Oligossacarídeos obtidos por hidrólise redutiva parcial de polissacarídeos de algas vermelhas : estudos de ressonância magnética nuclear
Abstract
Resumo: A obtenção de oligossacarídeos, a partir de polissacarídeos, é um bom método para o estudo da estrutura química fina de biopolímeros, além de fornecer material para diversos estudos como RMN, IES-EM, EC, atividade biológica, entre outros. Neste trabalho foram utilizadas galactanas extraídas de duas algas vermelhas diferentes, Gracilaria domingensis e Eucheuma denticulatum, para obtenção de oligossacarídeos por hidrólise redutiva parcial. O hidrolisado de G. domingensis foi aplicado em coluna de troca aniônica (DEAE-Sephadex A25) e eluido com água destilada e gradiente contínuo de cloreto de sódio (0-0,3M). O eluato aquoso foi purificado por cromatografia de troca catiônica (DVB-S) e cromatografias de exclusão (Sephadex G25 e Bio-Gel P-2), sendo isolados e caracterizados por métodos espectroscópicos (RMN 1D e 2D) os seguintes dissacarídeos: agarobiitol ( -Dgalactopiranose-( 1 4)-3,6-anidro-L-galactitol); 62-O-metil agarobiitol ( -Dgalactopiranose- 6-O-metil-(1 4)-3,6-anidro-L-galactitol) e agarobiitol 62-sulfato ( - D-galactopiranose-6-sulfato-(1 4)-3,6-anidro-L-galactitol). As frações obtidas da eluição com gradiente contínuo de cloreto de sódio foram desalificadas por cromatografia de exclusão e/ou extração com solvente orgânico, rendendo principalmente agarobiitol 62-sulfato. Os polissacarídeos, tratados com álcali, de E. denticulatum foram submetidos à hidrólise redutiva parcial. O hidrolisado foi primeiramente purificado por cromatografia de troca catiônica (DVB-S) seguida de diálise fechada com membrana capaz de reter moléculas com massa molecular maior ou igual a 2000 Da. O material retido foi cromatografado em coluna de troca aniônica (DEAE-Sepharose CL-6B) e eluido com água destilada e gradiente descontínuo de carbonato de diamônio (0-0,4M). As frações obtidas foram estudadas com auxílio de métodos espectroscópicos, sendo identificado numa delas a presença de unidades de 4,6-O-(1'-carboxietilideno)- -D-galactopiranose, nunca antes relatada para esta alga. Foi possível isolar dois oligossacarídeos alditóis puros: carrabiitol 21,42-disulfato ( -Dgalactopiranose- 4-sulfato-(1 4)-3,6-anidro-D-galactitol-2-sulfato) e carratetraitol 21,42,23,44-tetrasulfato ( -D-galactopiranose-4-sulfato-(1 4)-3,6-anidro- -Dgalactopiranose- 2-sulfato-(1 3)- -D-galactopiranose-4-sulfato-(1 4)-3,6-anidro-Dgalactitol 2-sulfato). A hidrólise redutiva parcial e os processos de purificação utilizados permitiram isolar oligossacarídeos neutros, metilados e sulfatados com elevado grau de pureza. Os dois dissacarídeos obtidos a partir da hidrólise das carragenanas de E. denticulatum são de estrutura inédita, sendo pela primeira vez isolados e caracterizados.
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- Teses & Dissertações [10016]