Atividade anti-inflamatória de espécies de

Abstract

Resumo: Diversas plantas medicinais são conhecidas como "Malvas" no Brasil, e entre as mais importantes estão a Malva sylvestris (conhecida como "malva"), a Sida cordifolia (conhecida como "malva-branca") e o Pelargonium graveolens (conhecido como "malva-cheirosa"). Segundo o conhecimento etnobotânico e o uso tradicional popular, estas três espécies apresentam, entre outras, atividades anti-inflamatórias. Apesar do uso disseminado, pouca informação se tem a respeito dos mecanismos de ação que elas utilizam. Além disso, estas plantas muitas vezes apresentam problemas de má classificação e rotulagens inadequadas, o que pode levar a problemas de saúde caso o paciente consuma uma espécie não indicada. De todas as espécies de "malvas", a única a possuir uma monografia na Farmacopéia Brasileira e cujo consumo é recomendado pelo SUS é a M. sylvestris. Este trabalho teve como objetivos avaliar o efeito de extratos das três espécies sobre a liberação de mediadores inflamatórios por células RAW 264.7 e utilizar técnicas multivariadas para auxiliar no controle de qualidade de produtos comerciais. Para a quantificação dos mediadores PGE2, PGD2, PGF2a e TXB2, um método por CLaE-EM/EM foi desenvolvido e validado. O método analítico utilizou uma coluna cromatográfica muito comum em laboratórios (C-18, 4,6x50 mm, 1,8 ^m), fornecendo um tempo de análise de 4 minutos. A validação mostrou excelentes linearidade, exatidão, precisão, efeitos matriz e residual e estabilidade, estando todos os parâmetros dentros dos limites aceitáveis de acordo com a RDC ANVISA N. 27/2010. Considerando os extratos brutos, as taxas de redução dos mediadores inflamatórios causados pelos extratos das plantas variaram de 29% a 47%, sendo o extrato de S. cordifolia o que causou maior redução, seguido do extrato de flores de M. sylvestris, folhas de M. sylvestris, e folhas de P. graveolens. Utilizando os dados espectrais obtidos por técnica de infravermelho e de massas diretamente das folhas ou de extratos de folhas, as técnicas quimiométricas PCA e PLS-DA possibilitaram a análise exploratória e de classificação, respectivamente, de um conjunto de 60 amostras comerciais. Esta classificação foi validada e confirmada através de análises morfo-anatômicas de todas as amostras, comparando-as com padrões de referência de cada espécie. Planejamentos experimentais do tipo Centróide Simplex indicaram que a melhor combinação de solventes para extração de polifenóis de folhas de M. sylvestris foi aquela que utilizou 70% de etanol e 30% de água. Com os resultados obtidos deste planejamento, foi elaborado um modelo de superfície de resposta estatisticamente significativo e que pode ser aplicado na previsão do teor de polifenóis de acordo com a mistura de solventes utilizada na extração. Palavras-chave: Malva sylvestris, Sida cordifolia, Pelargonium graveolens, atividade anti-inflamatoria, quimiometria

Abstract: Several medicinal plants are known as "Malvas" in Brazil, and among those, the most important are Malva sylvestris (known as "malva"), Sida cordifolia (known as "malva- branca") and Pelargonium graveolens (known as "malva-cheirosa"). According to etnobotanical traditional folk knowledge, these three species have anti-inflammatory activity. Despite their widespread uses, there is limited information on their mechanisms of action. Moreover, these plants often show classification problems and inadequate labeling, which may lead to health problems if the patient consumes a non indicated species. Among all the species of "malva", the only one having a monograph in the Brazilian Pharmacopoeia and whose consumption is recommended by the SUS is the M. sylvestris.This study aimed to evaluate the effect of the three species on the release of inflammatory mediators by RAW 264.7 cells and use multivariate techniques to assist in quality control of commercial products. For the quantification of mediators PGE2, PGD2, PGF2a and TXB2, a method by HPLC-MS/MS was developed and validated. The analytical method used a common chromatography column (C-18 4.6x50 mm, 1.8 ^m), providing an analysis within 4 minutes. The validation showed excellent linearity, accuracy, precision, matrix and residual effects and stability, with all parameters presenting values in accordance to the limits imposed by AnViSA RDC N°. 27/2010. Considering the crude extracts, reduced rates of inflammatory mediators caused by the plant extracts ranged from 29% to 47%.The extract of S. cordifolia caused greater reduction, followed by the extract of M. sylvestris flowers, M. sylvestris leaves and P. graveolens leaves. Using the spectral data obtained by infrared and mass spectrometry techniques, which were obtained directly from the leaves or leaf extracts, the chemometric techniques (PLS-DA) allowed the classification and grouping of a set of 60 commercial samples according to species to which they belonged. This classification was validated and confirmed by morphological and anatomical analyzes of all samples, comparing them with reference patterns of each species. The Simplex Centroid design for experiments with mixtures indicated that the best combination of solvents for extraction of polyphenols from M. sylvestris leaves was the one using 70% ethanol and 30% water. With the present results it was designed a statistically significant response surface model that can be applied in predicting the content of polyphenols in accordance with the mixture of solvents used in the extraction. Key-words: Malva sylvestris, Sida cordifolia, Pelargonium graveolens, antiinflammatory activity, chemometrics