Análise de proliferação celular em embriões de aves com diferentes padrões de pigmentação

Abstract

Resumo: Em embriões de ave, as células da crista neural, ao nível do tronco, migram inicialmente pela via ventral, entre o somito e tubo neural, dando origem a células da glia e neurônios do sistema nervoso periférico, e posteriormente migram pela via dorsolateral, entre o ectoderma e o somito, originando melanócitos. O destino quase exclusivo dos melanócitos é o ectoderma e mesoderma da pele. A galinha Sedosa, uma mutante hiperpigmentada, apresenta melanócitos distribuídos ectopicamente O padrão de pigmentação diferenciado, observado nesta ave, poderia estar relacionado com uma maior proliferação celular estimulada por fatores ambientais e/ou a migração de melanoblastos pela via ventral além da dorsolateral. Para testar estas hipóteses foi realizada uma análise de proliferação celular em embriões da raça Sedosa comparando-a com embriões de aves com o padrão de pigmentação normal. Foram utilizados anticorpos HNK-1 para marcação de células derivadas da crista neural e anti-BrdU para marcação de células em proliferação. A análise estatística dos dados obtidos mostra que não haveria uma relação direta entre pressão populacional e distribuição de células pigmentares na galinha Sedosa, pelo menos nos estágios analisados. O número de células HNK-1 observado na via ventral, em embriões da raça Sedosa, é pequeno e não apresenta diferenças significativas com o de embriões da raça Leghom, portanto a migração por esta via parece não explicar diferenças no padrão de pigmentação. A presença de células de crista neural em estreito contato com superfície dorsal do tubo neural, em embriões no estágio 24 da raça Sedosa, sugere a possibilidade de que estas células continuem a emigrar tardiamente, podendo ser a fonte da população de melanócitos que irão se localizar ectopicamente.

Abstract: In the avian embryo, trunk neural crest cells migrate initially along a ventral pathway, between the somite and neural tube where they differentiate as glia and neurons of the peripheral nervous system. Late emigrating neural crest cells take a dorsolateral pathway, between the ectoderm and the somites, giving rise to melanocytes. The almost exclusive destination of melanocytes is the mesoderm and ectoderm of the skin. In the Silky chicken, an hyperpigmented mutant, the melanocytes are distributed ectopically. The pigment pattern observed in this chicken could be related with an increased cellular proliferation, stimulated by environmental factors and/or ventral in addition to dorsolateral migration. A comparative analysis of cellular proliferation was developed to test these hypotheses. HNK-1 antibody was used to label neural crest cells and anti-BrdU antibody for proliferating cells. The statistic analysis of the data obtained shows no relation between population pressure and melanocytes distribution in the Silky chicken, at least in the stages analyzed. Few HNK-1+ cells were observed in the ventral pathway of Silky embryos and there are no significant differences between Silky and Leghorn embryos. The presence of neural crest cells close to the neural tube in stage 24 Silky embryos suggests that the continued emigration of neural crest cells could contribute to form the population of melanocytes that will later on show ectopic localization.