Características de virulência e susceptibilidade a antimicrobianos e estirpes de Escherichia Coli Uropatogênica

Abstract

Resumo: Escherichia coli uropatogênica (UPEC) é o principal patógeno urinário. Neste trabalho a presença de 8 fatores de virulência associados com UPEC foi pesquisada em 204 isolados clínicos de E. coli recuperados de cultura de urina em contagem ? 105, o que representa bacteriúria significativa de infecção urinária. As bactérias foram classificadas em dois grupos de acordo com o número de leucócitos presentes nas amostras de urina das quais foram isoladas: grupo 1 (< 8 leucócitos/campo) com 104 estirpes, e grupo 2 (? 8 leucócitos/campo) com 100 estirpes. Dois sistemas de PCR multiplex foram utilizados para verificar a presença dos genes que codificam as adesinas P (pap), S (sfa) e adesina afimbrial I (afaI); o sideróforo aerobactina (aer); as toxinas alfa-hemolisina (hly) e fator necrotizante citotóxico tipo 1 (cnf1); PAI, marcador para a ilha de virulência identificada na estirpe nefritogênica CFT072; e traT associado com a resistência ao soro. A presença de CVD432, um marcador de E. coli enteroagregativa (EAEC), também foi pesquisada entre as E. coli isoladas de urina por PCR. O perfil de susceptibilidade das estirpes de E. coli foi determinada pelo método de disco-difusão. Noventa por cento das UPEC apresentaram ao menos um dos genes de virulência pesquisados, sendo a prevalência traT (76%), aer (41%), PAI (32%), sfa (26%), pap (25%), cnf1 (18%), afa (6%) e hly (5%). Não houve diferença significativa na distribuição desses genes entre os grupos 1 e 2. Maior grau de virulência foi detectado nas UPEC do grupo 2, enquanto estirpes com apenas 1 gene de virulência predominam no grupo 1. O gene CVD432 não foi detectado em nenhuma das UPEC analisadas, entretanto no ensaio de adesão em células HeLa 11 estirpes apresentaram o padrão de aderência agregativa característica daquele patógeno intestinal. Nas bactérias isoladas de outros sítios anatômicos, 79,2% apresentaram pelo menos um dos fatores de virulência urinários, sendo traT e aer os mais frequentes, presentes em 70,1 % e 33,8% das estirpes, respectivamente. Cento e vinte estirpes de UPEC (58,8%) apresentaram resistência a pelo menos um dos antimicrobianos testados, sendo ampicilina, sulfametoxazol-trimetoprim e ácido nalidíxico as drogas às quais estas apresentaram maior índice de resistência.

Abstract: Uropathogenic Escherichia coli (UPEC) is the major pathogen urinary. In this work the presence of eight virulence factors associated with UPEC was investigated in 204 clinical isolates of Escherichia coli recovered from urine cultures in counts ? 105, which represents significant bacteriuria associated with urinary tract infection. The bacteria were classified into two groups according to the number of leukocytes present in urine samples from which they were isolated: group 1 (<8 WBC) with 104 strains, and group 2 (? 8 WBC) with 100 strains. Two multiplex PCR systems were used to verify the presence of genes encoding adhesins P (pap), S (sfa) and afimbrial adhesin I (afa), the siderophore aerobactin (aer); toxins alpha-hemolysin (hly) and cytotoxic necrotizing factor type 1 (cnf1); PAI marker for virulence island identified in strain CFT072, and traT associated with serum resistance. The presence of CVD432, a marker of enteroaggregative E. coli (EAEC) was also investigated among E. coli isolated from urine, by PCR. The susceptibility profile of strains of E. coli was determined by disk diffusion method. Ninety percent of UPEC showed at least one of the virulence genes studied, the prevalence being traT (76%), aer (41%), PAI (32%), sfa (26%), pap (25%), cnf1 ( 18%), afa (6%) and hly (5%). There was no significant difference in the distribution of virulence genes between groups 1 and 2. Higher degree of virulence was detected in UPEC group 2, where strains carrying 4 or more virulence genes predominate; while strains with only one virulence gene predominate in group 1. The CVD432 gene was not detected in any of the UPEC analyzed, however in the adhesion test in HeLa cells 11 strains showed the aggregative adherence pattern characteristic of those intestinal pathogen. In bacteria isolated from other anatomical sites, 79.2% had at least one of the virulence factors tested, aer and traT being the most frequent, present in 70.1% and 33.8% of the strains, respectively. One hundred and twenty UPEC strains (58,8%) were resistant to at least one of the antimicrobials tested; ampicillin, trimethoprim-sulfamethoxazole and nalidixic acid were the drugs to which they presented higher rates of resistance.