Estudo dos efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus sobre o metabolismo e estresse oxidativo em fígado de ratos

Abstract

Os venenos de serpentes apresentam diferentes atividades biológicas devido à sua complexa composição, representada principalmente por toxinas e enzimas. Estudos sobre suas ações em sistemas fisiológicos são importantes pela sua relevância clínica e pelo potencial para aplicações biotecnológicas. Este trabalho objetivou investigar os efeitos do veneno de Crotalus durissus terrificus (Cdt) no fígado. Ratos Wistar foram inoculados por via intraperioneal com solução salina (controle) ou veneno de Cdt. Depois de 3, 4 our 6 horas avaliou-se: (a) função hepática [alanina aminotranferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST)]; (b) estresse oxidativo [catalase (CAT), glutationa reduzida (GSH), glutationa S-transferase (GST) e lipoperoxidação (LPO)]; e (c) o metabolismo da alanina em fígado perfundido isolado. Ainda, o consumo de oxigênio mitocondrial foi avaliado in vitro. Os níveis plasmáticos de ALT e AST, e a atividade das enzimas GST e CAT apresentaram-se significativamente elevados em ratos inoculados com 300 µg.kg-¹ de veneno de Cdt. Os níveis de LPO mostraram-se extremamente aumentados pelas doses de 100, 200 e 300 µg.kg-¹ do veneno, enquanto GSH não se alterou. O consumo de oxigênio por mitocôndrias intactas reduziu significativamente na presença do veneno. Os fígados em perfusão de ratos inoculados com dose de 1.500 µg.kg-¹ de veneno apresentaram aumento da produção dos metabólitos lactato, piruvato e amônia diante da alanina (2,5 mM) como substrato. Estes resultados demonstram que o veneno crotálico altera significativamente as funções hepáticas. Os mecanimos estão relacionados, pelo menos em parte, com desequilíbrio na homeostase redox e prejuízo à atividade mitocondrial. Conseqüentemente, o veneno pode também modificar o metabolismo hepático.

Snake venoms present different biological activity because of its complex composition, represented mainly by toxins and enzymes. Studies about its action in physiological systems are important because of its clinical relevance and potential for biotechnological applications. This work aimed to investigate the effects of Crotalus durissus terrificus (Cdt) venom in the liver. Wistar rats were inoculated intraperitoneally with saline (control) or Cdt venom. After 3, 4 or 6 hours it was analyzed: a) hepatic function [alanine aminotranferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST)]; b) oxidative stress parameters [catalase (CAT), reduced glutathione (GSH), glutathione S-transferase (GST) and lipoperoxidation (LPO)]; and c) the metabolism of alanine in isolated perfused liver. Also, in vitro mitochondrial oxygen consumption was measured. Plasmatic levels of ALT and AST, and GST and CAT activity presented significant increase in rats inoculated with 300 µg.kg-¹ Cdt venom. LPO levels were extremely increased by 100, 200 and 300 µg.kg-¹ venom doses, while GSH did not change. The oxygen consumption by intact mitochondria decreased in the presence of venom. Perfused livers from rats inoculated with 1,500 µg.kg-¹ venom produced more lactate, pyruvate and ammonia when alanine (2.5 mM) was the substrate for the metabolism. These results demonstrate that Cdt venom can change significantly the liver functions. The mechanisms are related, partly at least, with disequilibrium in the redox homeostasis and impairment of mitochondrial function. Consequently, the venom can also modify the liver metabolism.