Interferência dos sucos de uva integral e reconstituído na estrutura das proteínas salivares e da película dental adquirida do esmalte

Abstract

Resumo: A saliva é um fluido da cavidade oral composta por íons e macromoléculas como proteínas e glicoproteínas, entre outras. A adsorção das proteínas da saliva sobre a superfície eletronegativa da hidroxiapatita conduz a formação da película adquirida que protege a estrutura dental de componentes ácidos da dieta. Este trabalho visa avaliar o efeito do suco de uva na estrutura das proteínas salivares e composição da película dental adquirida do esmalte. A saliva estimulada foi coletada e misturada in vitro com amostras de suco de uva integral e suco de uva reconstituído em diferentes proporções. O pH e a acidez titulável de cada condição foi medido e alterações no perfil do espectro sincronizado de fluorescência e o espectro de emissão (excitação a 282 nm) foram monitorados em de 300 a 800 nm. Alterações na composição de proteínas salivares nas diferentes condições também foram analisadas em eletroforese de SDS-PAGE. A película dental adquirida do esmalte foi formada in vitro sobre blocos de esmalte bovino e a composição desta película analisada por ATR-FTIR. Os resultados mostram quanto maior a proporção suco/saliva menor o pH das amostra. Um deslocamento do espectro sincronizado das proteínas salivares para comprimentos de ondas elevados ocorre proporcionalmente a quantidade de suco adicionada as amostras, concomitante as alterações do perfil proteico das amostras de suco:saliva. Os espectros de emissão (excitação a 282 nm) mostram que com a adição de pequenas quantidades de sucos o pico em 280 nm desaparece. As análises de ATR das películas dentais adquiridas do esmalte formadas em presença das misturas de suco: saliva mostram que componentes dos sucos, provavelmente os polifenóis, adsorvem a superfície do esmalte. Os resultados sugerem que a adição de sucos gera alterações conformacionais das proteínas que levam a precipitação e alteração da composição proteica da saliva e os polifenóis dos sucos parecem adsorver a hidroxiapatita.

Abstract: Saliva is a fluid from oral cavity composed of ions and macromolecules such as proteins and glycoproteins, and others. Adsorption of salivary proteins on the electronegative surface of hydroxyapatite leads to the formation of this pellicle that protects teeth from diet components. This study aims to assess the effect of grape juice on salivary proteins structure and in the composition of the enamel adquired pellicle. Stimulated saliva was collected and mixed with in vitro samples of whole grape juice and reconstituted grape juice in different proportions. Titratable acidity and pH of each condition was measured and changes in fluorescence synchronized spectrum and the emission spectrum (excitation at 282 nm) were monitored from 300 to 800 nm. Changes in the composition of salivary proteins in the different conditions were analyzed by SDS-PAGE electrophoresis. The enamel adquired pellicle was formed in vitro onto bovine enamel blocks and the composition of this pellicle was analyzed by ATR-FTIR spectra. Results showed that at higher juice:saliva proportion, lower is the pH of the sample. Besides, a shift of the spectrum of synchronized salivary proteins to high wave lengths proportionally the amount of juice added, along with changes in protein profile of juice:saliva samples occurs. The emission spectrum (excitation at 282 nm) showed that small amounts of juice made the 280 nm peak disappear. The ATR measures of the enamel adquired pellicle formed in the presence of juice:saliva mixtures, showed that juice components, probably the polyphenol adsorbed to the enamel. Results suggested that the juices leads to conformational changes of salivary proteins that cause protein precipitation, changing protein salivary composition and the juice polyphenols seems to adsorb onto hydroxyapatite.