Modelo experimental de nutrição parenteral em ratos

Abstract

Resumo: Com o objetivo de desenvolver, viabilizar e executar modelo experimental de nutrição parenteral, foram utilizados 18 ratos Wistar, machos, adultos, pesando de 300 a ^60 gramas divididos em dois grupos. Todos os ratos foram pesados no início do estudo e acondicionados individualmente em gaiolas metabólicas, em ambiente de temperatura estável (22+22C), com ciclo dia-noite de 12 horas, tendo água "ad libitum". Foi utilizada anestesia inalatória com éter em todos os procedimentos cirúrgicos. Os ratos foram divididos em grupo controle nutrido por ração e grupo parenteral nutrido exclusivamente por solução de nutrição parenteral. Excluiu-se um rato de cada grupo. No grupo controle por dificuldade técnica na coleta de sangue e no grupo parenteral por óbito IS horas após implante do catéter. No grupo controle (n=8) a Veia jugular externa direita foi dissecada e ligada, e no grupo parenteral (n=8) introduziu-se catéter de silicone na veia jugular externa direita, o qual foi duplamente fixado à veia, exteriorizado por túnel subcutâneo, na região cervical dorsal, protegido por espiral metálica fixada ao rato através de disco metálico, e conectado a dispositivo tipo "swive1-joint" que permitiu a livre movimentação dos animais. Essa peça .foi fixada a suporte rnóvel no sentido vertical em haste própria, equilibrado por sistema de roldana e contrapeso, para permitir movimentação vertical é horizontal do rato. No grupo controle foi fornecida ração para ratos "ad libitum" com 3 Kcal/g. No grupo parenteral foi infundida solução de nutrição parenteral (AA 20'/., Glicose 50'/., lipídios 30'/.) fornecendo 1 Kcal/ml. A infusão de solução de nutrição parenteral foi contínua, realizada por bomba eletrônica do tipo peristáltica à velocidade de 3ml/h. Todos os dias anotaram-se dados de ingesta calórica e de água bem como de excreta (urina e fezes), Após 7 dias todos os ratos foram novamente pesados e após, anestesiados para realizar laparotomia e sacrificados por exsanguinação através de punção da veia cava caudal e coleta de sangue para exames laboratoriais (glicemia, albumina e hemograma). Retiraram-se o baço, fígado, coração, linfonodos mesentéricos e intestino delgado para pesagem. A veia cava cranial direita foi inspecionada sob visão direta para a presença de trombos, espessamento ou lesão vascular. A ingesta calórica média do grupo controle foi de 73,72+19,68 Kcal/dia e a do grupo parenteral foi de 70,23+4-, 33 Kcal/dia. Em duas ocasiões, em que a infusão foi interrompida houve falha na bateria da bomba quando da falta de energia elétrica. Não houve vazamento ao longo de qualquer das conexões da via.de infusão. A ingesta calórica média foi semelhante nos dois grupos, porém variou significativamente conforme o dia do experimento. 0 grupo controle foi inferior ao grupo parenteral nos 2 primeiros dias do experimento, superando-o após o 32 dia, 0 volume médio diário de água ingerido pelo grupo controle foi superior ao do grupo parenteral, porém o>volume médio diário de urina foi superior no grupo parenteral. A partir do 22 dia, o peso médio diário de excreção fecal foi maior no grupo controle, nutrido por via oral. Não houve variação importante do peso corporal inicial e final em cada grupo e entre os grupos. 0 peso do baço foi superior no grupo parenteral em relação ao grupo controle, enquanto o peso do intestino delgado foi superior no grupo controle. Os pesos dos outros órgãos estudados não diferiram significativamente entre os grupos. A glicemia e albumina sérica não foram diferentes entre os grupos. G grupo parenteral apresentou valores de hemoglobina, hematócrito e hemácias inferiores ao grupo controle. As contagens de leucócitos e linfócitos no grupo parenteral foram significativamente superiores às do grupo controle. Os achados do estudo indicam que a técnica empregada é efetiva e segura em manter nutrição parenteral durante 7 dias em ratos com manutenção dos índices morfométricos exceto peso de baço e intestino delgado, manutenção da glicemia e albumina sérica. Entretanto, os ratos em nutrição parenteral apresentaram aumento signficativo das contagens de leucócitos e linfócitos, bem como redução dos valores de hemoglobina, hematócrito e hemácias quando comparados com o grupo controle.

Abstract: To develop an experimental model of parenteral nutrition in rats, 18 male adult wistar rats weighting 300-<:+60g were used. Body weight was determined prior to the begining of the estudy. Rats were placed individually in metabolic cages in room temperature of 22+2 C, light/dark cycle of 12 hours and had free access to water throughout the experiment. All surgical procedures were performed under ether anesthesia. Rats were divided into two groups, control rats (n=9) which received rat chow ad libitum and parenteral rats <n=9) which were fed parenterally. One rat was excluded in each group. In control rats due to technical problems in blood sampling during sacrifice an in the parenteral . group for death of a rat 12 hours after catheter insertion. In control rats (n=8) the external jugular vein was dissected out and ligated, while in parenteral rats <n=8) silastic catheter was inserted in the external jugular vein, exteriorized at the nape of the neck, protected by a spring device and sutured to the rat using a metalic device. The catheter was connected to a swivel device to allow free mobilization of the rat. The swivel was fixed in a vertical system to ooallow vertical and horizontal mobilization of the rat. Control rats received rat chow ad libitum yielding 3 Kcal/g. Parenteral rats received parenteral nutrition consisting of aminoacids 20'/., glicose 50'/. and lipids 30'/. yielding 1 kcal/ml.For the continuous infusion of parenteral solution an eletronic peristaltic pump was used at a rate of 3 ml/h. Daily caloric and water intake and urine and feces output was determined for each rat. After 7 days, body weight was determined and a laparotomy performed. Rats was killed by exsanguination by puncture of the caudal vena cava, and blood was analysed for glucose and serum albumin levels and for hemogram. Then the liver, spleen, heart, mesenteric lymphnodes and small intestine were removed and weighted. The cranial vena cava was inspected for the presence of thrombus or macroscopic alterations of the venous wall. Mean daily food' intake in controls rats was 73,72+19,68 Kcal/day, while in the parenteral group it was 70,23+4,33 Kcal/day. In two instances the parenteral infusion was temporally interrupted due to battery failure during an episode of blackout. Mean daily caloric intake was similar in both- groups, but varied significantly according to the day of the experiment. In the control rats it was lower then the parenteral group during the first two days of the experiment, but was higher thereafter. Mean water intake was higher in the control group throughout the experiment, urine excretion was higher in the parenteral group. Daily fecal excretion was higher in the control group from the second day of the experiment. No significant change in body weight occured in any group. Spleen weight was higher in the parenteral group tompared to control, while the weight of the small bowel was higher in the control rats. The weight of the remained organs were similar in both groups. Hemoglobin, hematocrit and erythrocytes were lower in the parenteral group as compared to control. In contrast, leukocytes and lymphocytes number were higher in the parenteral group. These results indicate that the technic employed is safe and effective in maintaining rats exclusively in parenteral nutrition for periods of at least 7 days with maintenance of blood glucose and serum albumin levels and some morphometric indices, except for the spleen and small bowel weight. However, rats receiving parenteral nutrition had increased number of leukocytes and lymphocytes and reduced hemoglobin, hematocrit and erythrocytes than controls.