Avaliação morfoanatômica, fitoquímica e biológica de Baccharis glaziovil Baker (Asteraceae)

Abstract

Resumo: Baccharis compreende 178 espécies registrados no Brasil, e 87 destas no Estado do Paraná, que é um dos principais centros de diversidade de espécies deste gênero. Mais de 150 compostos foram isolados e identificados, sendo esses pertencentes as classes dos diterpenos, triterpenos, flavonoides, cumarinas e óleos essenciais. Algumas espécies deste gênero possuem cladódios e são popularmente conhecidas como "carquejas" e utilizadas como anti-inflamatórios, estomáquicos e diuréticos. O presente trabalho objetivou estudar a morfologia externa, a anatomia de partes vegetativas aéreas, a composição química e atividades biológicas de Baccharis glaziovii. O material vegetal foi analisado por métodos habituais de microscopia fotônica e de microscopia eletrônica de varredura. Dentre as espécies que apresentam caule trialado e folha destacou-se as seguintes diferenças morfoanatômicas em B.glaziovii, é verificada a presença de folhas e de tricomas simples, tectores e flageliformes; na região perimedular do eixo caulinar encontra-se cristais de oxalato de cálcio na forma de ráfides, estiloides e piramidais. Para a extração dos óleos essenciais de B. glaziovii de cladódios femininos (BgCF) e masculinos (BgCM) e de flores dos espécimes femininos (BgFF) e masculinos (BgFM) foi utilizada a destilação pou arraste de vapor, foram analisados por CG-DIC e CG-EM e apresentou (E)-cariofileno, ß-pineno, biciclogermacreno, a-humuleno, germacreno D, espatulenol e limoneno como principais componentes dos óleos voláteis. Os extratos etanólicos de caules e folhas de B. glaziovii feminino (BgF) e de B. glaziovii masculino (BgM) foram submetidos à análise fitoquímica. O extrato BgF foi particionado obtendo-se as frações hexano (BgFH), diclorometano (BgFD), acetato de etila (BgFAc) e aquoso residual (BgFAq), estes foram purificadas por técnicas cromatográficas e analisadas por RMN uni e bidimensionais. Após fracionamento foram identificadas oito substâncias, três cumarinas (isofraxosídeo, magnoliosídeo e uncalina), todas inéditas em Baccharis, flavonoides (apigenina, naringenina e 5,7,3’,5’- tetraidroxiflavona) entre os quais, um deles foi identificado pela primeira vez no gênero e um ácido fenólico (3,5-O-dicafeoilquínico). Também foram realizados ensaios biológicos tais como atividade antimicrobiana com BgCF, BgCM, BgFF, BgFM, BgF e BgM. Todos estes extratos apresentaram atividade promissora frente as bactérias e os fungos. Dando destaque para o extrato BgFF que apresentou ação sobre todos os microrganismos testados. A atividade anti-inflamatória in vitro com BgF e BgM mostrou atividade satisfatória quando comparados ao controle positivo diclofenaco de sódio (400 µg.mL^-1). O extrato BgFF apresentou uma atividade expressiva contra formas promastigotas de Leishmania amazonensis in vitro, com uma CI50 de 6,42 µg.mL^-1. A fração BgFAc apresentou atividade antiprofiferativa sobre as formas tripomastigotas (CE50 44,97 µg.mL^-1) de Trypanosoma cruzi in vitro, e no ensaio de citotoxicidade em células VERO, apresentou uma CC50 220,59 µg.mL^-1. O extrato BgM apresentou atividade antiproliferativa sobre as formas amastigotas (CE50 86,43 µg.mL^-1).

Abstract: Baccharis comprises 178 species recorded in Brazil, and 87 of these in the state of Paraná, which is one of the main species diversity centers of this kind. Over 150 compounds were isolated and identified, and those belonging to the class of diterpenes, triterpenes, flavonoids, coumarins and essential oils. Some species of this genus have cladodes and are popularly known as "coots" and used as anti-inflammatory, estomáquicos and diuretics. This study aimed to study the external morphology, anatomy of vegetative aerial parts, the chemical composition and biological activity of Baccharis glaziovii. The plant material was analyzed by standard methods of light microscopy and scanning electron microscopy. Among the species with winged stem and leaf stood out the following morphoanatomic differences in B. glaziovii is verified the presence of three winged stem, leaves and flageliform and simple non-glandular trichome; perimedullary in the region of the shank axis is calcium oxalate crystals as raphides, styloid and pyramids in the perimedullary region. For the extraction of essential oils from B. glaziovii female cladodes (BgCF) and male (BgCM) and flowers of female specimens (BgFF) and male (BgFM) the distillation pou drag steam was used, were analyzed by GC-FID and GC-MS showed and (E)-caryophyllene, ß-pinene, bicyclogermacrene, a-humulene, sesquiterpene, spathulenol and limonene as main components of the essential oils. The ethanol extracts of stems and leaves of B. glaziovii female (BgF) and B. glaziovii male (BgM) underwent phytochemical analysis. The extract was partitioned BgF obtaining the hexane fractions (BgFH), dichloromethane (BgFD), ethyl acetate (BgFAc) and the residual aqueous (BgFAq), which were purified by chromatographic techniques and analyzed by NMR and one dimensional. After fractionation eight substances were identified three coumarins (isofraxoside, magnolioside and umkalin), all unpublished at Baccharis, flavonoids (apigenin, naringin and 5,7,3',5'-tetrahydroxyflavone) among which one was first identified time in the genre and a phenolic acid (3,5-O-dicaffeoylquinic). Also biological assays were performed such as antimicrobial activity with BgCF, BgCM, BgFF, BgFM, BgF and BgM. All these extracts showed promising activity against bacteria and fungi. Giving emphasis on the BgFF extract presented action on all the microorganisms. The anti-inflammatory activity in vitro BgF and BgM showed satisfactory activity when compared to diclofenac sodium positive control (400 µg.mL^-1). The BgFF extract showed a significant activity against promastigotes of Leishmania amazonensis in vitro with an IC50 6.42 µg.mL^-1. The fraction was BgFAc antiprofiferativa activity on trypomastigotes (EC50 44.97 µg.mL^-1) of Trypanosoma cruzi in vitro, and the cytotoxicity assay on VERO cells, showed a CC50 220.59 µg.mL^-1. The BgM extract showed antiproliferative activity on the amastigotes (EC50 86.43 µg.mL^-1).