Efeito do Knockdown de QSOX1 (Quiescina/sulfidril Oxidase) na reestenose pós-lesão por catéter balão em carótidas de rato

Abstract

Resumo: A reestenose é um processo que atinge cerca de 30% das pessoas submetidas à angioplastia. Durante a reestenose há migração e proliferação de células musculares lisas (VSMC) em direção ao lúmen do vaso, provocando a formação de uma camada neo-íntima rica em VSMC e matriz extracelular (MEC). A QSOX é uma proteína sulfidril oxidase que catalisa a oxidação de ditióis a dissulfetos e, por isso, pode ser um alvo interessante, já que a MEC é rica em tióis. Nossos estudos mostraram a expressão de QSOX durante o processo de reestenose em ratos lesados com cateter balão (1, 7, 14 e 21 dias). Imediatamente após a lesão com cateter balão, os ratos foram submetidos à transfecção de RNAi para QSOX com gel plurônico. Após 14 dias, observamos uma clara mudança na morfologia das células tratadas com RNAi para QSOX em comparação ao controle negativo "scrambled", apesar de não haver diferença na relação íntima/média. Foi possível observar dois tipos distintos de células nos animais tratados com RNAi para QSOX, fato que não foi visto nos animais sem tratamento, 14 dias após a lesão. Sugerimos que a QSOX possa estar envolvida no processo de diferenciação celular, já que as células observadas eram morfologicamente semelhantes às células encontradas após três meses de lesão. Ensaios in vitro mostraram que a transfecção de RNAi para QSOX levou a uma diminuição na migração (~30%, 48 horas) e viabilidade celular (~10%) em cultura de VSMC. Estes resultados sugerem que a QSOX possa ter um papel na diferenciação celular in vivo, mas in vitro a supressão parcial promove a inibição da proliferação e migração celulares.

Abstract: Restenosis is a process that affects around 30% of people undergoing angioplasty. During restenosis occurs migration and proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMC) into the lumen of the vessel, leading to the formation of a neo-intimal layer rich in VSMC and extracellular matrix (ECM). QSOX is a sulfhydryl oxidase protein that catalyzes the oxidation of thiols to disulfides and, because of that, it can be an attractive target, given that ECM is rich in thiols. Our studies showed the expression of QSOX during the process of restenosis in rats injured with a balloon catheter (1, 7, 14 and 21 days). Immediately after the catheter balloon injury, rats were subjected to QSOX RNAi transfection with pluronic gel. After 14 days we observed a clear change in cell morphology of cells treated with QSOX RNAi compared to the negative control scrambled, although no difference in the relation between intima/media was detected. It was possible to observe two distinct types of cells in animals’ transfected with QSOX RNAi, a fact which was not observed in animals not submitted to this treatment, at 14 days of injury. We suggest that QSOX may be involved during cell differentiation process, since the analyzed cells were morphologically similar to cells found after three months of injury. In vitro assays showed that transfection of RNAi to QSOX led to a decrease in migration (~ 30%, 48 hours) and cell viability (~ 10%) in cultured VSMC. These results suggest that QSOX1 may play a role at in vivo differentiation, but, in vitro, its partial suppression promotes inhibition of VSMC proliferation and migration.