Estudo fitoquímico, avaliação das atividades biológicas, estudo farmacológico e propriedades antioxidantes do óleo essencial, extratos, frações e compostos provenientes da espécie Ocotea paranaensis (Lauraceae)

Abstract

Resumo: A espécie Ocotea paranaensis pertencente à família Lauraceae, ocorre em FlorestaAtlântica, no leste do Estado do Paraná, em áreas montanhosas da Serra do Mar. Oobjetivo deste trabalho foi realizar o estudo morfoanatômico, a caracterizaçãofitoquímica, o potencial antioxidante, biológico e farmacológico de amostrasprovenientes da espécie. Para a morfoanatomia foram evidenciadas característicascondizentes com o descrito para o gênero que auxiliarão na identificação botânicada espécie. A partir do material vegetal foi obtido o extrato bruto, frações (hexano,clorofórmio, acetato de etila e remanescente) e óleo essencial de galhos e folhas.Quando avaliada a composição química dos óleos essenciais, ficou evidente aprevalência de sesquiterpenos. Para o óleo do galho as substâncias majoritáriasforam o Z-nerolidol, germacreno D e o a-bulneseno, para as folhas foram o elixeno,kaureno, ?-cadineno e o espatulenol. As subtâncias isoladas foram caracterizadaspor análise de ressonância magnética nuclear e difratometria de raios X demonocristal. Foram identificados os flavonoides epicatequina, quercetina,kaempferol, hiperina e os alcaloides N-metil secoboldina e N-metil-secoglaucina,todos inéditos para a espécie. Entre as amostras testadas as frações acetato de etilade galhos e folhas são as que apresentam maior teor de fenólicos, demonstrandopotencial antioxidante frente ao DPPH•, na avaliação da redução do complexofosfomolibdênio e na avaliação da redução do ferro. Nenhuma das amostrastestadas apresentou-se altamente tóxica frente à Artemia salina. As frações hexanoe óleo essencial de folhas e galhos apresentaram potencial hemolítico. O melhorresultado antimicrobiano foi observado para o extrato bruto da folha emStaphylococcus aureus (CIM 15,6 µg/mL). O efeito bactericida pode ser evidenciadopara fração clorofórmio dos galhos (Staphylococcus aureus) e para N-metilsecoglaucina (Escherichia coli e Candida albicans). N-metil secoglaucina e N-metilsecoboldina apresentaram citotoxicidade frente às duas linhagens de célulastestadas (HeLa e H460). Efeito alelopático foi evidenciado tanto para o óleo comopara o extrato bruto e frações de galhos e folhas, frente a Lactuca sativa e Alliumcepa. No estudo farmacológico, o extrato bruto dos galhos apresentou potencialantinociceptivo na segunda fase do teste de nocicepção induzida por formalina, semostrou inativo para os testes da placa quente, Tail flick e avaliação da atividadelocomotora pelo teste de campo aberto. Na avaliação do edema de pata induzido porcarragenina observou-se resultados significativos 3 horas após a injeção decarragenina, reduzindo também a atividade enzimática da mieloperoxidase. Osresultados deste estudo demonstram a utilidade desta planta como uma fontepotencial de agentes antioxidantes, antimicrobianos, aleloquímicos e antiinflamatórios.

Abstract: The Ocotea paranaensis species belonging to the Lauraceae family, occurs in theAtlantic Forest, in the east of the Paraná State, in mountainous areas of the searidge. The aim of this work was to carry out a morphoanatomical study, aphytochemical characterization, the antioxidant, biological and pharmacologicalpotential of the species. For the morphoanatomy, characteristics consistent withthose described for the genus were evidenced, which will help in the botanicalidentification of the species. The crude extract, fractions (hexane, chloroform, ethylacetate and remainder) and essential oil from branches and leaves were obtainedfrom the plant material. When evaluating the chemical composition of essential oils,the prevalence of sesquiterpenes was evident. For branch oil, the main substanceswere Z-nerolidol, germacrene D and a-bulnesene, for leaves they were elixene,Kaureno, ?-cadinene and spathulenol. The isolated substances were characterizedby by nuclear magnetic resonance analysis and single crystal X-ray diffractometry.The flavonoids epicatechin, quercetin, kaempferol, hyperin and the alkaloids Nmethylsecoboldine and N-methyl-secoglaucin, all new for the species, wereidentified. Among the samples tested the ethyl acetate fractions from twigs andleaves, they have the highest phenolic content, demonstrating antioxidant potentialagainst DPPH•, in the evaluation of the reduction of the phosphomolybdenumcomplex and in the evaluation of ferric reduction. No samples tested were highly toxicagainst Artemia salina. The hexane and essential oil fractions from leaves andbranches showed hemolytic potential. The best antimicrobial result was observed forthe crude leaf extract against Staphylococcus aureus (MIC 15.6 µg/mL). Thebactericidal effect can be evidenced for the chloroform fraction of the branches(Staphylococcus aureus) and for N-methyl secoglaucin (Escherichia coli and Candidaalbicans). N-methyl secoglaucine and N-methyl secoboldine showed cytotoxicityagainst the two cell lines tested (HeLa and H460). Allelopathic effect can beevidenced both for the oil and for the crude extract and fractions of branches andleaves, against Lactuca sativa and Allium cepa. In the pharmacological study, thecrude extract from the branches showed antinociceptive potential in the secondphase of the formalin-induced nociception test, being shown to be inactive for the hotplate, Tail flick and evaluation of locomotor activity by the open field test. In theevaluation of carrageenan-induced paw edema, a result was observed 3 hours aftercarrageenan injection, also reducing the enzyme activity of myeloperoxidase. Thestudy results demonstrate the usefulness of this plant as a potential source ofantioxidant, antimicrobial, allelochemical and anti-inflammatory agents.