Efeito do extrato de cascas de Rauvolfia sellowii Müll Arg. e de Himatanthus lancifolius (Müll) Arg. e dos alcaloides uleína e ioimbina na melanogênese

Abstract

Resumo: Melanogênese é um processo complexo que ocorre dentro dos melanossomos, organelas especializadas dos melanócitos da epiderme, culminando na síntese de melanina. O primeiro passo da cascata melanogênica envolve a hidroxilação do aminoácido L-tirosina a L-DOPA, e posterior oxidação deste à dopaquinona, ambas as etapas catalisadas pela tirosinase, a enzima-chave no processo, encontrada amplamente em animais, plantas e fungos. Doenças da pele, como as hipercromias e as hipocromias, podem ocorrer devido a alterações na produção melanina. Espécies vegetais são fontes ricas de substâncias naturais com ação sobre a produção de melanina. O objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial dos extratos preparados das cascas de H. lancifolius e de R. sellowii e dos alcaloides indólicos uleína e ioimbina na melanogênese. Para tanto, os efeitos de concentrações não tóxicas dessas substâncias, estabelecidas por meio de ensaios de toxicidade sobre células de melanoma murino B16F10 usando os testes do MTT e do Vermelho Neutro, foram avaliados diretamente sobre a atividade das tirosinases de cogumelo e da extraída do lisado celular de células B16F10, assim como em cultura in vitro utilizando células B16F10 como modelo experimental, onde se avaliou não só a atividade de tirosinase, mas também a produção de melanina. Os resultados mostraram que os alcaloides indólicos uleína e ioimbina, assim como o extrato de H. lancifolius, inibiram significativamente a atividade das diferentes tirosinases e a produção de melanina, demonstrando, pela primeira vez, potencial como agentes antimelanogênicos. O extrato de R. sellowii, por sua vez, estimulou de forma significativa a produção de melanina em contraste com pouca interferência na atividade enzimática, sugerindo comprometimento nas vias de sinalização posteriores à ação da tirosinase.

Abstract: Melanogenesis is a complex process that occurs within melanosomes, specialized organelles of melanocytes resident in the epidermis, culminating in the synthesis of melanin. The first two steps of the melanogenic cascade involve the hydroxylation of L-tyrosine to L-DOPA, and subsequently, the oxidation of L-DOPA to dopaquinona, in which both are catalyzed by the action of tyrosinase, the rate limiting enzyme for controlling melanin production, largely found in animals, plants, and fungi. Skin disorders, such as hypercromias and hypocromias, may be due to changes in melanin production. Several plants, rich sources of natural substances, have been known to act on the production of melanin. The aim of this work was to evaluate the potential of the extracts prepared from the barks of H. lancifolius and R. sellowii along with the indole alkaloids uleine and yohimbine on melanogenesis. To this end, the effects of non-toxic concentrations of these substances, established by means of the toxicity tests on murine melanoma B16F10 cells using the MTT and Neutral Red methods, were assessed directly on the activities of mushroom tyrosinase and of the enzyme extracted from B16F10 cell lysates, as well as in in vitro culture of B16F10 cells as an experimental model, where not only the activity of tyrosinase has been evaluated but also the melanin contend. The results described here showed for the first time that the indole alkaloids uleine and yohimbine as well as the extract of H. lancifolius significantly inhibited the activity of the different tyrosinases as well as the melanin production, demonstrating their potential as antimelanogenic agents. The extract of R. sellowii, in turn, significantly stimulated melanin production in contrast with little interference in the enzyme activity, suggesting it can alter melanogenesis by acting through pathways down below the tyrosinase steps.