Açao do medicamento Canova na cicatrizaçao do dorso de camundongo após incisao e sutura : avaliaçao macro e microscópica : Thales 2003013121

Abstract

O medicamento homeopático Canova é um imunomodulador, que não apresenta toxicidade ou efeitos colaterais. Seu uso está indicado em diversas patologias nas quais o sistema imune se encontra comprometido. Estudos recentes mostraram que este medicamento alterou a produção de fibrose ao redor da massa tumoral, resultando em alterações na morfologia e "malignidade" do tumor. Esse estudo foi projetado para avaliar o efeito do Canova sobre a funcionalidade das células do tecido conjuntivo e possíveis alterações na matriz extracelular de camundongos. Para tal, 120 camundongos albinos suíços, machos, da espécie Mus musculus, linhagem Rockefeller, com idade de 2 meses, pesando entre 50 e 70 g, foram obtidos junto ao Biotério do Instituto de Tecnologia do Paraná. Os animais receberam ração padrão (Purina‚) e água ad libidum, e foram divididos em dois grupos (I e II) de 60 camundongos cada. Todos os camundongos receberam incisão no dorso com 1,5 cm de comprimento e 1,5 mm de profundidade, sendo que os do grupo I receberam sutura com fio não reabsorvível e os camundongos do grupo II sutura com fio reabsorvível. Cada grupo foi dividido em dois subgrupos, um composto por 30 camundongos controles do tratamento, que não receberam medicação, e o outro por trinta camundongos que receberam 3 ul/g de Canova intraperitoneal. A cirurgia dos camundongos consistiu dos seguintes passos: anestesia com éter sulfúrico dentro da capela; incisão com bisturi; descolamento do tecido epitelial ao redor da incisão e sutura da mesma com dois pontos simples. Antes e após a cirurgia, os camundongos tratados receberam 3 µl/g de Canova intraperitoneal. Cada grupo foi sacrificado nos tempos de 8h, 24h e 5 dias, com prévia análise macroscópica da cicatriz e amostras de tecido cutâneo e subcutâneo forma obtidas e processadas histologicamente para avaliação da cicatrização e das possíveis alterações na resposta inflamatória através da microscopia de luz. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística para se obter uma posição quanto à eficiência do medicamento na cicatrização de uma incisão no tecido epitelial e conjuntivo de camundongos. Considerando que os dados apresentavam uma variação descontínua (notas ou sim / não), optou-se pelo uso de uma estatística não-paramétrica. Para tanto, foram utilizados o teste de Kolmogorov-Smirnov, quando as amostras eram de mesmo tamanho e a variável também era quantificada através de notas (0 a 3); teste de x² para variáveis também quantificadas por nota, porém com amostras de diferentes tamanhos; e, finalmente, o teste exato de Fisher para as tabelas 2x2 e variável quantificada em sim/não. Observou-se que na comparação realizada entre camundongos controles e tratados com Canova do grupo I – fio de sutura não-reabsorvível, cinco dias após incisão e sutura, houve variação significativa para fibroblastos e neovascularização, onde estavam em número reduzido nos tratados. Na mesma comparação dentro do grupo II – fio de sutura reabsorvível, cinco dias após a cirurgia, a quantidade de linfócitos, de neovascularização e de fibroblastos estava reduzida nos camundongos tratados com Canova. Ao se comparar, no quinto dia, a população de linfócitos dos camundongos tratados, constatou-se que estava menor nos camundongos do grupo II. A quantidade de coágulo foi maior nos camundongos controles do grupo I, após 24h, se comparados com os controles do grupo II. É possível concluir que o medicamento Canova reduziu a inflamação ao redor da incisão e diminuiu a chance de formação de quelóide e com relação ao tipo de fio, a inflamação foi menor no grupo II. Palavras- chave: cicatrização, tecido conjuntivo, matriz extracelular, macrófago, óxido nítrico, Canova

The homeopathic medication Canova is an immunomodulator that does not induce toxicity or collateral effects. It is indicated in multiple pathologies in which the immune system is impaired. Recent studies have shown that this medication has changed the fibrosis production around tumoral mass, resulting in changes to the tumor morphology and "malignancy". This study was designed to evaluate the effect of the Canova medication on the connective tissue cell functionality and the potential changes to the extracellular matrix of mice. For this purpose, 120 swiss albino, male mice, 2 months old, Mus musculus, Rockefeller origin, weighting 50 to 70 g, (provided by the Paraná Technology Institute Vivarium). The animals were fed with standard food and water ad libitum, were separated in two groups (I and II) with 60 animals each. All animals were incised in dorsum with 1,5cm length and 1.5 mm deep, group I has received non-reabsorbable suture line and group II has received reabsorbable suture line. Each group was subdivided into two subgroups, one with 30 nonmedicated control mice, and other with 30 mice that received 3 µl/g of Canova medication intraperitoneally. Mice operation consisted of the following steps: sulphuric ether anesthesia inside the fumehood; scalpel incision; epithelial divulsion around the incision and two simple suture to close the wound. Before and after the surgery, the treated mice received 3 µl/g of intraperitoneal Canova. Each group was sacrificed (in 8hour, 24hour and 5 days) for future gathering and analysis of cutaneous and subcutaneous tissue. The samples were processed for wound healing evaluation and possible alterations in the inflammatory response through light microscopy. The data gathered was submitted to statistic analysis in order to get the result of the medication efficiency in healing mice epithelial and connective incisions. As data presented an intermittent variation (grades or yes / no), the use of a non-parametric analysis was chosen. For that purpose the following tests were used: Kolmogorov-Smirnov, where the samples were of similar sizes and the variant was quantified through grades (0 to 3); x² test for variants also quantified through grades, but with different size samples; and, finally, Fisher accuracy test for 2x2 tables and yes/no quantified variant. We observed that in the comparison among control mice and Canova treated mice of group I – non-absorbable suture line, five days after incision and suture, there was a significant difference in number of fibroblasts and neovascularization, which were reduced among the treated group. From the comparison of control and treated mice from group II – absorbable suture, five days after surgery, we observed that the amount of lymphocytes, neovascularization and fibroblasts was reduced in the Canova treated mice. The fifth day analysis of the lymphocyte population in the treated mice showed that it was smaller in the group II rats. The amount of coagulum was higher in group I control mice, after 24 hours, when compared to group II controls. After this work, we concluded that Canova medication reduced inflammation around the incision and reduced the possibility of keloyds; as for the suture material type, the inflammation observed was smaller in group II.