Estudo do mecanismo de recrutamento de mastocitos para sitios perifericos

Abstract

Resumo: Os grànuios citoplasmáticos dos mastócitos contêm inúmeras substâncias que, quando liberadas, participam das respostas alérgicas e inflamatórias. A liberação de tais substâncias está relacionada com o estímulo dos mastócitos, que ocorre quando os receptores de alta afinidade (FC sR I) para imunoglobulina E (IgE) são interligados ou, também, de maneira independente dos FCeRI, através da ação de substâncias como o composto 48/80, que causa a desgranuiação dos mastócitos de forma não-citotóxica. A lise dos mastócitos pela água destilada causa a liberação apenas dos mediadores pré- formados contidos nos grânulos dos mastócitos, tais como a histamina, a heparina, o fator quimiotático para eosinófilos na anafilaxia (EC F-A ) e proteases. A desgranuiação causada pela anti-IgE ou pelo composto 48/80, além destes fatores, também libera os mediadores neo-formados, como os leucotrienos, prostaglandinas e citocinas. O s m ecanism os de diferenciação e crescimento dos mastócitos e de seus precursores são determinados pela ação de fatores de crescimento e outras interleucinas, porém, não se conhece exatamente quais os fatores que estão envolvidos no recrutamento dos mastócitos da medula óssea. Para investigar se os mediadores químicos pré-formados e neo-formados liberados pelos mastócitos participam do processo de recrutamento destas células da medula óssea, ratos foram injetados intraperitonealmente com água destilada, que causa lise dos mastócitos, com anti-IgE e com o composto 48/80, que causam a desgranuiação dos mastócitos de forma dose-dependente. O s mastócitos da medula ó ssea foram isolados com esferas magnéticas conjugadas ao mAb BGD6, específico para mastócitos. A população de mastócitos da medula ó ssea obtida de animais controle varia entre 2,38% e 2,5%. A diminuição da população de mastócitos da medula ó ssea observada 48 horas após a injeção intraperitoneal de água destilada, anti-IgE e composto 48/80, ocorre de maneira equivalente nos três tratamentos: 0,6%; 0,75% e 0,41%, respectivamente. Animais também foram injetados com o fator estimulador de colônias de granulócito (G -C S F) e o fator estimulador de colônias de granulócito/macrófago (G M -CSF), os quais não provocaram desgranuiação dos mastócitos peritoneais e não promoveram redução na população de mastócitos da medula óssea. O G -C S F promoveu um aumento da população de mastócitos da medula ó ssea (5,48%) e induziu o aparecimento de mastócitos imaturos no mesentério. O G M -C SF não alterou a população de mastócitos da medula óssea, que manteve o mesmo número de células encontrado nos controles. O s resultados sugerem que os compostos pré-formados liberados pelos mastócitos são suficientes para recrutar estas células e seus precursores da medula óssea

Summary: Mast celi cytoplasmic granules contain numerous substances íhat when released participate in ailergic and inflammatory responses. Mast cell granuies may be released when the mast cells are activated by cross-linking of the high affinity IgE receptor (FCsRI), or in an FCeRI independent manner by substances such as Compound 48/80 that cause the non-cytoxic degranulation of mast cells. The lysis of mast cells by distilled water results in the release of only the preformed mediators such as histamine, heparin, chemotactic factor for eosinophils in anaphalaxis (EC F-A ) and proteases. W hen mast cells are degranulated by anti-IgE or by Compound 48/80, in addition to releasing the pre-formed factors, the cells also release newly formed mediators such as leukotrienes, prostaglandins and cytokines. Although the growth and differentiation of mast cells and their precursors are controlled by the action of growth factors and other interleukines, it is not know exactly which factors are involved in the recruitment of mast cells from the bone marrow to peripheral sites. In order to investigate whether the pre-formed or newly formed mediators released by mast cells play a role in the recruitment of mast cells from the bone marrow, rats were injected mtraperitoneally with distilled water which lyses the mast cells or with anti-IgE or with Compound 48/80 both of which degranulate the mast cells in a dose dependent fashion. Mast cells were isolated from the bone marrow by immunomagnetic isolation using magnetic beads conjugated with the mast cell specific antibody mAb BGD6. In control animais, between 2.38% and 2.5% of the cells in the bone marrow were mast cells. Intraperitoneal injection with distilled water, anti-IgE or Compound 48/80, ali resulted in a similar diminution (0.6%; 0.75% and 0.41% ) of mast cells in the bone marrow. Animais were also injected with two growth factors, granulocyte colony-stimulating factor (G -C S F) and granulocyte/macrophage-colony stimulating factor (G M -CSF) that do not stimulate mast cell degranulation. No reduction in the number of mast cells in the bone marrow w as observed with either factor. However, intraperitoneal exposure to G -C S F cau ses an increase in the number of mast cells in the bone marrow (5.48% ) and increased the number of immature mast cells in the mesentery. After exposure to G M -C SF, the number of mast cells seen in the bone marrow and in the mesentery was the sam e as that seen in control animais. Our results suggest that the pre-formed mediators released by mast cells are sufficient to recruit mast cells and their precursors from the bone marrow