Transformação genética de Trypanosoma cruzi mediada por Agrobacterium tumefaciens

Abstract

Trypanosoma cruzi é o agente etiológico da doença de Chagas, e constitui alvo de inúmeros estudos que visam desde a elucidação dos mecanismos biológicos, apresentados por este parasita, até o desenvolvimento de quimioterapicos e vacinas. Este protozoário apresenta um ciclo heteroxênico, caracterizado pela expressão diferencial de genes, sendo que alguns deles já foram clonados e estudados. Contudo o sistema de transferência gênica em T. cruzi tem sido um obstáculo, pois envolvem a introdução de plasmídeos pela técnica de eletroporação, e o emprego desta metodologia leva a uma perda celular significativa devido as elevadas voltagens aplicadas. A transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens (ATMT), uma bactéria Gram-negativa, representa um método de mutagênese insercional, uma vez que ocorre a transferência e integração, no cromossomo da célula hospedeira, de uma região denominada de T-DNA presente no plasmídeo bacteriano. Portanto, este trabalho visou o desenvolvimento de uma metodologia de transformação de células de T. cruzi mediado por Agrobacterium.