Estudo morfoanatômico, fitoquímico e do potencial tóxico, larvicida, antimicrobiano, antioxidante, anti-inflamatório e antinociceptivo de Smilax larvata Griseb. (Smilacaceae)

Abstract

Resumo: A especie Smilax larvata Griseb.(Smilacaceae), e conhecida no sul do Brasil como gunha-de-gatoh e suas partes aereas sao utilizadas na medicina tradicional para o tratamento da inflamacao. O presente estudo tem como objetivo gerar informacoes que contribuam para o conhecimento e controle de qualidade da especie. Os aspectos abordados incluem o estudo morfoanatomico, determinacao de parametros de pureza, investigacao da composicao fitoquimica, avaliacao do potencial toxico, hemolitico, larvicida e antimicrobiano, estudo da atividade antioxidante, e investigacao do potencial efeito anti-inflamatorio e antinociceptivo de S. larvata. O material foi coletado na cidade de Curitiba, Parana, Brasil. Uma parte foi destinada ao estudo morfoanatomico e determinacao de parametros de pureza. O restante foi submetido a extracao etanolica em aparelho de soxhlet gerando o extrato etanolico bruto. Este foi submetido a particao liquido-liquido com solventes de polaridade crescente obtendo-se as fracoes n-hexano, cloroformio, acetato de etila e hidroalcoolica. O extrato bruto e fracoes foram utilizados nos ensaios de atividade biologica. De acordo com o estudo anatomico, a folha de S. larvata e simples, hipoestomatica e a margem e espinulosa. O mesofilo e dorsiventral. Observa-se a presenca de cristais prismaticos e rafides. Projecoes espiniformes sao observadas na nervura central da face abaxial da folha e por toda extensao do caule. Este possui um anel esclerenquimatico continuo envolvendo o cilindro vascular no qual os feixes vasculares estao distribuidos de forma atactostelica. Com relacao a composicao fitoquimica, da fracao acetato de etila foram isolados dois flavonoides di-glicosideos, os quais foram identificados por experimentos de RMN de 1H, 13C, HSQC e HMBC como drabanemoroside e canferol 3-O-ƒ¿-L-ramnopiranosil(1¨2)-ƒ¿-L-ramnopiranoside. Estas substancias foram isoladas pela primeira vez no genero no presente estudo. Tambem foram identificados o canferol, acido p-cumarico e acido p-hidroxibenzoico. O extrato bruto e fracoes foram inocuos a Artemia salina, entretanto, o extrato bruto, fracao hexano e cloroformio foram hemoliticos (1000 ƒÊg.mL-1). O extrato bruto apresentou atividade larvicida contra larvas de Aedes aegypti e atividade antifungica para Candida albicans. Todos os extratos reduziram a peroxidacao lipidica. O extrato bruto apresentou significativa atividade antinociceptiva. O mecanismo de acao compreende a participacao do sistema opioide, com atuacao sobre receptores ƒÊ e provavelmente sem o envolvimento de receptores TRPA1. Esta propriedade e devida provavelmente aos alcaloides presentes no extrato etanolico bruto de S. larvata. Palavras-chave: Smilax, drabanemoroside, canferol, Aedes aegypti, antioxidante, antinociceptivo.

Abstract: The species Smilax larvata Griseb. (Smilacaceae) is known in southern Brazil as "unha-de-gato" and its aerial parts are used in traditional medicine for the treatment of inflammation. This study aims to generate information that contributes to the knowledge and the quality control of the species. The aspects evaluated include morpho-anatomical study, determination of purity parameters, phytochemical composition investigation, toxicity, hemolytic, larvicidal and antimicrobial activities evaluation, study of antioxidant activity, and antiiinflammatory and antinociceptive activities investigation of S. larvata. The vegetal material was collected in the city of Curitiba, Parana, Brazil. A part was used in the anatomical study and quality control parameters. The remaining was submitted to an alcoholic extraction in Soxhlet apparatus generating the crude extract. It was submitted to a liquid partition with crescent polarity solvents producing the n-hexane, chloroform, ethyl acetate and hydroalcoholic fractions. The crude extract and fractions were used in the biological activities assays. According to the anatomical study, S. larvata leaf is simple, hypostomatic and the margin is spinulose. The mesophyll is dorsiventral. Prismatic crystals and raphides were observed. Spiniform projections were observed in the leaf midrib abaxial face and through all stem length. The stem has a sclerenchymatous ring involving the vascular cylinder which vascular bundles has atactostelic distribution. Regarding to the phytochemical composition, from the ethyl acetate fraction were isolated two flavonoid glycosides which were identified through 1H, 13C, HSQC and HMBC NMR experiments, as drabanemoroside and kaempferol 3-O-ƒ¿-L-rhamnopyranosyl (1 ¨ 2) -ƒ¿- L-rhamnopyranoside. These compounds were isolated for the first time on this genus in the present study. Kaempferol, p-coumaric acid and p-hydroxybenzoic acid were also identified. The crude extract and fractions were harmless to Artemia salina, however, the crude extract, hexane and chloroform fractions were hemolytic (1000 ƒÊg.mL-1). The crude extract showed larvicidal activity against Aedes aegypti and antifungal activity against Candida albicans. All extracts reduced the lipid peroxidation. The crude extract showed significant antinociceptive activity. The mechanism of action consists on opioid system participation, acting on ƒÊ receptors probably without TRPA1 receptors involvement. This property is probably due to the alkaloids detected in the crude ethanolic extract of S. larvata. Keywords: Smilax, drabanemoroside, kaempferol, Aedes aegypti, antioxidant, anti-nociceptive.