Detecção de SARS-CoV-2 em líquido amniótico de gestantes com diagnóstico de COVID-19

Abstract

Resumo : O SARS-CoV-2, agente etiológico da COVID-19, reconhecida como pandemia pela Organização Mundial da Saúde em março de 2020, causa infecção assintomática ou sintomas leves na maioria dos casos. Entretanto, algumas pessoas portadoras de fatores de risco como idade avançada, doenças cardiovasculares, diabetes e obesidade apresentam maiores taxas de complicações. Além destes grupos, a forma grave da doença também tem atingido gestantes, onde tem-se notificado o aumento da mortalidade materna, prematuridade e óbito fetal. O impacto da elevada transmissibilidade do SARS-CoV-2 e suas variantes, a ampla variabilidade na apresentação clínica da COVID-19 e a possibilidade de transmissão vertical necessitam ser melhor estudadas em gestantes. Desta forma, este estudo visa contribuir com novos dados de evidência de transmissão vertical do SARS-CoV-2, por meio de detecção do RNA viral em amostra de líquido amniótico de gestantes positivas atendidas no Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná. Para atingir o objetivo proposto, amostras de líquido amniótico passaram por diferentes métodos de extração e de processamento, a fim de otimizar as análises. Foram coletadas, no período de 2020 e 2021, 22 amostras de líquido amniótico de gestantes atendidas no serviço de Obstetrícia do Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (CHC-UFPR) com diagnóstico positivo para SARS-CoV-2 por teste molecular em algum momento da gestação. Do total de amostras, 17 estavam elegíveis e foram incluídas no estudo. Ao final das etapas de processamento e extração, obteve-se um total de 66 alíquotas que passaram pelo teste de RT-PCR. Das amostras estudadas, o RNA viral do SARS-CoV-2 foi detectado em duas amostras distintas: uma no sobrenadante e outra no precipitado. Neste estudo, foi possível demonstrar a importância das condições pré-analíticas envolvidas no diagnóstico da transmissão vertical, além da necessidade de se estabelecer protocolos padronizados, para um diagnóstico acurado e preciso, que otimizem essas etapas do processo envolvidas no diagnóstico de transmissão vertical do SARS-CoV-2.

Abstract : The SARS-CoV-2, the etiological agent of COVID-19, recognized as a pandemic by the World Health Organization in March 2020, causes asymptomatic infection or mild symptoms in most cases. However, some people with risk factors such as advanced age, cardiovascular disease, diabetes and obesity have higher rates of complications. In addition to these groups, the severe form of the disease has also affected pregnant women, where an increase in maternal mortality, prematurity and fetal death has been reported. The impact of the high transmissibility of SARS-CoV-2 and its variants, the wide variability in the clinical presentation of COVID-19 and the possibility of vertical transmission need to be better studied in pregnant women. Therefore, this study aims to contribute with new evidence of vertical transmission of SARS-CoV-2, through the detection of viral RNA in a sample of amniotic fluid from positive pregnant women treated at the Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná. To achieve the proposed objective, amniotic fluid samples underwent different extraction and processing methods in order to optimizethe analysis. In the period 2020 and 2021, 22 samples of amniotic fluid were collected from pregnant women attended at the Obstetrics service of the Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (CHC-UFPR) with a positive diagnosis for SARS-CoV-2 by molecular test in sometime during pregnancy. Of the total samples,17 were eligible and were included in the study. At the end of the processing and extraction steps, a total of 66 aliquots were obtained that passed the RT-PCR test. Of the studied samples, SARS-CoV-2 viral RNA was detected in two different samples: one in the supernatant and the other in the precipitate. In this study, it was possible to demonstrate the importance of the pre-analytical conditions involved in the diagnosis of vertical transmission, in addition to the need to establish standardized protocols, for an accurate and precise diagnosis, which optimize these stages of the process involved in the diagnosis of vertical transmission of SARS -CoV-2.