Análise funcional da via proteolítica mediada pelo proteossomo dependente de ubiquitina e ATP, em Trypanossoma cruzi

Abstract

Os mecanismos envolvidos no processo de diferenciação celular do T. cruzi das formas epimastigotas (não infectantes) para as formas tripomastigotas metacíclicas (infectantes), tem sido motivo de estudo de nosso grupo há muitos anos. Com o intuito de compreender os diversos mecanismos envolvidos neste processo, temos efetuado uma busca sistemática de genes diferencialmente expressos utilizando diferentes metodologias. Em tripanosomas o controle do mecanismo da expressão gênica é feito em sua maioria a nível pós-transcricional ou pós-traducional (Elias, 2001). Consequentemente estes parasitas podem se adaptar rapidamente às transições entre o inseto vetor e o hospedeiro fazendo uma reprogramação na expressão de seus genes. Durante as mudanças adaptativas na morfologia, fisiologia e comportamento muitas proteínas são selecionadas e outras são degradadas. A regulação da diferenciação celular pode ser feita pela degradação ou não de proteínas específicas importantes. A fim de investigar a existência da via proteolítica proteossomo-ubiquitina, bem como a expressão dos seus componentes utilizamos neste trabalho uma ferramenta da genômica funcional conhecida como microarranjo de DNA. O microarranjo utilizado possui uma cobertura de 45% para os genes dessa via proteolítica. Os resultados das análises das hibridações com RNA polissomal e RNA total de epimastigotas, durante o início da metaciclogênese, sugerem que os genes da via sofrem uma regulação complexa de sua expressão. Alguns componentes apresentam perfis comuns de expressão o que abre novas perspectivas para investigação de possíveis interações entre eles

The mechanisms involved in the cellular differentiation of T. cruzi epimastigote (non-infectious forms) into metacyclic trypomastigotes (infectious forms) have been studied by our group for many years. In order to understand the several mechanisms involved in this process a systematic search for differentially expressed genes was made using different technologies. In trypanosomes, the gene expression control mechanism is mainly post-transcriptional or post-translational (Elias, 2001). Consequently, parasites can rapidly adapt to the vector-host transition by changes in its genes expression. Many proteins are selected and others are degraded during the adaptative morphology, physiology and behavioral changes. Cellular differentiation regulation may be done by specific proteins degradation. In order to investigate the existence of the ubiquitina-proteasome pathway, in genomic fashion, DNA microarray technology was used. A microarray covering 45% for genes involved in this pathway was used. Results of the polysomal RNA and total RNA hybridization analysis, during the start of metacyclogenesis, indicated complex gene expression regulation. Some components in this pathway show a common pattern and opens new perspectives to investigation their putative interactions.