Efeito citoprotetor da fração de polissacarídeos isolados da graviola (Annona muricata l.) em modelo experimental de colite ulcerativa : uma abordagem translacional

Abstract

Resumo: A colite ulcerativa é uma doença crônica, imunomediada e caracterizada pela inflamação difusa na mucosa do cólon. com episódios agudos e intervalos de remissão. Apesar da relevância e do impacto significativo da doença na qualidade de vida dos pacientes, a terapêutica disponível é baseada no uso de anti-inflamatórios e imunossupressores, entretanto, essas estratégias terapêuticas têm altas taxas de refratariedade, associada a efeitos adversos, dando espaço à procura por novas alternativas terapêuticas. Sendo assim, o objetivo desse projeto foi investigar os efeitos anticolite e de cicatrização da fração de polissacarídeos isolados do fruto da Annona muricata (SGWa) em células epiteliais intestinais humanas e em modelo experimental de inflamação intestinal induzida quimicamente com dextrano sulfato de sódio (DSS). Os resultados obtidos demonstraram que o tratamento com a fração SGWa acelera a cicatrização in vitro em células Caco-2, e também em organoides humanos de doadores saudáveis e em pacientes com colite ulcerativa, o tratamento com SGWa também auxiliou na remontagem das proteínas de junção epitelial, acelerando o aumento da resistência elétrica epitelial e reduzindo o fluxo paracelular após internalização das junções epiteliais induzida pela redução de cálcio mediada através da proteínas quinase C (PKC), sem causar efeitos sobre a viabilidade de citotoxicidade celular. Em modelos in vivo de colite ulcerativa o tratamento com SGWa durante 7 dias reduziu a progressão da doença, indicado pela redução do índice da atividade da doença. O tratamento com SGWa também reduziu a gravidade da colite prevenindo o encurtamento do colón, preservando parte das estruturas morfológicas e a camada de muco do tecido colônico, além de mante a renovação celular em condições normais indicada pelo número de células em proliferação celular. Ademais, o tratamento com SGWa também diminuiu a infiltração de células e reduziu os níveis de secreção de citocinas inflamatórias, assim como auxiliou na redução da hipersensibilidade visceral e na manutenção do trânsito intestinal, de maneira independente da microbiota intestinal. Assim, nossos resultados sugerem que SGWa pode representar uma molécula promissora para o desenvolvimento de novos fármacos para o tratamento da colite ulcerativa.

Abstract: Ulcerative colitis is a chronic, immune-mediated disease characterized by diffuse inflammation in the colonic mucosa. with acute episodes and remission intervals. Despite the relevance and significant impact of the disease on the quality of life of patients, the available therapy is based on the use of anti-inflammatory drugs and immunosuppressants, however, these therapeutic strategies have high rates of refractoriness, associated with adverse effects, giving rise to the search for new therapeutic alternatives. Therefore, the aim was to investigate the anticolitis and healing effects of the polysaccharide fraction isolated from Annona muricata fruit (SGWa) in human intestinal epithelial cells and an experimental model of intestinal inflammation chemically induced- sodium dextran sulfate (DSS). The results showed that treatment with SGWa fraction accelerates healing in vitro in Caco-2 cells, in human organoids from healthy donors and in patients with ulcerative colitis. Treatment with SGWa also accelerates the reassembly of epithelial junction proteins, increasing epithelial electrical resistance and reducing paracellular flux after internalization of epithelial junctions induced by calcium reduction mediated through protein kinase C (PKC), without causing effects on the viability of cellular cytotoxicity. In in vivo models of ulcerative colitis treatment with SGWa for 7 days reduced disease progression, indicated by a reduction in the index of disease activity. Treatment with SGWa also reduced the severity of colitis by preventing colonic shortening, preserving part of the morphological structures and the mucus layer of the colonic tissue, in addition to maintaining cell turnover under normal conditions indicated by the number of cells in cell proliferation. Furthermore, treatment with SGWa also decreased cell infiltration and reduced levels of inflammatory cytokine secretion, as well as helped to reduce visceral hypersensitivity and maintain intestinal transit, independently of the intestinal microbiota. Thus, our results suggest that SGWa may represent a promising molecule for developing new drugs for the treatment of ulcerative colitis.