Sinningia hatschbachii E S. gerdtiana : estudo fitoquímico e avaliação das atividades antimicrobiana, antioxidante e citotóxica

Abstract

Resumo: A família Gesneriaceae Rich. & Juss compreende cerca de 150 gêneros e aproxim adam ente 3000 espécies de plantas ornamentais, de distribuição pantropical, sendo constituída de ervas, cipós ou arbustos. Sinningia é um dos gêneros desta família que compreende cerca de 70 espécies, distribuídas desde o México até a Argentina. Neste trabalho foram estudadas duas espécies, Sinningia hatschbachii, uma pequena erva com tubérculos perenes, encontrada na Mata Atlântica e, Sinningia gerdtiana, uma erva perene que não apresenta tubérculos, encontrada em uma pequena área da bacia do Rio Ribeira. Estas espécies não tinham sido estudadas previamente, quanto à sua caracterização química e atividade biológica. O material vegetal seco (tubérculos de S. hatschbachii e partes aéreas de S. gerdtiana) foi extraído com solventes de diferentes polaridades e os extratos fracionados através de técnicas cromatográficas como CCD, CC e CLAE. Para identificação das substâncias isoladas foram utilizados métodos espectroscópicos, principalmente ressonância magnética nuclear, além de comparação com a literatura. De S. hatschbachii foram isoladas 14 substâncias: 6 - hidroxi-2-0-m etil-7-m etoxidunniol (SH1), 7-hidroxi-a-dunniona (SH2), 7-hidroxi-6- m etoxi-a-dunniona (SH3), 6-hidroxi-7-m etoxi-a-dunniona (SH4), 2,4,4',6- tetram etoxidiidrochalcona (SH5), 4'-hidroxi-2,4,6-trim etoxidiidrochalcona (SH6 ), 4',2- dihidroxi-4,6-dim etoxidiidro-chalcona (SH7), calceolariosídeo B (SH8 ), conandrosídeo (SH9), 1,4-dimetoxi-2-naftoato de metila (SH10), 1-hidroxi-4-metoxi- 2-naftoato de metila (SH11), p-hidroxibenzoato de metila (SH12), sitosterol (SH13) e, estigmasterol (SH14). As substâncias SH9, SH13 e SH14 também foram isoladas de S. gerdtiana, juntam ente com sanangosídeo (SG1), halleridona (SG2), acetilcleroindicina B (SG3) e cleroindicina C (SG4). Destas, SH1 é inédita, enquanto que SH4, SH5, SH6 , SH7, SH10, SH11, SG1 e SG3 estão sendo relatadas pela primeira vez no gênero. Os extratos dos tubérculos de S. hatschbachii em hexano (SHA), CH2Cl2 (SHB), AcO Et (SHC) e EtOH (SHD) foram avaliados para as atividades antimicrobiana, antioxidante e citotóxica. A atividade antim icrobiana foi avaliada in vitro, contra bactérias Gram-positivas (Staphylococcus aureus ATCC 14458, S. epiderm idis ATCC 12228), Gram-negativas (Escherichia coli ATCC 10799, Pseudom onas aeruginosa ATCC 27853) e fungos (Candida albicans ATCC 10231, C. glabrata ATCC 30070, C. dubliniensis ATCC 778157 e C. parapsilosis ATCC 22019). Todas as amostras mostraram-se inativas (CIM > 200 pg mL-1). A capacidade antioxidante dos extratos foi avaliada pelo ensaio ORAC (Capacidade de absorção de radicais de oxigênio), utilizando a fluoresceína como reagente e o trolox como padrão. Os resultados foram expressos em pmol de trolox equivalente por grama de extrato seco (pmol TE g-1). Foram ativos os extratos em diclorometano (1.095,6 pmol TE g-1), AcO Et (2.843,3 pmol TE g-1) e EtOH (5.981,2 pmol TE g-1). No ensaio de atividade citotóxica, os extratos em hexano, diclorometano e AcO Et foram ativos contra as linhagens de células tumorais humanas PC-3 (próstata) e SKMEL 103 (melanoma). Os extratos em AcOEt e EtOH de S. gerdtiana foram testados para atividade antioxidante, sendo que ambos foram ativos (1.185,0 e 4.888,6 pmolTE g-1, respectivamente). Palavras-chave: Gesneriaceae, Sinningia hatschbachii, S. gerdtiana, naftoquinonas, diidrochalconas, glicosídeos fenólicos, etilcicloexanoides, atividade antimicrobiana, citotóxica e antioxidante.

Abstract: The Gesneriaceae Rich. & Juss fam ily comprises about 150 genera and approxim ately 3000 ornamental species of pantropical distribution, consisting of herbs, vines or shrubs. Sinningia is one of the genera of this fam ily that comprises around 70 species, distributed from Mexico to Argentina. In this w ork were investigated two species, Sinningia hatschbachii, a small herb with perennial tubers, found in the Atlantic Forest, and Sinningia gerdtiana, a perennial herb without tubers, found in a small area of the Ribeira River basin. There were not chemical or biological studies on these species. Dried plant material (tubers of S. hatschbachii and aerial parts of S. gerdtiana) was extracted with solvents of different polarities, and the extracts were fractionated by chrom atographic techniques, such as TLC, CC and HPLC. Spectroscopic methods, mainly nuclear magnetic resonance, were used to identify the isolated compounds, in addition to comparison with the literature. From S. hatschbachii were isolated 14 compounds: 6-hydroxy-2-O-m ethyl-7- methoxydunniol (SH1), 7-hydroxy-a-dunnione (SH2), 7-hydroxy-6-m ethoxy-adunnione (SH3), 6-hydroxy-7-m ethoxy-a-dunnione (SH4), 2,4,4',6 - tetram ethoxydihydrochalcone (SH5), 4'-hydroxy-2,4,6-trim ethoxydihydrochalcone (SH6 ), 2-dihydroxy-4,6-dim ethoxydihydrochalcone (SH7), calceolarioside B (SH8 ), conandroside (SH9), methyl 1,4-dimethoxy-2-naphthoate (SH10), methyl 1-hydroxy- 4-m ethoxy-2-naphthoate (SH11), methyl 4-hydroxybenzoate (S H l2 ), sitosterol (SH13), and stigmasterol (SH14). Compounds SH9, SH13, and SH14 were also isolated from S. gerdtiana, together with sanangoside (SG1), halleridone (SG2), acetylcleroindicin B (SG3), and cleroindicin C (SG4). Am ong these compounds, SH1 is new, while SH4, Sh5, S h 6 , SH7, SH 1 0 , SH 1 1 , SG 1 e SG3 are being reported for the first time in Sinningia. Hexane, CH2Cl2, EtOAc, and EtOH extracts from S. hatschbachii were evaluated for antimicrobial, antioxidant and cytotoxic activities. In vitro antimicrobial activity was tested against Gram-positive (Staphylococcus aureus ATCC 14458, S. epiderm idis ATCC 12228), Gram-negative (Escherichia coli ATCC 10799, Pseudom onas aeruginosa ATCC 27853) and fungi (Candida albicans ATCC 10231, C. glabrata ATCC 30070, C. dubliniensis ATCC 778157 and C. parapsilosis ATCC 22019). All samples were inactive (MIC > 200 gg mL-1). The antioxility capacity of the extracts was evaluated by ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity) assay using fluorescein as reagent, and trolox as standard. The results were expressed in gmol of trolox equivalent by gram of dried extract (gmol TE g-1). The extracts in c H 2 CI2 (1,095.6 gmol TE g-1), EtOAc (2,843.3 gmol T e g-1), and EtOH (5,981.2 gmol TE g-1) were active. In the cytotoxic assay, the extracts in hexane, CH2Cl2, and EtOAc were active against the human tum or cell lines PC-3 (prostate), and SKMEL 103 (melanoma). AcOEt and EtOH extracts from S. gerdtiana were tested for antioxidant activity, and both were active (1,185.0 e 4,888.6 gmolTE g-1, respectively). Key words: Gesneriaceae, Sinningia hatschbachii, S. gerdtiana, naphthoquinones, Dihydrochalcones, phenolic glycosides, ethylcyclohexanoids, antimicrobial, cytotoxic and antioxidant activities.