https://hdl.handle.net/1884/39633 Wed, 22 Apr 2026 22:05:29 GMT 2026-04-22T22:05:29Z https://hdl.handle.net/1884/101255 Efeitos antineoplásicos de extratos de Pereskia grandifolia (ora-pronobis) em modelos pré-clínicos de câncer de mama Resumo: O câncer de mama é a neoplasia maligna mais incidente entre mulheres em todo o mundo, representando um desafio terapêutico relevante, especialmente nos subtipos hormônio-receptor positivos, nos quais a resistência tumoral e a toxicidade dos quimioterápicos convencionais limitam a eficácia clínica. Nesse contexto, a busca por terapias alternativas mais seguras tem impulsionado o interesse por produtos naturais. Pereskia grandifolia Haw. (Cactaceae), conhecida como ora-pronóbis, apresenta elevado valor nutricional e propriedades biológicas já descritas. Este estudo avaliou a atividade antitumoral e os mecanismos moleculares das frações hidroetanólica (HD) e hexânica (HX) obtidas das folhas de P. grandifolia, integrando análises in vitro em células MCF-7 e in vivo em modelos murinos de carcinoma de Ehrlich (formas sólida e ascítica). A caracterização fitoquímica revelou que a fração HX é predominantemente composta por triterpenos e esteroides, enquanto a fração HD apresentou um perfil químico mais complexo. Em ensaios in vitro, a fração HX exibiu citotoxicidade acentuada em células MCF-7, enquanto a fração HD demonstrou efeito antiproliferativo mais pronunciado, sendo ambas capazes de abolir a sobrevivência clonogênica. Para a validação in vivo, camundongos fêmeas Swiss inoculados com células de Ehrlich foram tratados por via oral durante 21 dias com HD (100 mg·kg¹), HX (50 mg·kg¹) ou veículo. Ambas as frações inibiram significativamente a progressão do carcinoma sólido de Ehrlich (86% para HD e 89% para HX), sem efeito no modelo ascítico, indicando uma resposta dependente do microambiente tumoral. As análises moleculares por RTqPCR demonstraram que ambas as frações induziram morte celular programada por necroptose, evidenciada pela modulação de Ripk1, Ripk3 e Casp8, além da inibição da angiogênese, indicada pela redução da expressão de Vegf. Contudo, os mecanismos antitumorais diferiram entre as frações. A fração HD promoveu uma resposta mais modulada, associada à redução da necrose tumoral, menor infiltração inflamatória e diminuição sistêmica de granulócitos e monócitos circulantes. Em contraste, a fração HX atuou predominantemente como agente citotóxico, induzindo estresse oxidativo, caracterizado pelo aumento de espécies reativas de oxigênio e glutationa reduzida, elevado grau de necrose tumoral, supressão de genes relacionados à inflamação (Nfkb1), hipóxia (Hif1a) e ciclo celular (Ccnd1), além de linfocitose sistêmica. Em conjunto, os resultados demonstram que as frações hidroetanólica e hexânica de P. grandifolia apresentam atividade antitumoral relevante em modelos pré-clínicos de câncer de mama sólido, mediada por mecanismos moleculares distintos e complementares. A convergência na indução de necroptose, na inibição da angiogênese e a ausência de toxicidade sistêmica reforçam o potencial da espécie como fonte de compostos bioativos para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas antineoplásicas adjuvantes ou alternativas; Abstract: Breast cancer is the most prevalent malignant neoplasm among women worldwide, representing a significant therapeutic challenge, particularly in hormone receptor–positive subtypes, in which tumor resistance and the toxicity associated with conventional chemotherapeutic agents limit clinical efficacy. In this context, the search for safer alternative therapies has driven growing interest in natural products. Pereskia grandifolia Haw. (Cactaceae), commonly known as ora-pro-nóbis, exhibits high nutritional value and well-documented biological properties. This study evaluated the antitumor activity and molecular mechanisms of hydroethanolic (HD) and hexane (HX) fractions obtained from P. grandifolia leaves, integrating in vitro analyses using MCF-7 cells and in vivo assays in murine models of Ehrlich carcinoma (solid and ascitic forms). Phytochemical characterization revealed that the HX fraction is predominantly composed of triterpenes and steroids, whereas the HD fraction exhibited a more complex chemical profile. In vitro assays demonstrated that the HX fraction exerted pronounced cytotoxicity in MCF-7 cells, while the HD fraction showed a more marked antiproliferative effect; both fractions were able to abolish clonogenic survival. For in vivo validation, female Swiss mice inoculated with Ehrlich tumor cells were orally treated for 21 days with HD (100 mg·kg¹), HX (50 mg·kg¹), or vehicle. Both fractions significantly inhibited the progression of solid Ehrlich carcinoma (86% for HD and 89% for HX), with no effect observed in the ascitic model, indicating a tumor microenvironment–dependent response. Molecular analyses by RT-qPCR demonstrated that both fractions induced programmed cell death via necroptosis, as evidenced by the modulation of Ripk1, Ripk3, and Casp8, in addition to the inhibition of angiogenesis, indicated by reduced Vegf expression. However, distinct antitumor mechanisms were observed between the fractions. The HD fraction promoted a more modulated response, associated with reduced tumor necrosis, lower inflammatory infiltration, and a systemic decrease in circulating granulocytes and monocytes. In contrast, the HX fraction acted predominantly as a cytotoxic agent, inducing oxidative stress characterized by increased reactive oxygen species and reduced glutathione levels, extensive tumor necrosis, suppression of genes related to inflammation (Nfkb1), hypoxia (Hif1a), and cell cycle regulation (Ccnd1), as well as systemic lymphocytosis. Collectively, these findings demonstrate that the hydroethanolic and hexane fractions of P. grandifolia exhibit relevant antitumor activity in preclinical models of solid breast cancer, mediated by distinct and complementary molecular mechanisms. The convergence in necroptosis induction and angiogenesis inhibition, together with the absence of systemic toxicity, reinforces the potential of this species as a source of bioactive compounds for the development of adjuvant or alternative antineoplastic therapeutic strategies Orientadora: Prof.ª Dr.ª Alexandra Acco; Coorientadora: Dr.ª Maria Carolina Stipp; Banca: Alexandra Acco (Presidente da Banca), Lucimara Mach Cortes Cordeiro e Stellee Marcela Petris Biscaia; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa : Curitiba, 14/01/2026; Inclui referências Thu, 01 Jan 2026 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/1884/101255 2026-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/101016 Efeitos diferenciais do bloqueio dos receptores etb hipotalâmicos na febre, hipolocomoção e liberação de serotonina durante a inflamação sistêmica em ratos machos e fêmeas Resumo: A inflamação sistêmica desencadeia um conjunto de alterações fisiológicas e comportamentais conhecidas como síndrome de doença, incluindo febre e hipolocomoção. Estudos anteriores demonstraram que o lipopolissacarídeo (LPS) de bactérias Gram-negativas induz essas respostas em ambos os sexos, com alterações específicas nos níveis de serotonina (5-HT) hipotalâmica reduzidos em machos e aumentados em fêmeas. Esses efeitos foram revertidos pela administração intracerebroventricular (i.c.v.) de BQ788, um antagonista dos receptores do tipo B (ETB) de endotelinas. Este estudo investigou se o hipotálamo seria um importante sítio de ação das endotelinas para induzir febre, comportamento de doença e alterações nos níveis de 5-HT através da administração intra hipotalâmica (i.h.) de BQ788, considerando ainda possíveis diferenças sexuais. Ratos Wistar de ambos os sexos foram implantados com sensores de temperatura e receberam microinjeções hipotalâmicas de BQ788 ou salina, seguidas de LPS ou veículo por via intraperitoneal. A temperatura corporal foi monitorada por 5 h, a atividade locomotora avaliada por meio do teste de campo aberto, e os níveis hipotalâmicos de 5-HT e seu metabólito ácido 5-hidroxiindolacético (5-HIAA) foram quantificados por High Performance Liquid Chromatography (HPLC). O LPS induziu febre e hipolocomoção em ambos os sexos, com redução dos níveis hipotalâmicos de 5-HT/5-HIAA em machos e aumento em fêmeas. Em machos, a administração i.h. de BQ788 reverteu esses efeitos, sugerindo ação direta no hipotálamo. Em fêmeas, BQ788 i.h. normalizou os níveis de 5-HT, mas não alterou a febre ou a hipolocomoção. No entanto, BQ788 i.c.v. reduziu essas respostas em fêmeas, indicando que os locais de sinalização das endotelinas diferem entre os sexos. Esses achados destacam uma resposta neuroimune dimórfica sexual à inflamação sistêmica, com a sinalização hipotalâmica de endotelinas mediando o comportamento de doença em machos, mas não em fêmeas. Isso reforça a importância de abordagens específicas por sexo na pesquisa neuroinflamatória; Abstract: Systemic inflammation triggers a constellation of physiological and behavioural changes collectively known as sickness syndrome, including fever and hypolocomotion. Previous studies have demonstrated that lipopolysaccharide (LPS) from Gram-negative bacteria induces these responses in both sexes, with sex specific alterations in hypothalamic serotonin (5-HT) levels decreased in males and increased in females. These effects were reversed by intracerebroventricular (i.c.v.) administration of BQ788, an antagonist of endothelin type B (ETB) receptors. This study investigated whether the hypothalamus serves as a critical site of endothelin action in mediating fever, sickness behavior, and changes in 5-HT levels, through intra-hypothalamic (i.h.) administration of BQ788, while also considering potential sex differences. Male and female Wistar rats were implanted with temperature sensors and received hypothalamic microinjections of BQ788 or saline, followed by intraperitoneal injections of LPS or vehicle. Core body temperature was monitored for five hours, locomotor activity was assessed using the open field test, and hypothalamic levels of 5-HT and its metabolite 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA) were quantified via high-performance liquid chromatography (HPLC). Lipopolysaccharide induced fever and hypolocomotion in both sexes, accompanied by decreased hypothalamic 5-HT/5-HIAA levels in males and increased levels in females. In males, i.h. administration of BQ788 reversed these effects, suggesting a direct hypothalamic mechanism. In females, BQ788 normalized 5-HT levels but did not affect fever or hypolocomotion. However, i.c.v. administration of BQ788 attenuated these responses in females, indicating that endothelin signalling sites differ between sexes. These findings underscore a sexually dimorphic neuroimmune response to systemic inflammation, with hypothalamic endothelin signalling mediating sickness behavior in males but not in females. This highlights the critical importance of sex-specific approaches in neuroinflammatory research Orientador: Prof. Dr. Aleksander Roberto Zampronio; Banca: Aleksander Roberto Zampronio (Presidente da Banca), Maria Fernanda de Paula Werner e Felipe Lukacievicz Barbosa; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa : Curitiba, 28/11/2025; Inclui referências Wed, 01 Jan 2025 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/1884/101016 2025-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/100234 Efeitos hepato e nefroprotetores da Petiveria alliacea L. em um modelo animal multi-hit de doença hepática gordurosa associada ao metabolismo Resumo: A doença hepática gordurosa associada ao metabolismo (DHGAM) caracteriza-se pela presença de esteatose hepática, podendo evoluir para cirrose e carcinoma hepatocelular. Afeta até 30% da população adulta e resulta da interação de fatores genéticos e ambientais, incluindo alterações epigenéticas, dietas ricas em lipídios e/ou frutose, obesidade, resistência à insulina, consumo de álcool, tabagismo e disbiose intestinal. Apesar da relevância clínica, não há tratamento específico, e o manejo é focado na etiologia subjacente. A doença constitui importante problema de saúde pública, pela morbimortalidade e os custos econômicos associados, reforçando a necessidade de estratégias terapêuticas eficazes. Estudos etnofarmacológicos surgem como alternativa promissora ao manejo da DHGAM. Destaca-se Petiveria alliacea L. (guiné, tipi ou erva-de-alho), tradicionalmente utilizada como analgésico, hipoglicemiante, diurético e antitérmico. Este estudo avaliou a segurança toxicológica e a eficácia terapêutica da fração etanólica solúvel de P. alliacea em modelo pré-clínico inovador de DHGAM induzida por diabetes e dislipidemia associadas ao álcool. Inicialmente, o extrato foi testado quanto à citotoxicidade in vitro em células HepG2 e à toxicidade oral aguda em ratos Wistar machos, não apresentando efeitos adversos, evidenciando segurança. Posteriormente, durante cinco semanas, estabeleceu-se um modelo multi-hit de DHGAM em ratos Wistar machos (n = 6-7), combinando diabetes (induzido pela administração de estreptozotocina 60 mg/kg, i.p.), dislipidemia (promovida pelo consumo de ração enriquecida com 0,5% de colesterol) e consumo de álcool (5%, na água de beber), sendo este último um fator agravante da doença. Nas duas últimas semanas, os animais receberam diariamente por gavagem veículo (água filtrada, grupo controle negativo, C-), P. alliacea (30, 100 ou 300 mg/kg) ou a combinação de sinvastatina e insulina [2,5 mg/kg e 6 UI (s.c.), respectivamente, grupo controle positivo, C+], enquanto ratos não expostos aos fatores de risco constituíram o grupo basal. Foram avaliados parâmetros bioquímicos séricos, cortes histológicos hepáticos e renais, e marcadores de estresse oxidativo hepático. Os animais do grupo C- apresentaram disfunção metabólica e hepática, com aumento da glicemia, de lipídios plasmáticos e hepáticos, aspartato e alanina aminotransferase, bem como alterações histopatológicas hepáticas e renais. O tratamento com o extrato de P. alliacea reduziu parcialmente a hiperglicemia e, de forma dose-dependente, as concentrações plasmáticas e hepáticas de colesterol e triglicerídeos, além de normalizar as enzimas hepáticas. A administração da dose de 300 mg/kg restaurou integralmente as defesas antioxidantes hepáticas e reduziu a peroxidação lipídica. A disfunção renal observada no grupo C- (aumento do peso relativo dos rins, elevação de ureia e creatinina e lesões histopatológicas) foi revertida nos animais tratados com 300 mg/kg do extrato, enquanto o tratamento com doses menores promoveu melhorias intermediárias. Por sua vez, a combinação de sinvastatina e insulina normalizou o perfil lipídico e reduziu a glicemia, mas não restaurou completamente as enzimas hepáticas nem os marcadores de estresse oxidativo e dano renal. Histologicamente, os animais do grupo C+ exibiram alterações hepáticas mínimas, sem evidência de esteatose e alterações renais intermediárias. Esses achados indicam que P. alliacea possui um perfil de segurança favorável e ação multialvo, evidenciando potencial como agente hepato e nefroprotetor no manejo da DHGAM; Abstract: Metabolism-associated fatty liver disease (MASLD) is characterized by hepatic steatosis and may progress to cirrhosis and hepatocellular carcinoma. It affects up to 30% of the adult population and results from a complex interaction between genetic and environmental factors, including epigenetic modifications, diets rich in lipids and/or fructose, obesity, insulin resistance, alcohol consumption, smoking, and intestinal dysbiosis. Despite its clinical relevance, there is no specific treatment, and current management focuses on addressing the underlying causes. MASLD represents a major public health concern due to its high morbidity, mortality, and economic burden, underscoring the urgent need for effective therapeutic strategies. Ethnopharmacological studies have emerged as promising alternatives for MASLD management. Petiveria alliacea L. (commonly known as guiné, tipi, or garlic weed) stands out for its traditional use as an analgesic, hypoglycemic, diuretic, and antipyretic agent. This study evaluated the toxicological safety and therapeutic efficacy of the ethanol-soluble fraction of P. alliacea in an innovative preclinical model of MASLD induced by diabetes and dyslipidemia associated with alcohol intake. Initially, the extract was tested for in vitro cytotoxicity in HepG2 cells and for acute oral toxicity in male Wistar rats. No adverse effects were observed, demonstrating its safety. Subsequently, a multi-hit MASLD model was established over five weeks in male Wistar rats (n = 6–7), combining diabetes (induced by streptozotocin, 60 mg/kg, i.p.), dyslipidemia (via a 0.5% cholesterol-enriched diet), and alcohol consumption (5% in drinking water), with alcohol acting as an aggravating factor. During the final two weeks, animals received daily oral administration (gavage) of either vehicle (filtered water; negative control, C–), P. alliacea extract (30, 100, or 300 mg/kg), or a combination of simvastatin and insulin [2.5 mg/kg and 6 IU (s.c.), respectively; positive control, C+]. Rats not exposed to risk factors comprised the basal group. Serum biochemical parameters, hepatic and renal histology, and hepatic oxidative stress markers were evaluated. Rats in the C– group exhibited metabolic and hepatic dysfunction, evidenced by elevated blood glucose, plasma and hepatic lipids, aspartate and alanine aminotransferases, and histopathological alterations in the liver and kidneys. Treatment with P. alliacea extract partially reduced hyperglycemia and dose-dependently decreased plasma and hepatic cholesterol and triglycerides, while normalizing liver enzyme levels. The 300 mg/kg dose fully restored hepatic antioxidant defenses and reduced lipid peroxidation. Renal dysfunction observed in the C– group—including increased relative kidney weight, elevated urea and creatinine levels, and histopathological damage—was reversed in animals treated with 300 mg/kg of the extract, while lower doses produced intermediate improvements. In contrast, treatment with simvastatin and insulin normalized the lipid profile and reduced glycemia but failed to fully restore hepatic enzyme activity or oxidative stress and renal damage markers. Histologically, C+ animals showed minimal hepatic alterations without steatosis and moderate renal changes. These findings demonstrate that P. alliacea exhibits a favorable safety profile and multi-target action, highlighting its potential as a hepato and nephroprotective agent in the management of MASLD Orientadora: Profa. Dra. Francislaine Aparecida dos Reis Lívero; Banca: Francislaine Aparecida dos Reis Lívero (Presidente da Banca), Alexandra Acco, Paulo Vítor Farago; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa : Curitiba, 27/10/2025; Inclui referências Wed, 01 Jan 2025 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/1884/100234 2025-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/58097 Antidepressant effect of pramipexole in a dexamethasone induced depressive-like behavior model Resumo: A depressão é um distúrbio psiquiátrico comum caracterizado por diversos sintomas debilitantes como a desesperança e a anedonia. Apesar de a fisiopatologia do distúrbio ainda não estar completamente elucidada, evidências demonstram a associação entre a depressão e disfunções do sistema dopaminérgico mesolimbico. Devido a isso, diversos estudos atuais têm buscado em fármacos que atuem nesse sistema novas alternativas terapêuticas para o tratamento da depressão. Nessa linha, o pramipexol - um agonista dos receptores dopaminérgicos D2/D3 - têm sido um foco de estudos pois, além da sua atividade direta nos receptores dopaminérgicos, esse medicamento também apresenta potencial neuroprotetor, anti-inflamatório e também de promover a liberação de fatores tróficos. Assim, com o objetivo de avaliar o efeito do pramipexol, os animais foram induzidos ao comportamento tipo-depressivo através do tratamento intraperitoneal com dexametasona (1 mg/kg) ou com o seu veículo por 21 dias e, em seguida, submetidas ao tratamento com o pramipexol no 21° e 22° dia. Nossos dados demonstraram que o modelo da dexametasona promoveu uma redução no peso e na locomoção dos animais. Além disso, também foi encontrada uma diferença estatisticamente significante entre os grupos dexametasona e veículo na preferência pela sacarose no 21° dia de tratamento e no tempo de imobilidade do teste de natação forçada, indicando um comportamento tipo-depressivo. Por sua vez, a administração repetida de pramipexol (1 mg/kg) foi capaz de reverter o comportamento tipo-depressivo induzido pela dexametasona no teste denatação forçada indicando um potencial para a droga no tratamento de distúrbios depressivos associados a altos níveis de glicocorticoides. Palavras-chave: depressão maior; teste da natação forçada, agonista dopaminérgico; teste de preferência pela sacarose; antidepressivo.; Abstract: Major depressive disorder is a common psychiatric disease characterized by diverse debilitating symptoms that include hopelessness and anhedonia. Although the pathophysiology of depression has not been fully elucidated yet, it has been shown that there is a link between depression and an altered mesolimbic DA system function. Because of that, several current studies have investigated drugs that act in that system trying to find new therapeutic alternatives for depression treatment. In line with that, pramipexole - a D2/D3 dopaminergic receptors agonist - has received the attention of reserchers since it not only has a direct dopaminergic activity but also neuroprotective and antiinflamatory properties and the ability to promote the release of neurotrophic factors. Thus, with the goal of evaluating the effect of pramipexole, the animals were intraperitoneally treated for 21 days with dexamethasone (1 mg/kg) or its vehicle for depressive-like behavior induction and, after that, on day 21 and 22 with PPX. Our study showed that DEX treatment promoted a weight and locomotion reduction in treated animals. Also, there was a statistically difference between dexamethasone and vehicle groups only on day 21 in the sucrose preference test and in the immobility time in the forced swim test, indicating a depressive-like behavior.This state was reversed in the FST by the repeated PPX administration (1 mg/kg) indicating the drug potential in the treatment of depressive disorders associated with high glucocorticoid levels. Key-words: major depressive disorder, forced swim test, dopaminergic agonist, sucrose preference test, antidepressant. Orientadora: Profª. Drª. Maria Aparecida Barbato Frazão Vital; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa : Curitiba, 17/08/2018; Inclui referências Mon, 01 Jan 2018 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/1884/58097 2018-01-01T00:00:00Z