Estudo morfoanatômico, fitoquímico, capacidade antioxidante e atividades biológicas : alelopática, farmacológica e de toxicidade de Monteverdia evonymoides (Reissek) Biral

Abstract

Resumo: Monteverdia evonymoides (Reissek) Biral, popularmente conhecida como coração-de-bugre, é uma espécie nativa do Brasil e está presente nos domínios fitogeográficos do Cerrado e Mata Atlântica. Seus exemplares na maioria são de grande porte e fonte de compostos bioativos. O objetivo do presente estudo foi avaliar os parâmetros farmacopeicos, estudo morfoanatômico e fitoquímica de folhas e caules de M. evonymoides; isolar e identificar compostos bioativos e avaliar as propriedades antioxidantes e atividades biológicas do extrato bruto e frações. O material vegetal foi coletado em Curitiba, Paraná, Brasil. Após a coleta uma parte foi direcionada ao estudo morfoanatômico, histoquímico e microscopia eletrônica por varredura. Foram identificadas as características morfoanatômicas presentes no gênero, bem como a presença compostos fenólicos, compostos lipofílicos e lignina. Outra parte foi direcionada a preparação e realização dos testes físico-químicos, incluindo teor de sólidos, teor de água e teor de cinzas. Os parâmetros farmacopeicos analisados estão de acordo com a Farmacopeia Brasileira 6ª edição. Em seguida foram realizados o screening fitoquímico, paralelamente foram obtidos os extratos brutos etanólico e cetônico de folhas e caules (EBF e EBC) em aparelho de Soxhlet, ambos foram direcionados ao particionamento com solventes de polaridade crescente. Foram conduzidas cromatografias em coluna e RMN de ¹H e ¹³C, a fim de identificar substâncias bioativas. O EBF e EBC hidroalcoólico apresentou rendimento de 14,74% e 9,46% respectivamente. O EBF e EBC cetônico apresentou rendimento de 9,46% e 6,43% respectivamente. A partir de seu particionamento foram obtidas 4 frações semipurificadas (hexano, clorofórmio, acetato de etila e remanescente) de cada extrato. Da fração clorofórmio folhas (FCF) foi isolado uma mistura de esteroides campesterol, estigmasterol e ß-sitosterol. Da fração clorofórmio folhas cetônico (FCFC) foi isolado uma mistura de friedelina e friedelinol. Extrato bruto e frações hidroalcóolico de folhas e caules foram direcionadas doseamento de fenóis totais (TPC) pelo método de Folin Ciocalteou; doseamento de flavonoides totais (TFC) e às atividades antioxidantes pelos métodos de ABTS, DPPH e FRAP. Destaque para FAEC que apresentou TPC e TFC mais elevados e potencial antioxidante em todos os testes, seguida do EBC. Extrato bruto e frações hidroalcóolico de folhas e caules foram direcionadas as atividades biológicas. Foram avaliados quanto a toxicidade frente à Artemia franciscana e potencial hemolítico. Nos ensaios biológicos não foram observadas toxicidade frente a A. salina e atividade hemolítica. O efeito alelopático foi verificado em Allium cepa e Lactuca sativa. No teste alelopático foi possível observar influência inibitória em ambas as amostras. Foram submetidos a avaliação de atividades biológicas: potencial larvicida contra Aedes aegypti; atividade antimicrobiana. Extratos e frações apresentaram potencial larvicida contra A. aegypti. Na análise da atividade antimicrobiana não foi observada atividade frente as cepas testadas (S. aureus, E. coli, P. aeruginosa e C. albicans) nas condições préestabelecidas. O EBF foi submetido a ensaios farmacológicos de nocicepção induzida pela injeção intraplantar de formalina, no qual a atividade antinoceptiva foi observada. EBF e EBC foram submetidos ao ensaio de nocicepção induzido pela injeção intraplantar de carragenina, porém os extratos não apresentaram diferencia estatística significativa. Os resultados revelam que M. evonymoides apresenta segurança, atividade alelopática, potencial larvicida, atividade antioxidante e antinociceptiva

Abstract: Monteverdia evonymoides (Reissek) Biral, popularly known as buggy heart, is a species native to Brazil and is present in the Phytogeographical Domains of the Cerrado and Atlantic Forest. Most of its specimens are large and a source of bioactive compounds. The objective of the present study was to evaluate the pharmacopoeial parameters, morphoanatomical and phytochemical studies of leaves and stems of M. evonymoides; isolate and identify bioactive compounds and evaluate the antioxidant properties and biological activities of the crude extract and fractions. Plant material was collected in Curitiba, Paraná, Brazil. After collection, part was sent to morphoanatomical, histochemical and scanning electron microscopy studies. The morphoanatomical characteristics present in the genus were identified, as well as the presence of phenolic compounds, lipophilic compounds and lignin. Another part was directed at preparing and carrying out physical-chemical tests, including solids content, water content and ash content. The pharmacopoeial parameters analyzed are in accordance with the Pharmacopoeia 6th edition. Phytochemical screening was then carried out, in parallel the crude ethanolic and ketonic extracts of leaves and stems (EBF and EBC) were obtained in a Soxhlet apparatus, both were directed to partitioning with solvents of increasing polarity. Column chromatography and ¹H and ¹³C NMR were conducted in order to identify bioactive substances. The hydroalcoholic EBF and EBC presented yields of 14.74% and 9.46% respectively. The ketonic EBF and EBC showed yields of 9.46% and 6.43% respectively. From its partitioning, 4 semipurified fractions (hexane, chloroform, ethyl acetate and remainder) were obtained from each extract. A mixture of steroids campesterol, stigmasterol and ß-sitosterol was isolated from FCF. A mixture of friedelin and friedelinol was isolated from FCFC. Crude extract and hydroalcoholic fractions of leaves and stems were measured for total phenols (TPC) using the Folin Ciocalteou method; determination of total flavonoids (TFC) and antioxidant activities using the ABTS, DPPH and FRAP methods. Highlight for FAEC which presented higher TPC and TFC and antioxidant potential in all tests, followed by EBC. Crude extract and hydroalcoholic fractions of leaves and stems were directed to biological activities. They were evaluated for toxicity against Artemia franciscana and hemolytic potential. In biological tests, no toxicity was observed against A. franciscana and it did not present hemolytic activity. As for biological tests, the allelopathic effect was verified in monocotyledons (Allium cepa) and dicotyledons (Lactuca sativa). In the allelopathic test it was possible to observe an inhibitory influence in both samples. They were subjected to evaluation of biological activities: larvicidal potential against Aedes aegypti; antimicrobial, antifungal activity. Extracts and fractions showed larvicidal potential against A. Aegypti. In the analysis of antimicrobial activity, no activity was observed against the strains tested (S. aureus, E. coli, P. aeruginosa e C. albicans) under pre-established conditions. EBF was subjected to pharmacological trials of nociception induced by intraplantar injection of formalin, in which the antinoceptive activity was observed. EBF and EBC were subjected to a nociception test induced by intraplantar injection of carrageenan, but the extracts did not show a statistically significant difference. The results reveal that M. evonymoides presents safety, allelopathic activity, larvicidal potential, antioxidant and antinociceptive activity.