Análise da micobiota leveduriforme cutânea em crianças com dermatite atópica

Abstract

Resumo: A disbiose do microbioma cutâneo associada ao funcionamento inadequado da barreira cutânea e à desregulação imunológica são características da Dermatite Atópica (DA). Estudos apontam que a diversidade microbiana fúngica é significativamente maior na pele de pacientes com DA quando comparada a diversidade microbiana fúngica em controles com peles saudáveis. O objetivo deste estudo foi determinar o microbioma fúngico (micobioma) leveduriforme cutâneo das crianças com DA; bem como comparar com crianças sem DA e determinar os fatores relacionados à distribuição das espécies de acordo com a idade e sexo dos pacientes, e gravidade da doença. Estudo transversal, prospectivo que incluiu 80 pacientes com DA (GDA) e 50 pacientes controles com peles saudáveis (GsDA), conduzido em um hospital terciário no sul do Brasil. Foram incluídas no GDA crianças e adolescentes menores de 18 anos de idade, com diagnóstico clínico de DA; sem outras doenças crônicas que não as da tríade atópica. Foram excluídos pacientes que utilizaram antifúngicos tópicos nas 2 semanas anteriores ao estudo; pacientes que usaram antifúngico oral nas 4 semanas anteriores ao estudo; pacientes com qualquer doença de origem fúngica. Constituíram o GsDA crianças da mesma faixa etária sem DA, com diagnóstico de hipotireoidismo congênito controlado, sem sintomas clínicos e laboratoriais. Todos os pacientes tiveram avaliação dermatológica, e no GDA a gravidade da DA foi estabelecida pelo índice Severity Scoring of Atopic Dermatitis (SCORAD) e Eczema Area and Severity Index (EASI). A identificação fúngica foi realizada por microscopia direta, cultura e biologia molecular, utilizando amostras de escamas provenientes de raspados de pele da região frontal, cervical, fossas cubitais e poplíteas, com ou sem lesão. Leveduras foram identificadas por sequenciamento no GDA em 47,5% dos casos comparado a 0,0% no GsDA (p < 0,001). As leveduras mais prevalentes foram a Candida parapsilosis (27,5%) e a Rhodotorula mucilaginosa (23,7%). Malassezia furfur correspondeu a 6,2%. Não houve diferença significativa na frequência de positividade de colonização por leveduras entre os sexos (p = 0,46), mas Malassezia furfur foi encontrada apenas em meninas (6,3%). A probabilidade de colonização por leveduras foi maior com o aumento da idade dos pacientes, com 60 meses foi de 40% passando a 60% com 120 meses e de 80% com 220 meses (p = 0,09). Observou-se maior frequência de colonização na região cervical (12,5%), seguida da frontal e poplítea. Não houve variação significativa na probabilidade de colonização leveduriforme positiva conforme o SCORAD (p = 0,23) nem conforme o EASI (p = 0,53). Também não foi possível relacionar as espécies de forma específica com a distribuição das lesões, idade, sexo e gravidade da doença. Concluímos que a há maior frequência de colonização e maior diversidade de espécies leveduriformes no micobioma cutâneo das crianças com DA comparadas aos controles saudáveis

Abstract: Dysbiosis of the skin microbiome associated with inadequate functioning of the skin barrier and immune dysregulation are characteristics of Atopic Dermatitis (AD). Studies show that fungal microbial diversity is significantly higher in the skin of AD patients when compared to fungal microbial diversity in controls with healthy skin. The aim of this study was to determine the cutaneous yeast fungal microbiome (mycobiome) of children with AD; as well as to compare with children without AD and to determine the factors related to the distribution of the species according to the age and sex of the patients, and the severity of the disease. Cross-sectional, prospective study that included 80 patients with AD (GDA) and 50 control patients with healthy skin (GsDA), conducted in a tertiary hospital in southern Brazil. Children and adolescents under 18 years of age, with a clinical diagnosis of AD, were included in the GDA; no chronic diseases other than those of the atopic triad. Patients who used topical antifungals in the 2 weeks prior to the study were excluded; patients who used oral antifungal in the 4 weeks prior to the study; patients with any disease of fungal origin. The GsDA consisted of children of the same age group without AD, diagnosed with controlled congenital hypothyroidism, without clinical and laboratory symptoms. All patients had a dermatological evaluation, and in the GDA the severity of AD was established by the Severity Scoring of Atopic Dermatitis (SCORAD) and Eczema Area and Severity Index (EASI). Fungal identification was performed by direct microscopy, culture and molecular biology, using scale samples from skin scrapings from the frontal, cervical, cubital and popliteal fossa, with or without lesion. Yeasts were identified by sequencing in the GDA in 47.5% of cases compared to 0.0% in the GsDA (p < 0.001). The most prevalent yeasts were Candida parapsilosis (27.5%) and Rhodotorula mucilaginosa (23.7%). Malassezia furfur corresponded to 6.2%. There was no significant difference in the frequency of positive yeast colonization between the sexes (p = 0.46), but Malassezia furfur was found only in girls (6.3%). The probability of colonization by yeast was higher with increasing age of the patients, at 60 months it was 40%, increasing to 60% at 120 months and 80% at 220 months (p = 0.09). A higher frequency of colonization was observed in the cervical region (12.5%), followed by the frontal and popliteal regions. There was no significant variation in the probability of positive yeast colonization according to SCORAD (p = 0.23) or according to EASI (p = 0.53). It was also not possible to specifically relate the species to the distribution of lesions, age, sex and disease severity. We conclude that there is a higher frequency of colonization and greater diversity of yeast species in the cutaneous mycobiome of children with AD compared to healthy controls