Caracterização estrutural de polissacarídeos obtidos do corpo de frutificação e cultivo submerso de Agaricus bisporus

Abstract

Resumo: Polissacaideos de basidiomicetos despertam grande interesse por apresentarem diversas propriedades terapeuticasO. A estrutura quimica destes biopolimeros possui um importante papel na atividade biologica dos polissacarideos. O presente trabalho teve por objetivo elucidar a estrutura quimica de alguns polissacarideos presentes no corpo de frutificacao, bem como os obtidos por meio do cultivo submerso Agaricus bisporus. Buscou tambem verificar os efeitos antinociceptivos e antiinflamatorios de uma glucana isolada do corpo de frutificacao deste organismo. O corpo de frutificacao do basidiomiceto seco, moido e deslipidificado foi submetido a extracoes aquosas a frio e a quente. O extrato obtido do cultivo submerso foi submetido a um processo de recuperacao dos exopolissacarideos (EPS). Os extratos foram submetidos a precipitacao com etanol e posteriormente foram submetidos aos processos de purificacao por congelamento e degelo, precipitacao com solucao de Fehling, extracao com DMSO e dialise por membranas de diferentes porosidades, de maneira sequencial. A partir destes processos foram purificadas e caracterizadas diferentes estruturas. A fracao SSCW obtida pela extracao aquosa a frio apresentou-se homogenea e composta por manose, galactose e glucose. Analises espectroscopicas e de metilacao sugerem que essa molecula apresenta cadeia principal constituida de £]-D-Glcp ligadas (1„_6), sendo que as unidades podem estar substituidas em O-3 por unidades de Galp O-6-substituidas por unidades de Galp O-6-substituidas por terminais nao redutores de ƒÒ-D-Glcp ou por unidades de Glcp O-3-substituidas por terminais nao redutores de ƒÒ-D-Glcp. A fracao SDPHW, obtida da extracao aquosa a quente, seguida por extracao com DMSSO, apos analises demonstrou ser uma ƒÒ-glucana linear, com ligacoes do (1„_6). Este polissacarideo apresentou um efeito analgesico e antiinflamatorio significativo com baixas doses quando avaliado em teste de contracao muscular induzida por acido acetico em camundongos. Os oligossacarideos produzidos a partir desta molecula tambem foram testados, porem seu efeito para a mesma atividade testada foi inferior ao da glucana integra. O cultivo em meio submerso foi realizado com o meio de cultivo Czapeck, o qual, apos testado com outros dois meios, promoveu melhores condicoes para o desenvolvimento do organismo. A fracao SSEPS foi obtida a partir da recuperacao dos exopolissacarideos produzidos durante o cultivo e purificada por uma serie sequencial de dialise em membranas com limite de exclusao por tamanho. Apresentou uma molecula heterogenea, composta de fucose, manose, galactose e glucose. A analise desta molecula, apesar de impura, sugere que esta molecula possa ser uma heterogalactana.