Aspectos imunocitoquímicos dos neurônios que elaboram urotensina I e urotensina II na extremidade caudal da medula espinhal de Carassius auratus (Linnaeus) : análise morfométrica após administração de metopirona e dexametasona

Abstract

Resumo: Em 36 espécies de Carassius auratus (L.) estudou-se a porção caudal da medula espinhal. Os peixes, separados em três grupos de 12 exemplares, foram tratados diariamente, durante seis dias, com injeções via peritoneal de 100 µl de diferentes drogas: solução salina 0,6% (grupo controle, grupo "A"); metopirona (grupo "B"); dexametasona (grupo "C"). A imunocitoquímica com anti-soro urotensina I de Catostomus commersoni e urotensina II de Gillichthys mirabilis, combinada com análise morfométrica computadorizada, foram utilizadas para investigar a ação do nível de corticoide sobre os neurônios imunorreativos a urotensina I (UI-ir) e a urotensina II (UII-ir) do sistema neurossecretor caudal do peixe dourado. Ao microscópio óptico, verificou-se que os neurônios secretores imunorreativos à UI agrupavam-se em duas populações: células neurossecretoras pequenas (parvocélulas) e neurônios imunorreativos de maior tamanho (magnocélulas). A análise morfométrica mostrou que, nos peixes tratados com metopirona, as áreas das superfícies celulares e nucleares das células neurossecretoras imunorreativas à UI diminuíram significativamente, em relaçao ao grupo controle. Ao contrário, nos exemplares tratados com dexametasona, os resultados apresentaram um aumento significativo das áreas celulares e nucleares. Os cortes histológicos também apresentaram imunorreatividade com UII e foram identificados três grupos celulares: células neurossecretoras pequenas, de tamanho intermediário e grandes. Em células pequenas e grandes, fortemente imunorreativas à UII, observaram-se algumas ramificações dendríticas bulbares que, atravessando as células do revestimento do canal central, entram em contato com o fluido cerebrospinal. A análise morfométrica mostrou que as áreas dos neurônios imunorreativos à UII que não contatam o fluido cerebrospinal e de seus núcleos, diminuíram significativamente após o tratamento com metopirona. Porém, as injeções de dexemetasona não determinaram alterações significativas no pericário e núcleo das células neurossecretoras de UII-ir que não contatam o fluido cerebrospinal, dos peixes do grupo "C". Somente nas células que contatam o fluido cerebrospinal, o aumento da área dos neurônios e de seus núcleos foi significativo, nos exemplares deste grupo. A imunorreação obtida em cortes adjacentes tratados com antissoros para UI e UII revelou a possibilidade da coexistência de UI-ir e UII-ir em um mesmo neurônio. Todas as células neurossecretoras apresentaram imunorreatividade para UII. A co-localização de imunorreatividade para UI e para UII foi observada em alguns pericários neurossecretores. Não foram notadas células neurossecretoras contendo imunorreatividade para UI, somente. Nos peixes submetidos a tratamento com metopirona, os níveis de cortisol do plasma sanguíneo estavam significativamente elevados, quando comparados com aqueles que receberam injeções de dexametasona; nestes, o cortisol plasmático mostrou níveis muito baixos, ou até não detectáveis. Esses resultados demonstram que os hormônios adrenocorticosteróides influenciam a atividade secretora do sistema neurossecretor caudal do peixe dourado e sugerem que os hormônios adrenocorticosteróides promovem a secreção seletiva de UI, mas não de UII. Novas investigações serão necessárias para determinar se os hormônios adrenocorticosteróides influenciam a secreção de UI diretamente por ação sobre as células Dahlgren, ou indiretamente alterando processos fisiológicos, como a osmorregulação, que é, por sua vez, regulada pela UI.

Abstract: The caudal spinal cord was dissected from 36 specimens of Carassius auratus (L.) and studied. Fish were divided into three groups, with 12 specimens per group. Each group received a 6 day treatment involving peritoneal injections of 100 y S, saline 0.6% (control group), metopirone or dexamethasone. Immunocytochemical investigations with an antiserum to Catostomus commersoni urotensin I and Gillichthys mirabilis urotensin II, combined with computor-assisted morphometric analysis were used to assess the effects of corticoid status on urotensin I-immunoreactive (Ul-ir) and urotensin II-immunoreac tive (Ull-ir) on neurons of the goldfish neurosecretory system. Light microscopy revealed that Ul-ir neurons were distributed in two populations: small (parvocellular) neurosecretory cells and large (magnocellular) secretory neurons. Morphometric analysis revealed, with fish treated with metopirone, significant decreases in both cellular and nuclear areas of the Ul-ir cells, compared with those of the control group. In contrast with the results obtained with metopirone, dexamethasone administration resulted in significant increases in both cellular and nuclear area of Ul-ir neurons. Histological sections also demonstrated immunoreactivity with the UII antiserum and indicated the presence of three different cell groups, namely small-, medium- and large-sized perikarya. Some small and large strongly UII-ir neurons gave rise to bulbous dendrite-like processes that were in contact with the cerebrospinal fluid. Morphometric analysis indicated with fish treated with metopirone, significant decreases in both cellular and nuclear areas of the cerebrospinal fluid contacting UII-ir cells. However, dexamethasone injections did not give rise to significant variations in perikarya and nuclear areas of UII-ir cells that did not contact with cerebrospinal fluid. The cerebrospinal fluid contacting cells of fish receiving dexamethasone revealed significant increases in cellular and nuclear areas. Immunocytochemistry on adjacent sections treated with UI or UII antiserum indicated the possibility of co-existence of Ul-ir and UII-ir in the same neuron. All neurosecretory cells contained UII immunoreactivity. A colocalization of UII- and UIimmunoreactivities was observed in many, but not all of the neu rosecretory perikarya. No neurosecretory cells contained Ul-immunoreactivity only. Metopirone treated goldfish showed a.significant in - crease of plasma cortisol levels, in contrast with fish treated with dexamethasone which had low or undetectable levels of cortisol. These results demonstrate that adrenocorticosterois hermones influence the secretory activity of the goldfish caudal neurosecretory system and suggest that adrenocorticosteroid hormones promote the selective secretion of UI, but not of UII. Further investigations will be required to determine if adrenocorticosteroid hormones influence the secretion of UI directly by actions on Dahlgren cells or indirectly by altering physiological processes (i.e., osmoregulation) which are in turn regulated by UI.