Estudo de uma porfirana com estrutura não usual obtida da alga vermelha Porphyra columbina Montagne (Bangiales, Rhodophyta)

Abstract

Resumo: Porfiranas são polissacarídeos biossintetizados por algas vermelhas pertencentes aos gêneros Porphyra e Bangia, que apresentam uma estrutura similar a agarose porém mais complexa, devido a ocorrência natural de grupos metil e sulfato. Estes polissacarídeos foram obtidos a partir de P. columbina Montagne, por extração aquosa (1,5 p/v) a temperatura ambiente, sendo o extrato seqüencialmente precipitado com etanol 2 (fração PC66) e 3 volumes (fração PC75). Estas frações foram purificadas por cromatografia de exclusão em Sepharose 2B, obtendo-se duas sub-frações homogêneas (PC75B e PC66B) como mostrado por análise de HPSEC-MALLS. Análises de composição monossacarídica, metilação e 13C-RMN mostraram que as frações PC75 e PC66 eram estruturalmente distintas. Enquanto a primeira se mostrou composta por uma porfirana linear típica (NOSEDA, M.D.; VIANA, A.G.; DUARTE, M.E.R. & CEREZO, A.S., Carbohydr. Polym. 42: 301-305, 2000) a segunda apresentou algumas unidades de p-D-Galp 6-O-substituídas, como identificadas pelo sinal invertido em 68,8 ppm mediante análises em DEPT e metilação (derivado 2,4-di-O-metil-Gal). Após tratamento alcalino, a fração PC66B (NaOH 1M, 80°C, 3h), foi submetida a hidrólise redutiva parcial (0,5M de TFA, 65°C, 8h), rendendo uma mistura de oligossacarídeos, os quais foram purificados por cromatografia de exclusão em BIOGel P-2 (sub-frações PC66m3-1 ; 2; 3 e 4) e caracterizados usando espectroscopia de RMN (1 e 2D). As sub-frações PC66m3-3 e PC66m3-2 mostraram somente dois sinais na região anomérica, a 102,13 e 102,18 ppm para a primeira e a 102,68 e 102,19 ppm para a segunda, correspondendo as unidades de 6-O-metil-p-D-Galp e pD-Galp, respectivamente. Os sinais em campo mais alto (invertidos em DEPT) 62,80 e 62,77 ppm foram atribuídos ao C-1 da 3,6-AnGalOH para PC66rri3-3 e PC66m3-2. Estes resultados junto com os experimentos em 2D mostraram a estrutura dos seguintes oligossacarídeos: [6-0-me-P-D-Galp-(1-»4)-3,6-anidroa-L-GatOH] e [p-D-Galp-(1-^4)-3,6-anidro-a-L-GalOH] para PC66rri3-3 e [6-0- me-p-D-Galp-4-sulfato-(1 ^6)-p-D-Galp-(1 -»4)-3,6-anidro-a-L-GalOH] para PC66rri3-2. A presença do último oligossacarídeo indica que a fração PC66 contém porfiranas formadas por uma cadeia principal de unidades 3-O-ligadas (P-D-galactose e/ou 6-O-metil p-D-galactose) alternadas com unidades 4-0- ligadas (a-L-galactose 6-sulfato e/ou 3,6-anidro-a-L-galactose), parcialmente ramificadas em carbono 6 das unidades de p-D-galactose por 6-O-metil p-Dgalactose 4-sulfato, que não haviam sido descritas anteriormente.