Analise da distribuição de celulas de linhagem melanocitica de aves com padrões distintos de pigmentação em diferentes estagios de desenvolvimento

Abstract

Resumo: A crista neural em embriões de ave, na região do tronco, origina duas subpopulações de células que migram através do embrião, seguindo por diferentes caminhos em momentos distintos. Uma primeira subpopulação de células sai do tubo neural migrando pela via ventral, diferenciando-se em estruturas do sistema nervoso periférico. Vinte e quatro horas após o início desta migração, uma segunda subpopulação de células sai do tubo, migrando pela via dorsolateral e se diferenciando em células do pigmento, os melanócitos. Aves como a Leghorn perdiz que apresentam padrões normais para a pigmentação, restringem o destino de melanócitos unicamente ao nível da pele, e aves como a mutante hiperpigmentada Sedosa japonesa, que apresentam um padrão alterado para a pigmentação mostram um acúmulo destas células distribuindo-se em órgãos internos, além da pele. O presente trabalho teve como objetivo, descrever, analisar e comparar a distribuição de células de linhagem melanocítica em aves das linhagens Leghorn perdiz e Sedosa japonesa. Para isto, embriões com 12 e 18 dias de desenvolvimento embriológico (estágios 38 e 44 de HH) e aves adultas tiveram alguns órgãos disseccionados e processados pelos métodos convencionais para microscopia de luz, mostrando que o acúmulo de melanócitos ocorre na grande maioria dos tecidos conjuntivos nos órgãos de Sedosas. A pigmentação nos órgãos de Sedosa progride com a idade, acelerando-se a partir do 18° dia no embrião. Além disso, investigamos a expressão espaço-temporal de moléculas da matriz extracelular nas vias de migração, em ambas as linhagens de aves, nos estágios 18, 20 e 22 do desenvolvimento embriológico, na região do tronco, que provavelmente agem inibindo a migração das células da crista neural de linhagem melanocítica: o sulfato de condroitina e glicoconjugados que reagem com o PNA. Os resultados mostraram que a expressão de sulfato de condroitina e de PNA é particular para cada ave, que a acentuada presença de moléculas inibitórias identificadas pelo PNA na área dorsal do tubo neural no estágio 18 do desenvolvimento embriológico em aves Sedosa sugere um papel no atraso na dispersão das células da C.N., e que a constante reação PNA+ na região ventral, em embriões de Leghorn perdiz, na região do tronco, nos estágios 18, 20 e 22, parece bloquear o povoamento desta área por melanócitos.

Abstract: The neural crest in avian embryos, in the trunk region, gives rise to two cell populations that migrate throughout the embryo, following different paths in distinct moments. The first cell population emerges from the neural tube, migrating along the ventral path and differentiating as structures of the peripheral nervous system. Twenty-four hours after the beginning of this migration, a second cell population leaves the neural tube, migrating within the dorsolateral path and differentiating into pigment cells, the melanocytes. Chickens like the Leghorn with normal pigmentation patterns restrict melanocytes' destiny to the skin, and chickens like the hyperpigmented mutant Silkie with alterated pigmentation patterns show melanocyte accumulation, distributed in internal organs, besides the skin. The aim of the present study was to describe, analyze and compare the distribution of melanocytic lineage cells in Leghorn and Silkie chickens. Embryos at 12 and 18 days of embryonic development (stages 38 and 44 HH) and adult chickens had some organs dissecated and processed by conventional methods for light microscopy, showing that melanocyte accumulation occurs in most of the connective tissues in Silkie organs. Pigmentation in Silkie organs spreads with the age, increasing after the 18th day in the embryo. We investigated also the spatial-temporal expression of extracellular matrix molecules that probably act inhibiting melanocytes migration: chondroitin-sulfate and glycoconjugates that react with PNA along the migratory paths, in both chickens, at stages 18, 20 and 22 of embryonic development, at the trunk region. The results showed that chondroitin-sulfate and PNA expression is particular for each chicken, and that the strong presence of inhibitory molecules identified by PNA in neural tube dorsal area at stage 18 in Silkie suggests a role on the delay in neural crest cells dispersion, and that the constant PNA+ reaction in ventral region, in Leghorn embryos, in the trunk region, at stages 18, 20 and 22, can difficult occupation of this area by pigment cells.