Imunoexpressão tecidual de TNF-a e marcadores séricos de estresse oxidativo em cadelas obesas : possíveis fatores envolvidos na fisiopatologia da obesidade em cães

Abstract

Resumo: A obesidade é a doença nutricional e metabólica mais frequente em cães e, está associada a diversas alterações endócrinas e inflamatórias. Embora esta correlação esteja bem estabelecida em humanos, em cães os dados são escassos e existem controvérsias sobre os mecanismos para estas complicações na espécie. Assim, o presente estudo realizou duas abordagens investigativas que avaliaram, em diferentes situações, citocinas e marcadores de estresse oxidativo em cadelas obesas. A primeira abordagem objetivou comparar o tecido adiposo subcutâneo e visceral de cadelas obesas e cadelas com condição corporal normal, quanto à presença de infiltrado leucocitário, tamanho e número dos adipócitos e a correlação com a imunoexpressão do fator alfa de necrose tumoral (TNF-alfa). Nesta investigação, foram utilizados fragmentos de tecido adiposo subcutâneo e visceral das cadelas obesas e eutróficas que foram obtidos a partir de ovariossalpingohisterectomia eletiva. Quanto às avaliações histopatológicas e imunohistoquímicas observou-se correlação positiva entre o tamanho adipocitário e a expressão de TNF- alfa no tecido adiposo visceral das cadelas obesas, enquanto no tecido subcutâneo esta associação não foi observada. Do mesmo modo, o tamanho adipócitário e a presença de infiltrado leucocitário foi significativamente maior nos animais obesos em comparação aos animais com condição corporal normal, que não tiveram infiltração leucocitária detectada. Na segunda abordagem, avaliou-se cadelas obesas antes e depois de um rápido programa de perda de peso em que foram determinados marcadores da peroxidação lipídica, de resistência insulínica e marcadores renais precoces, além de cortisol e hormônio tireoidiano. As cadelas incluídas no estudo, foram submetidas a mensuração do cortisol basal e, após a estimulação com hormônio adrenocorticotrófico (ACTH), avaliou-se tiroxina livre (T4L), insulina, das substâncias que reagem com o ácido tiobarbitúrico (TBARS), concentração sérica da dimetilarginina simétrica (SDMA) e albuminúria, além de hemograma; análises bioquímicas sanguíneas, urinálise, pressão arterial sistólica, que foram realizados como triagem. Como resultado deste estudo todas as cadelas obesas apresentaram alterações no fator de peroxidação lipídica mensurado. Todas as mensurações realizadas antes do emagrecimento apresentaram valores de TBARS acima do valor de referência, com significativa redução dos valores em todos os animais após a perda de peso. Quanto as mensurações de SDMA, 80% dos animais reduziram os valores de SDMA após o programa de perda de peso. Quanto as medidas hormonais e de resistência insulínica, não foi observado diferença entre os parâmetros. Com os estudos em conjunto, é possível sugerir que o a citocina pró-inflamatória TNF-alfa do tecido adiposo visceral pode estar envolvida com as alterações metabólicas em cadelas obesas e, que a obesidade ocasiona também um desequilíbrio do sistema oxidante/antioxidante e, este quadro, após a instituição de um rápido programa de perda de peso, leva à redução na mensuração de TBARS e SDMA, podendo existir entre eles, uma relação causal provocada pela obesidade. No entanto, sugere-se a necessidade de mais estudos para comprovar uma relação do estado crônico de inflamação, provocado pela obesidade, promovendo estresse oxidativo e produção de radicais livres, o que pode ocasionar resistência insulínica e que, parâmetros como SDMA e TBARS, poderiam representar marcadores importantes e precoces de alterações fisiopatológicas da obesidade.

Abstract: Obesity is the most frequent nutritional and metabolic disease in dogs associated to endocrinal and inflammatory clinical disorders. Although this association is well described in humans, there is still a paucity of information on the canine systemic response and most reports seem contradictory. Therefore, the present study was comprised by two experiments to evaluate, in different conditions, cytokines and oxidative stress markers in obese female dogs. The first experiment compared, in visceral and subcutaneous adipose tissue, between obese and healthy weighted female dogs, the presence of leucocytic infiltrate, number and size of adipocytes, and their correlations to tumoral necrosis factor alfa (TNF-alfa) expression. Subcutaneous and visceral adipose tissue were obtained in both animal groups undergoing elective ovariohysterectomy. In obese females, larger adipocytes and higher leucocytic infiltration were observed in histopathology and immunohistochemistry, respectively. Similarly, a positive correlation between adipocyte size and TNF-alfa expression was observed in visceral adipose tissue. In the second experiment, obese female dogs were evaluated before and after an eight-week weight loss program. Serum concentrations of free thyroxine (free T4), insulin, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), symmetric dimethylarginine assay (SDMA) were measured, along with basal serum cortisol levels and serum cortisol levels after adrenocorticotrophic hormone (ACTH) stimulation. Additionally, animals were regularly screened for parameters such as hemogram, biochemical serum tests, urinalysis, and systolic blood pressure. All obese female dogs presented increased lipidic peroxidation, regardless the measured time-point. TBARS results were above reference values in the first time-point, reducing significantly after the weight loss program; while SDMA values reduced in 80% of all subjects. No differences were observed in insulinemic resistance or hormones measured in both time-points. Both studies suggest that TNF-alfa, a pro-inflammatory cytokine, in visceral adipose tissue might be related to metabolic disorders in obese female dogs, and that obesity leads to an unbalance in the oxidative/antioxidative system. The prescription of a weight loss program resulted in lower TBARS and SDMA values, indicating an association with obesity. Therefore, SDMA and TBARS, would represent important early markers of obesity physiopathological consequences. Nevertheless, more studies are necessary to demonstrate the relationship between obesity and the onset of chronic inflammation, usually associated to insulinemic resistance, not observed in the current study.