Hidrólise de triglicerídeos e síntese de éster de ácido graxo em sistema de micelas reversas

Abstract

Resumo: 0 objetivo deste trabalho foi o de estudar os principais parâmetros que regem a cinética e a estabilidade da lipase de Thermomyces lanuginosa (Lipoiase 100 L, Novozyme) em reações de hidrólise de triglicerídeos e síntese de éster de cadeia longa, em sistema de micelas reversas de AOT [2-etil-hexil-sulfossuccinato de sódio, 100 mM] em isooctano. Em reações de hidrólise, foram determinados os efeitos do parâmetros Wo ([HfeOMAOT]), concentração de enzima, pH, temperatura e concentração do substrato. Verificou-se que a lipase de Thermomyces lanuginosa apresentou um perfil de atividade tipicamente na forma de sino, com atividade máxima (1092,4 U/mg) em Wo de 15. As demais condições ótimas para a atividade da enzima foram pH 8,0 e 37 °C, com atividade máxima de 2163,6 U/mg. O estudo do efeito da concentração dos substratos tríbutirina (10 a 170 mM) e trioleína (10 a 250 mM) mostrou que a enzima não apresenta um comportamento cinético de Michaelis-Menten, sendo inibida por excesso dos substratos. A atividade máxima de 1854,6 U/mg foi obtida a 120 mM de tríbutirina e de 2144,5 U/mg a 150 mM de trioleína. Nos ensaios de estabilidade da enzima frente à temperatura (30-60 °C), verificou-se que esta sofreu ativação quando incubada a 30 °C durante 30 minutos,, obtendo-se para as demais temperaturas tempos de meia-vida de 30, 20 e 10 min respectivamente a 37, 50 e 60 °C. Os efeitos dos parâmetros da reação e do sistema, como temperatura t, °C, pH, Wo, e razão molar (R.M), foram estudados através de um delineamento fatorial 24"1. As variáveis mais importantes foram o pH e a temperatura e a interação entre elas. As melhores condições para síntese do laurato de etila foram 30°C, pH 5,6; Wo 10; e R.M 5,0 com rendimento de 90% (60 min) e atividade específica de 220 U/mg.