a sensibilidade desses isolados da cultura da batateira aos fungicidas ciprodinil (Unix®), pirimetanil (Mythos®), iprodiona (Rovral®) e procimidona (Sumilex®). Um total de 100 isolados foram coletados nas principais regiões produtoras de batata nos três estados do Sul: Paraná, Santa Catarina e Rio Grande do Sul. No laboratório, o fungo foi isolado indiretamente de folhas de batateira sintomáticas e, após a obtenção de culturas monospóricas, os isolados foram separados conforme a morfologia, onde conídios caracterizados como de tamanho grande e bicos longos foram utilizados neste estudo, totalizando 44 isolados. A identificação de Alternaria spp. foi realizada pela amplificação do DNA por PCR utilizando primers para os genes tef-1? e gapdh, sequenciamento e análise filogenética. A sensibilidade dos isolados aos fungicidas foi determinada através de testes de CE50 (concentração efetiva para inibir 50% do crescimento do fungo), utilizando-se as doses 0; 0,0001; 0,001; 0,01; 0,1; 1 e 10 ug.ml-1 para ciprodinil e pirimetanil, e as 0; 0,5; 1,0; 2,5; 5,0; 7,5; e 10 ug.ml-1. para iprodiona e procimidona. Dos 44 isolados coletados, todos foram identificados como espécies de Alternaria grandis. Os valores de CE50 variaram de 0,02 a >100 ug.ml?¹, 0,9 a >100 ug.ml-1, 0,08 a 9,15 ug.ml-1 e 1,27 a >100 ug.ml-1para os fungicidas ciprodinil, pirimetanil, iprodiona e procimidona, respetivamente. Verificou-se uma diferença de sensibilidade entre os isolados aos fungicidas estudados. Desta forma, este estudo permite compreender o panorama atual da sensibilidade da Alternaria grandis aos quatro fungicidas estudados possibilitando, posteriormente, delinear novas estratégias de manejo da resistência, principalmente nas regiões onde os isolados apresentaram sensibilidade reduzida, visando a manutenção do potencial produtivo da cultura e a longevidade da utilização destes fungicidas.

Abstract: The potato crop in Brazil is frequently affected by early blight, a leaf disease caused by different species of fungi from the Alternaria genus. Chemical control is the most widely used measure to prevent the damage caused by these pathogens. Protective fungicides are used, which present a low risk of loss of sensitivity, and systemic fungicides, which have a specific mode of action acting directly on the pathogen, increasing the chances of the fungus becoming resistant to fungicides and resulting in the selection of resistant isolates of the pathogen over time. Information on the behavior of Alternaria spp. isolates to fungicides are scarce, especially in southern Brazil. The aim of this work was therefore to study the sensitivity of these isolates in potato crops to the fungicides cyprodinil (Unix®), pyrimethanil (Mythos®), iprodione (Rovral®) and procymidone (Sumilex®). A total of 100 isolates were collected from the main potato producing regions in the three southern states of Paraná, Santa Catarina and Rio Grande do Sul. In the laboratory, the fungus was isolated indirectly from symptomatic potato leaves and, after obtaining monospore cultures, the isolates were separated according to morphology, where conidia characterized as large and long beaked were used in this study, totalling 44 isolates. The identification of Alternaria spp. was performed by DNA amplification by PCR using specific primers for the tef-1? and gapdh genes, sequencing and phylogenetic analysis. The sensitivity of the isolates to fungicides was determined through EC50 tests (effective concentration to inhibit 50% of fungal growth), using doses 0; 0.0001; 0.001; 0.01; 0.1; 1 and 10 ug.ml-¹ for cyprodinil and pyrimethanil, and 0; 0.5; 1.0; 2.5; 5.0; 7.5; and 10 ug.ml-¹. for iprodione and procymidone. Of the 44 isolates collected, all were identified as Alternaria grandis species. The CE50 values ranged from 0.02 to >100 ug.ml?¹, 0.9 to >100 ug.ml-1, 0.08 to 9.15 ug.ml-1 and 1.27 to >100 ug.ml?¹ for the fungicides cyprodinil, pyrimethanil, iprodione and procymidone, respectively. There was a difference in sensitivity between the isolates to the fungicides studied. In this way, this study provides an overview of the current sensitivity of Alternaria grandis to the four fungicides studied, making it possible to outline new resistance management strategies, especially in regions where the isolates showed reduced sensitivity, with a view to maintaining the crop's productive potential and the longevity of the use of these fungicides.