O repertório dos genes KIR em pacientes com lesões precursoras do câncer do colo do útero

Abstract

Resumo: O câncer cervical (CC) está entre as neoplasias de maior prevalência entre as mulheres, especialmente em países com baixos índices socioeconômicos. Infecções persistentes pelo HPV oncogênico são a principal causa para o desenvolvimento do CC. As células Natural Killer (NK) protagonizam importante papel citotóxico dirigido a células infectadas por vírus, sob estresse celular e células-alvo tumorais. O controle de sua ação citotóxica advém de sinais provenientes da interação de receptores inibidores e ativadores expressos em sua membrana, em especial os receptores KIR (Killer immunoglobulin like receptor) e sua interação com ligantes HLA expressos nas células alvo. O presente estudo teve como objetivo investigar e comparar a variabilidade individual na composição do repertório de genes KIR, genótipos/haplótipos e suas frequências, em mulheres com lesões intraepiteliais cervicais de grau 2 e 3 e controles HPV (+) e HPV (-), bem como sua associação com proteção ou suscetibilidade à infecção pelo HPV de alto risco e no desenvolvimento das lesões precursoras do câncer do colo do útero. Foi selecionada uma amostragem randomizada totalizando 447 mulheres assim classificadas: 90 mulheres com diagnóstico de NIC2, 94 mulheres com NIC3 e dois grupos controles compostos por 70 mulheres HPV (+) e 193 mulheres HPV (-), com citologia cervical normal. O repertório KIR foi definido por amplificação multiplex do DNA com a utilização de pares de primers sequências específicas (PCR-SSP). Ao todo 78 genótipos foram encontrados neste estudo, sendo que 5 deles ainda não se encontram catalogados na AFND para a população brasileira. Foram feitas análises comparativas entre os grupos e observou-se que pelo critério de presença de infecção, o gene KIR2DS2 (p<0,001) apresentou frequência maior nas infectadas e o gene KIR2DL2 (p=0,03) no grupo das não infectadas. Pela análise das mulheres HPV (+) estratificadas pela presença ou não de lesão precursora, os genes KIR2DL2, KIR2DL5, KIR2DS1 e KIR2DS2 apresentaram maiores frequências no grupo com lesão (p<0,001). Na análise comparativa entre os grupos HPV (+) sem lesão e HPV (-), os genes KIR2DL2, KIR2DL5 e KIR2DS1 apresentaram maiores frequências nas não infectadas (p<0,001). Tanto nos grupos de mulheres com lesões precursoras quanto nos grupos de mulheres sem lesão (infectadas ou não) o genótipo ativador Bx mostrou-se mais frequente, porém sem diferença estatística entre os grupos. Lesões precursoras NIC2 e NIC3 não apresentaram diferença relativamente a nenhum dos genes. Em conclusão, pelo presente estudo sugere-se que o gene ativador KIR2DS1 seria capaz de conferir proteção para a infecção pelo HPV, mas quando a infecção já está presente, assim como com o gene KIR2DS2, ele está positivamente associado à presença de lesão precursora do câncer cervical. Quanto aos genes inibidores KIR2DL2 e KIR2DL5 sugere-se que estejam associados com proteção à infecção pelo HPV, porém quando a infecção está presente, estão positivamente associados ao desenvolvimento da lesão precursora

Abstract: Cervical cancer (CC) is one of the most prevalent neoplasms among women, especially in countries with low socioeconomic indices. Persistent infections with oncogenic HPV are the main cause of the development of CC. Natural Killer (NK) cells play an important cytotoxic role directed at cells infected by viruses, under cellular stress, and tumor target cells. The control of its cytotoxic action comes from signals from the interaction of inhibitory and activating receptors expressed on its membrane, especially KIR (Killer immunoglobulin-like receptor) receptors and their interaction with HLA ligands expressed on target cells. The present study aimed to investigate and compare individual variability in the composition of the KIR gene repertoire, genotypes/haplotypes, and their frequencies, in women with grade 2 and 3 cervical intraepithelial lesions and HPV (+) and HPV (-) controls, as well as its association with protection or susceptibility to high-risk HPV infection and the development of precursor lesions of cervical cancer. A randomized sample was selected totaling 447 women classified as follows: 90 women diagnosed with CIN2, 94 women with CIN3, and two control groups composed of 70 HPV (+) women and 193 HPV (-) women with normal cervical cytology. The KIR repertoire was defined by multiplex DNA amplification using sequence-specific primer pairs (PCR-SSP). In total, 78 genotypes were found in this study, 5 of which are not yet cataloged in the AFND for the Brazilian population. Comparative analyses were carried out between the groups, and it was observed that according to the criterion of the presence of infection, gene KIR2DS2 (p<0,001) presented higher frequency in the infected group, and gene KIR2DL2 (p=0,03) in uninfected group. By analyzing HPV (+) women stratified by the presence or absence of precursor lesions, the genes KIR2DL2, KIR2DL5, KIR2DS1, and KIR2DS2 were more frequent in the group with lesions (p<0,001). In the comparative analysis between the HPV (+) group without lesion and HPV (-), KIR2DL2, KIR2DL5, and KIR2DS1 genes had higher frequencies in the uninfected group (p<0,001). Both in the group of women with precursor lesions and those without lesions (infected or not), the Bx activating genotype was more frequent, but without statistical difference. CIN2 and CIN3 precursor lesions showed no difference concerning any of the genes. In conclusion, the present study suggests that the activating gene KIR2DS1 would be capable of protecting against HPV infection. Still, when the infection is already present, as it also happens with the KIR2DS2 gene, it is positively associated with the presence of cancer precursor lesions. Regarding genes KIR2DL2 and KIR2DL5 it is suggested that they confer protection against HPV infection, however, when the infection is present, they are positively associated with the development of the precursor lesion