Micropropagação e estudo da parada de crescimento durante a aclimatização de mudas de macieira (Malus domestica Borkh.) cv. Gala, clone FZ

Abstract

Resumo: Foram produzidas mudas de Malus domestica Borkh. cv. Gala, clone FZ, por micropropagação. Este clone apresenta coloração vermelha intensa da epiderme do fruto. Brotações coletadas na primavera foram submetidas à desinfestação. 0 isolamento e as transferências para as demais etapas in vitro foram feitas em câmara de fluxo laminar e os explantes foram mantidos em sala de incubação, com temperatura de 25±2°C, fotoperíodo de dias longos e luminosidade de 2000 lux. Os meristemas foram cultivados em meio MS, contendo 1,0 mg/l de BAP, 0,5 mg/l de AIB e 0,1 mg/l de GA3 . Após 40 dias, os meristemas desenvolvidos foram repicados para meio de multiplicação MS, contendo 1,0 mg/l de BAP e 1,0 mg/l de tiamina, durante 5 subculturas. 0 alongamento foi avaliado em meio MS/2, de consistência sólida ou fase dupla (sólido-líquido) e combinações de BAP, GA3 e AIB. Na etapa de enraizamento, testou-se: a influência das concentrações de sais, de sacarose, de tiamina e o tempo necessário no meio de indução de enraizamento, na presença de 0,2 mg/l de AIB. As mudas foram transplantadas em bandejas de semeadura com terra esterilizada e plantmax (3:1), em casa de vegetação climatizada modelo Van der Hoeven. Após o transplante, as mudas cresceram durante um mês e apresentaram parada de crescimento que se prolongava até 4 meses. Para identificar a possível causa desta parada, lotes de 30 mudas foram submetidos a temperaturas de 2 a 4°C ou 8 a 10°C, durante 720 ou 1440 h e um outro lote foi mantido na casa de vegetação (testemunhas). Para verificar se as paradas de crescimento eram causadas por dormência foi utilizado o teste biológico de revelação da dormência (POUGET, 1964). As etapas in vitro apresentaram resultados satisfatórios, sendo que a taxa de multiplicação da segunda a quinta subcultura foi de 7 brotações por explante (>0,5cm), após um mês. Os maiores alongamentos (250%) foram obtidos em meio MS/2, fase dupla, acrescido de 0,25 mg/l de BAP e 0,1 mg/l de AIB, sendo que o GA3 mostrou pouca influência. A permanência das brotações durante 6 dias em meio MS/4, contendo 0,2 mg/l de AIB, 20 g/l de sacarose e 1,0 mg/l de tiamina proporcionou as maiores porcentagens de enraizamento (95,24%) e o maior número de raízes por brotação (8). O tempo de permanência no meio de enraizamento e a época do ano não influenciaram na taxa de sobrevivência das mudas, variando entre 92,19 e 100%. As paradas de crescimento das mudas micropropagadas, mantidas em casa de vegetação, devem ser causadas por dormência, pois após um período de 1440 h, sob temperatura de 2 a 4°C, as plantas recuperaram o crescimento.

Abstract: Cuttings from Malus domestica Borkh. cv. Gala, clon FZ were produced by micropropagation. This cion exhibits intense red colour of its fruit epiderm. Shoots collected in the spring were subjected to desinfestation. The establishment and transfer to other steps in vitro were carried out in laminar flux camera. Cultures were incubated at 25±2°C, with illumination at 2000 lux for 16 h/day. Meristems were grown in MS medium, containing 1.0 mg/1 BAP, 0.5 mg/1 IBA and 0.1 mg/1 GA3 . After 40 days, developped meristems were transferred to proliferation medium MS, containing 1.0 mg/1 BAP and 1.0 mg/1 thiamine, during 5 subcultures. The elongation was evaluated in MS/2 medium, solid or double phase (solid-liquid) and combinations of BAP, GA3 and IBA. The rooting step was tested, for the influence of salt concentrations, sucrose and thiamine and for a necessary time in induction medium with 0.2 mg/1 IBA. Cuttings were transplanted in seeding trays with sterilized soil and plantmax (3:1) in a climate greenhouse type Van der Hoeven. After transplanting, cuttings grew during a month and stopped growth until 4 months. To identify the probable cause of its inhibition, lots of 30 cuttings were submitted to temperatures from 2-4°C or 8-10°C during 720 or 1440 h and another lot was maintained in a greenhouse (control). To verify if these cessations of growth were caused by dormancy, a dormancy revelation biological test of was used (P0UGET, 1964). The steps in vitro exhibit satisfatory results, the proliferation rate from 2a to 5a subculture had 7 shoots/explant (>0.5 cm), per month. The greater elongations (250%) were obtained in MS/2 medium, double phase, supplemented with 0.25 mg/1 BAP and 0.1 mg/1 IBA. However, GA3 showed little influence. Shoots maintained during 6 days in MS/4 medium, containing 0.2 mg/1 IBA, 20 g/1 sucrose and 1.0 mg/1 thiamine provided the greater rooting percentages (95.24%) and the greater numbers of roots per shoot (8). Time in rooting medium and the period year did not influence the survived rate, ranged from 92.19 to 100%. The cessation of growth of micropropagated cuttings mantained in a greenhouse was probably caused by dormancy, because plants regrowed after 1440 h, by temperature from 2 to 4°C.