Interação de TcNUP-1 com cromatina de Trypanosoma Cruzi

Abstract

Resumo: A lâmina nuclear é uma estrutura fibrilar protéica que está abaixo da membrana nuclear interna. Nos metazoários, as laminas são os componentes estruturais principais dessa estrutura e estão envolvidas em diversos processos nucleares. Os eucariotos que não possuem laminas apresentam proteínas distintas com funções homólogas. Recentemente foi identificada uma proteína com domínio coiled-coil em Trypanosoma brucei, NUP-1, como o componente filamentoso principal da lâmina nuclear, ainda sem papel definido. Nós caracterizamos uma proteína ortóloga à NUP-1 em T. cruzi e identificamos in vivo regiões do DNA associadas à proteína através de ensaio de imunoprecipitação da cromatina. Este foi o primeiro relato com relação à associação de TcNUP-1 com regiões cromossômicas contendo genes que codificam para proteínas de superfície e através do ensaio de FISH pudemos verificar sua co-localização com TcNUP-1. TcNUP-1 é uma proteína estrutural com papel essencial na organização nuclear por ancorar regiões cromossômicas ao envelope nuclear.

Abstract: The nuclear lamina is a structure that lines the inner nuclear membrane. In metazoans, lamins are the primary structural components of the nuclear lamina and are involved in several processes. Eukaryotes that lack lamins have distinct proteins with homologous functions. Some years ago, a coiled-coil protein in Trypanosoma brucei, NUP-1, was identified as the major filamentous component of its nuclear lamina. However, its precise role has not been determined. We characterized a homologous protein in Trypanosoma cruzi, TcNUP-1, and identified its in vivo DNA binding sites using a chromatin immunoprecipitation assay and by testing of FISH we could verify the co-location of these regions with TcNUP-1. We demonstrate for the first time that TcNUP-1 associates with chromosomal regions containing large non-tandem arrays of genes encoding surface proteins. We therefore suggest that TcNUP-1 is a structural protein that plays an essential role in nuclear organization by anchoring T. cruzi chromosomes to the nuclear envelope.