https://hdl.handle.net/1884/39621 Sun, 26 Apr 2026 17:53:52 GMT 2026-04-26T17:53:52Z https://hdl.handle.net/1884/48457 Oxidação seletiva de carragenanas utilizando o reagente tempo e o ácido tricloroisocianúrico como co-oxidante Resumo: As carragenanas são polissacarídeos extraídos da matriz extracelular de algas vermelhas, pertencentes à família das galactanas sulfatadas, muito utilizadas na indústria alimentícia como espessante, gelificante, estabilizadora de viscosidade e textura. A modificação química de polissacarídeos pode alterar características físico-químicas agregando-lhes valor econômico. Dentre essas modificações, a oxidação seletiva é de grande interesse porque gera ácidos poliurônicos com ampla aplicação na indústria como, por exemplo, na geleificação, complexação, antifloculação, adesão, bem como uma série de atividades biológicas, como a atividade anticoagulante. Dessa forma, este trabalho teve como objetivo principal oxidar seletivamente as carragenanas kappa-, iota-, theta-, lambda- e o híbrido iota/nu em diferentes proporções utilizando o catalisador N-oxil-2,2,6,6-tetrametilpiperidina (TEMPO) e o co-oxidante ácido tricloroisocianúrico (TCCA) em solução aquosa tamponada em pH 9,6 para produzir uma carboxila no carbono C6 da unidade monossacarídica (?3)-ß-D-galactopiranose. Inicialmente, foi realizado um estudo da reação de oxidação seletiva utilizando a kappa-carragenana como substrato e variando os equivalentes de TCCA (0,2; 0,5; 1; 2 e 3). As reações foram analisadas através de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) 1H indicando a entrada do grupo carboxila de acordo com o aumento do número de equivalentes. Assim, foram realizadas oxidações com 3 equivalentes de TCCA, por 15 horas ou por 2 horas. Foram obtidas oito frações a partir das carragenanas com diferentes graus de oxidação: kOT, i/nOT, iOP, iOT, tOP, tOT, lOP e lOT. Estas frações foram caracterizadas utilizando espectroscopia de infravermelho (FTIR) e RMN (1H, 13C e HSQC). Com os dados de literatura e mapas de correlação heteronucleares HSQC foi possível realizar o assinalamento de RMN das díades produzidas após a oxidação seletiva C6. A massa molecular relativa das carragenanas nativas e oxidadas foram determinadas utilizando três curvas padrões de calibração. Análises cromatográficas em HPSEC-MALLS/IR foram utilizadas para a determinação de Mw. As análises revelaram diminuições em Mw após as oxidações e um aumento de solubilidade para a iota- e theta-carragenanas oxidadas, porém com maiores graus de oxidação observa-se diminuição das taxas de recuperação para as frações kOT, i/nOT, iOT, lOP e lOT sugerindo formação de agregados. As amostras nativas e oxidadas da theta-carragenana (tN, tOP e tOT) foram testadas por aPTT in vitro e apresentaram atividade anticoagulante dose-dependente em potências diferentes. Os oxidados apresentaram uma potência maior em relação ao biopolímero nativo, sendo a fração com oxidação parcial (tOP) (80% de oxidação) a que apresentou maior efeito anticoagulante. Palavras-chave: Polissacarídeos, galactanas sulfatadas, carragenanas, oxidação seletiva.; Abstract: Carrageenans are polysaccharides extracted from extracellular matrix of red seaweeds that belong to the family of sulfated galactans. They are widely used in food industry as thickening, gelling and stabilizing agents. Chemical modifications of polysaccharides have been reported in order to improve physicochemical properties. The selective oxidation of sulfated polysaccharides can produce polyuronic acids derivatives with defined sulfation pattern and potential biological and technological application. Thus, the aim of this work is the selective oxidation of the kappa-, iota-, iota/nu, theta-, and lambda-carrageenan using 2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxyl (TEMPO) and trichloroisocyanuric acid (TCCA) in a carbonate buffer (pH 9.6). Initially, we performed a study of selective oxidation reaction using the kappa-carrageenan as substrate and increased amounts of TCCA (0.2, 0.5, 1, 2 and 3 equivalents). The carboxyl group in the polysaccharide backbone was detected using 1H NMR. It was observed that the increase of TCCA amount gave higher oxidation rate in the carrageenan backbone. The preparative reactions were performed using 3 equivalents of TCCA for 2 or 15 hours to give the following fractions with different degree of oxidation: kOT (87%) (from kappa); i/nOT (>95%) (from iota/nu-), iOP (42%) and iOT (>95%) (from iota-); tOP (80%) and tOT (>95%) (from theta-) and lOP (83%) and lOT (>95%) (from lambda-). All the fractions were characterized by infrared spectroscopy (FTIR), 1H,13C and HSQC NMR. The anticoagulant activity of native and oxidized fractions of theta-carrageenan (tN, tOP and tOT) were determined by aPTT. The oxidized fractions showed better activity than native polysaccharide, indicating that selective oxidation increased the anticoagulant property. Keywords: Polysaccharides, sulfated galactans, carrageenans, selective oxidation, TEMPO, TCCA. Orientador : Prof. Dr. Diogo R. Bazan Ducatti; Coorientadores : Prof. Dr. Miguel Daniel Noseda, Prof. Dr. Alan Guilherme Gonçalves; Sem cópia digital; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 20/03/2015; Inclui referências : f. 120-134 Thu, 01 Jan 2015 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/1884/48457 2015-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/41269 Armazenamento de sementes, germinação in vitro e micropropagação de Hadrolaelia grandis (Lindley & Paxton) Chiron & V. P. Castro (Orchidaceae) Resumo: Hadrolaelia grandis está ameaçada de extinção e sua população está em declínio devido às coletas para fins ornamentais e destruição do habitat. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo de conservação de sementes, germinação in vitro e de propagação de H. grandis, em larga escala, utilizando a técnica "thin cell layer" (TCL) a partir de protocormos. O teste do tetrazólio (TZ) e a germinação in vitro foram realizados com sementes armazenadas a - 20 °C e - 80 °C, por 24, 30 e 36 meses. Os meios de cultura Woody Plant Medium (WPM), Murashige & Skoog (MS), Vacin & Went (VW) e Knudson C (KC) foram testados para a germinação in vitro e desenvolvimento dos protocormos. Para a regeneração de estruturas semelhantes à protocormos ("protocorm like bodies - PLBs") utilizando a técnica TCL foram realizadas secções transversais (TCLt) e secções longitudinais (TCLl) em protocormos com 60 e 90 dias de idade. Os explantes foram cultivados em meio Woody Plant Medium (WPM), acrescido de 6-benzilaminopurina (BAP): 1,1; 2,2; 4,4; 8,8 e 17,6 ?M, além do controle, sem regulador vegetal. O alongamento e enraizamento dos PLBs foi induzido em meio contendo carvão ativado (0; 1; 2 e 3 g.L-1) ou ácido indol-3-butírico (AIB) (0,0; 1,25; 2,5; 5,0 e 10,0 M). As mudas foram transplantadas em bandejas contendo: pó de coco, casca de pínus com húmus de minhoca e vermiculita. Os resultados indicaram que a temperatura de - 80 °C foi mais eficiente para o armazenamento de sementes, pois após 36 meses, a porcentagem de sementes viáveis foi mais elevada (81,86%), quando comparada a de - 20 °C (64,24%) pelo teste TZ. As sementes cultivadas no meio WPM apresentaram melhores respostas de germinação (94,71%, índice de velocidade de germinação de 25,33) e de desenvolvimento das plântulas, após 36 meses de armazenamento em temperatura de - 80 °C. A técnica TCL foi eficiente para a propagação in vitro de H. grandis, sendo que a idade e concentração de BAP influenciaram as respostas de regeneração de PLBs. Secções transversais de protocormos de 60 dias, cultivados em meio WPM, acrescido de 2,2 M de BAP apresentaram melhores respostas para a técnica TCLt (70,8% de regeneração de PLBs e 30,1 PLBs por explante). Para a técnica TCLl foi recomendado o uso de secções de protocormos de 90 dias de idade, cultivadas em meio contendo 8,8 M de BAP (83,3% de regeneração de PLBs e 34,4 PLBs por explante). O carvão ativado foi eficiente no alongamento e enraizamento, sendo recomendada a concentração de 1 g L-1. As mudas foram aclimatizadas com sucesso em casa de vegetação (98,21% de sobrevivência) utilizando vermiculita como substrato. O protocolo descrito nesse estudo foi eficiente para conservação de sementes, germinação in vitro e micropropagação utilizando a técnica TCL para a produção de mudas de H. grandis. Palavras chave: banco de sementes, viabilidade de sementes, "thin cell layer", regeneração de PLBs, 6-benzilaminopurina (BAP); Abstract: Hadrolaelia grandis is an endangered species and its population is declining due irregular collection for ornamental purposes and habitat destruction. The objective of this study was to establish a seed conservation protocol, in vitro germination and large-scale propagation of H. grandis seedlings using the "thin cell layer" (TCL) technique from protocorms. The tetrazolium test (TZ), and in vitro germination were performed with seeds stored at - 20 ° C and - 80 ° C for 24, 30 and 36 months. The culture media Woody Plant Medium (WPM), Murashige and Skoog (MS) Vacin & Went (VW) and Knudson C (KC) were tested for in vitro germination and protocorm development. For the regeneration of the protocorm-like bodies (PLBs) using TCL technique, transversal sections were performed (tTCL) and longitudinal sections (lTCL) in protocorm from 60 and 90 days of age. The explants were cultured in Woody Plant Medium (WPM), supplemented with 6-benzylaminopurine (BAP): 1.1, 2.2, 4.4, 8.8 and 17.6 ?M, and the control without plant growth regulation. The elongation and rooting of PLBs were induced in medium containing activated charcoal (0, 1, 2 and 3 g L-1) or indole-3-butyric acid (IBA) (0.0, 1.25, 2.5, 5.0 and 10.0 ?M). The seedlings were transplanted into trays containing: coco powder, pine bark with humus worm and vermiculite. The results indicated that the temperature of - 80 °C was more efficient for storing seeds, because after 36 months, the percentage of viable seeds was higher (81.86%), when compared to - 20 °C (64.24%) by TZ test. The seeds grown in the WPM medium showed better germination responses (94.71%, 25.33 germination speed index) and seedling development, after 36 months of storage at a temperature of - 80 °C. The TCL technique was efficient for the in vitro propagation of H. grandis, and the age and concentration of BAP influenced PLBs regeneration responses. Transversal sections from protocorm of 60 days old, cultured in WPM supplemented with 2.2 M BAP responded better to tTCL technique (70.8% of PLBs PLBs regeneration and 30.1 per explant). For lTCL technique has been recommended to use sections from protocorm 90 days old, grown in medium containing 8.8 M of BAP (83.3% of PLBs regeneration PLBs and 34.4 per explant. The activated charcoal was effective for elongation and rooting of PLBs, and we recommended the concentration of 1 g L-1. The seedlings were successfully acclimatized in greenhouse (98.21% survival) using vermiculite as substrate. The protocol described in this study was efficient for conservation, seed germination and in vitro micropropagation using TCL technique for mass production of H. grandis seedlings. Keywords: seed banks, seed viability, thin cell layer, PLBs regeneration, 6-benzylaminopurine (BAP) Orientadora : Profª. Drª. Luciana Lopes Fortes Ribas; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Botânica. Defesa: Curitiba, 24/08/2015; Inclui referências : f. 21-25-47-50-78-81 Thu, 01 Jan 2015 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/1884/41269 2015-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/60215 Mecanismos de regulaçao dos níveis da l-lactato desidrogenase piridino nucledtídeo independente de Dactylium dendroides Thomaz, Vanete Resumo: A sintese de uma L-lactato desidrogenase piridino nucleo tideo independente foi induzida em celulas de Dactylium dendroides em crescimento e em repouso por lactato de sodio. Fontes de carbono tal como etanol, glicerol e piruvato sao ineficazes como indutor. Experimentos de inducao realizados na presenca de cicloheximida indicam que a inducao da sintese da LDHPNI e dependente da sintese proteica. A adicao de glucose a uma cultura de Dactylium dendroides em repouso, cuja sintese da enzima fora previamente efetivada na presenca de lactato, provoca uma brusca queda da atividade especifica. A inativacao da LDHPNI estimulada pela adicao de glucose ao cultivo e evitada e ou revertida pela presenca de cicloheximida ou de AMPc. Os resultados sugerem que esta enzima e .inativada por um fator proteico inativante que e sintetizado na presenca de glucose. Reproduçao eletrostatica; Resumo em portugues; Orientador: Prof. Shigehiro Funayama; Dissertaçao (mestrado) -Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica); Inclui referências: p. 49-56 Thu, 01 Jan 1981 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/1884/60215 1981-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/47330 Interações com plantas e biologia comparada do percevejo Thyanta perditor (Fabricius, 1794) (Heteroptera: Pentatomidae) no norte do Rio Grande do Sul. Tomacheski, Jefferson Fogaça Resumo: Thyanta perditor (F.) (Heteroptera: Pentatomidae) é um percevejo Neotropical, com ampla distribuição em vários países da América do Sul. É comumente encontrado em campos cultivados, mas há pouca informação disponível sobre sua bioecologia. Deste modo, estudos sobre a sua flutuação populacional, preferência e biologia de ninfas e adultos em plantas cultivadas e não-cultivadas foram realizados durante o ano de 2016. Foi avaliada semanalmente a presença do percevejo em campos cultivados, áreas em pousio e vegetação nativa. Foi observado que T. perditor foi encontrado em maior quantidade nos meses quentes, com o pico populacional no mês de março, coincidindo com a maturação da cultura da soja, Glycine max (L.) Merrill. Os testes da preferência por plantas cultivadas [soja, milho (Zea mays L.), trigo (Triticum aestivum L.) e cevada (Hordeum vulgare L.)] e não-cultivadas [picão-preto (Bidens pilosa L.), buva (Conyza bonariensis L.), capim-papuã (Brachiaria plantaginea Link) e leiteiro (Euphorbia heterophylla L.)], utilizando plântulas em gaiolas de criação tipo Bugdorm I, indicaram que os percevejos demonstraram preferência por plântulas de soja e milho, e também por leiteiro, picão-preto e buva. Ninfas do percevejo conseguiram completar seu ciclo utilizando como alimento sementes de picão-preto (maduras e imaturas) e espigas de trigo e cevada (imaturas); nenhuma ninfa passou do segundo instar quando alimentadas com plântulas de quaisquer das espécies testadas. Os adultos alimentados com planta de picão-preto fresca, semente de milho (imatura) e espiga de trigo (imatura) apresentaram sobrevivência média/alta (variação de 50% à 90%), os melhores desempenhos reprodutivos (100% das fêmeas ovipositaram) e ganho de peso; os percevejos alimentados com espiga de cevada (imatura), vagem de feijão (Phaseolus vulgaris L.) (imatura), semente de picão-preto (madura) e vagem de soja (imatura) apresentaram sobrevivência variável (de 20% à 100%); o desempenho reprodutivo variou de baixo (30%) a alto (80%) e o ganho de peso variou de +26% no primeiro à +39% no último alimento. Em inflorescência de picão-preto, semente de picão-preto (imatura) e fruto de leiteiro (imaturo), os adultos apresentaram baixa sobrevivência (? 10%), desempenho reprodutivo baixo (10%) ou nulo (0%) e perda de peso. Palavras-chave: Percevejo-faixa-vermelha. Plantas hospedeiras. Preferência. Plantas cultivadas. Plantas não-cultivadas.; Abstract: Thyanta perditor (F.) (Heteroptera: Pentatomidae) is a Neotropical stink bug, widely distributed in several countries of South America. It is commonly found in cultivated fields, but there is relatively few information available on its bioecology. Therefore, studies on its population dynamics, plant preference and biology of nymphs and adults on cultivated and on non-cultivated plants were conducted during the year of 2016. The presence of the stink bug was weekly evaluated on cultivated fields, in areas with crop residues and on the native vegetation. It was observed that T. perditor was greatly abundant in the warmer months, with the peak in population observed during March, at the time of soybean [Glycine max (L.) Merrill] maturation. Preference tests for cultivated [soybean, maize (Zea mays L.), wheat (Triticum aestivum L.), and barley (Hordeum vulgare L.)] and for non-cultivated plants [black jack (Bidens pilosa L.), flax-leaf fleabane (Conyza bonariensis L.), signal grass (Brachiaria plantaginea Link) and milkweed (Euphorbia heterophylla L.)], using seedlings in cages type Bugdorm I, indicated that the stink bugs demonstrated preference for soybean and maize, and also for milkweed, black jack, and flax-leaf fleabane seedlings. Nymphs completed development on black jack seeds (mature and immature), and on wheat and barley seedheads (immature); no nymphs passed the second instar when fed on seedlings of any plants tested. Adults fed with fresh black jack plants, maize seed (immature) and wheat seedhead (immature) showed medium/high survivorship (range 50% to 90%), the best reproductive performance (100% of females ovipositing) and body weight gain; stink bugs fed on barley seedhead (immature), green bean (Phaseolus vulgaris L.) pods (immature), black jack seed (mature) and soybean pod (immature) showed variable survivorship (20% to 100%); reproductive performance varied from low (30% of females ovipositing) to high (80%), and weight gain varied from +26% on the first to +39% in the latter food. Black jack inflorescence and seed (mature), and milkweed fruit (immature) yielded low survivorship of adults (? 10%), low (10%) or null (0%) reproductive performance, and lost of body weight. Key words: Red-shouldered stink bug. Host plants. Preference. Cultivated plants. Non-cultivated plants. Orientador : Dr. Antônio Ricardo Panizzi; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (Entomologia). Defesa: Curitiba, 09/03/2017; Inclui referências; Área de concentração : Entomologia Sun, 01 Jan 2017 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/1884/47330 2017-01-01T00:00:00Z