https://hdl.handle.net/1884/39619 coleção antiga 2026-04-23T10:07:33Z https://hdl.handle.net/1884/48738 A comunidade de abelhas silvestres (Hymenoptera, Apoidea) da Ilha das Cobras (Paraná, Brasil) : aspectos ecológicos e biogeográficos Resumo: A comunidade de abelhas silvestres de uma pequena ilha do litoral paranaense (Ilha das Cobras/26,5 ha), sul do Brasil, foi estudada com relação à composição faunística, abundância relativa, diversidade e visitação às flores. Os dados obtidos foram comparados aos de duas outras áreas da mesma região: Ilha do Mel (2762 ha), uma outra ilha, 104 vezes maior que a primeira e Alexandra, no continente. Tais comparações foram possíveis graças ao emprego de uma mesma técnica de coleta em todas as amostras ( S a k a g a m i , L a r o c a & M o u r e , 1967). Entre as três áreas amostradas, foram capturados 5876 indivíduos pertencentes a 164 espécies de abelhas. A amostra do continente apresentou 122 espécies, das quais 56% foram exclusivas deste local. Já as amostras das ilhas, apresentaram uma grande redução no número total de espécies coletadas, respectivamente 75 na Ilha do Mel (28% exclusivas) e 57 na Ilha das Cobras (21% exclusivas). Tal resultado evidencia que, nas ilhas, foram extintas muitas das espécies de abelhas encontradas atualmente no continente. A extinção da maioria das espécies de Meliponinae nas ilhas, provavelmente contribuiu para que, nestas, houvesse um crescimento significativo nas populações de várias espécies de Haüctidae, entre as quais Dialictus opacus que, na Ilha do Mel, representou 42,5% da amostra e na Ilha das Cobras 34,1%. Estes dados podem indicar que tais grupos são competidores potenciais. Cerca de 95% das abelhas foram capturadas visitando flores de 150 espécies de plantas. Compositae foi a família mais visitada entre as três amostras como um todo (cerca de 20% das visitas). Outras famílias muito visitadas foram Rubiaceae (a mais visitada na Ilha do Mel), Leguminosae, Melastomataceae, Verbenaceae e Malvaceae (a mais visitada na Ilha das Cobras). A análise fenológica dos dados da Ilha das Cobras mostra uma flutuação de atividades similar aos padrões frequentemente observados em comunidades tropicais de abelhas silvestres. Assim, a maioria das quedas bruscas de atividade parece estar mais correlacionada com condições de tempo adversas (chuva) reinantes durante as coletas do que propriamente com tendências sazonais. A intensidade da atividade de vôo ao longo de cada dia parece estar relacionada com a temperatura e a disponibilidade de recursos florais. São discutidos também outros aspectos relacionados com a biogeografia de ilhas, como isolamento, colonização, migração, diversidade, similaridade, compensação de densidade, competição e problemas de genética de populações.; Abstract: Relative abundance, diversity and flower visits of wild bees at a small island in littoral of Paraná state - South Brazil (Ilha das Cobras/26.5 ha) were studied. The informations were compared with data from two other sites in the same region: Ilha do Mel (island with 2762 ha) and Alexandra (continent). The standardized sampling techniques (S a k a g a m i , L a r o c a & M o u r e , 1967) allow discussions about some biogeographic aspects of the wild bees communities in insular environments. At the three sites 5876 individuals belonging to 164 species were collected. The continental sample was the richest in species (122), most of them (56%) exclusive from this place. In both islands the total number of bee species is smaller: 75 in Ilha do Mel (28% exclusive) and 57 in Ilha das Cobras (21% exclusive). In the islands, species richness of Halictidae - mainly Dialictus (Chloralictus) opacus (Moure) - probably is related to extinction of the most Meliponinae species, which indicates potential competition between these groups. About 95% of bees were collected visiting 150 flower species. Compositae was the most visited family at the three areas, followed by Rubiaceae, Leguminosae, Melastomataceae, Verbenaceae and Malvaceae. The phenologic analysis of Ilha das Cobras data shows a fluctuation of activity similar to the patterns observed in tropical bee communities. The abrupt decreases in activity seem to be more correlated with the adverse wheather conditions (rain) than truely seasonal tendencies. The flight activity along each collecting day seems to be correlated with temperature and the disponibility of floral resources. Aspects of island biogeography such as immigration, diversity, density compensation, competition and population genetic problems are also discussed. Orientador: Sebastião Laroca; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (Entomologia) 1993-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/48457 Oxidação seletiva de carragenanas utilizando o reagente tempo e o ácido tricloroisocianúrico como co-oxidante Resumo: As carragenanas são polissacarídeos extraídos da matriz extracelular de algas vermelhas, pertencentes à família das galactanas sulfatadas, muito utilizadas na indústria alimentícia como espessante, gelificante, estabilizadora de viscosidade e textura. A modificação química de polissacarídeos pode alterar características físico-químicas agregando-lhes valor econômico. Dentre essas modificações, a oxidação seletiva é de grande interesse porque gera ácidos poliurônicos com ampla aplicação na indústria como, por exemplo, na geleificação, complexação, antifloculação, adesão, bem como uma série de atividades biológicas, como a atividade anticoagulante. Dessa forma, este trabalho teve como objetivo principal oxidar seletivamente as carragenanas kappa-, iota-, theta-, lambda- e o híbrido iota/nu em diferentes proporções utilizando o catalisador N-oxil-2,2,6,6-tetrametilpiperidina (TEMPO) e o co-oxidante ácido tricloroisocianúrico (TCCA) em solução aquosa tamponada em pH 9,6 para produzir uma carboxila no carbono C6 da unidade monossacarídica (?3)-ß-D-galactopiranose. Inicialmente, foi realizado um estudo da reação de oxidação seletiva utilizando a kappa-carragenana como substrato e variando os equivalentes de TCCA (0,2; 0,5; 1; 2 e 3). As reações foram analisadas através de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) 1H indicando a entrada do grupo carboxila de acordo com o aumento do número de equivalentes. Assim, foram realizadas oxidações com 3 equivalentes de TCCA, por 15 horas ou por 2 horas. Foram obtidas oito frações a partir das carragenanas com diferentes graus de oxidação: kOT, i/nOT, iOP, iOT, tOP, tOT, lOP e lOT. Estas frações foram caracterizadas utilizando espectroscopia de infravermelho (FTIR) e RMN (1H, 13C e HSQC). Com os dados de literatura e mapas de correlação heteronucleares HSQC foi possível realizar o assinalamento de RMN das díades produzidas após a oxidação seletiva C6. A massa molecular relativa das carragenanas nativas e oxidadas foram determinadas utilizando três curvas padrões de calibração. Análises cromatográficas em HPSEC-MALLS/IR foram utilizadas para a determinação de Mw. As análises revelaram diminuições em Mw após as oxidações e um aumento de solubilidade para a iota- e theta-carragenanas oxidadas, porém com maiores graus de oxidação observa-se diminuição das taxas de recuperação para as frações kOT, i/nOT, iOT, lOP e lOT sugerindo formação de agregados. As amostras nativas e oxidadas da theta-carragenana (tN, tOP e tOT) foram testadas por aPTT in vitro e apresentaram atividade anticoagulante dose-dependente em potências diferentes. Os oxidados apresentaram uma potência maior em relação ao biopolímero nativo, sendo a fração com oxidação parcial (tOP) (80% de oxidação) a que apresentou maior efeito anticoagulante. Palavras-chave: Polissacarídeos, galactanas sulfatadas, carragenanas, oxidação seletiva.; Abstract: Carrageenans are polysaccharides extracted from extracellular matrix of red seaweeds that belong to the family of sulfated galactans. They are widely used in food industry as thickening, gelling and stabilizing agents. Chemical modifications of polysaccharides have been reported in order to improve physicochemical properties. The selective oxidation of sulfated polysaccharides can produce polyuronic acids derivatives with defined sulfation pattern and potential biological and technological application. Thus, the aim of this work is the selective oxidation of the kappa-, iota-, iota/nu, theta-, and lambda-carrageenan using 2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxyl (TEMPO) and trichloroisocyanuric acid (TCCA) in a carbonate buffer (pH 9.6). Initially, we performed a study of selective oxidation reaction using the kappa-carrageenan as substrate and increased amounts of TCCA (0.2, 0.5, 1, 2 and 3 equivalents). The carboxyl group in the polysaccharide backbone was detected using 1H NMR. It was observed that the increase of TCCA amount gave higher oxidation rate in the carrageenan backbone. The preparative reactions were performed using 3 equivalents of TCCA for 2 or 15 hours to give the following fractions with different degree of oxidation: kOT (87%) (from kappa); i/nOT (>95%) (from iota/nu-), iOP (42%) and iOT (>95%) (from iota-); tOP (80%) and tOT (>95%) (from theta-) and lOP (83%) and lOT (>95%) (from lambda-). All the fractions were characterized by infrared spectroscopy (FTIR), 1H,13C and HSQC NMR. The anticoagulant activity of native and oxidized fractions of theta-carrageenan (tN, tOP and tOT) were determined by aPTT. The oxidized fractions showed better activity than native polysaccharide, indicating that selective oxidation increased the anticoagulant property. Keywords: Polysaccharides, sulfated galactans, carrageenans, selective oxidation, TEMPO, TCCA. Orientador : Prof. Dr. Diogo R. Bazan Ducatti; Coorientadores : Prof. Dr. Miguel Daniel Noseda, Prof. Dr. Alan Guilherme Gonçalves; Sem cópia digital; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 20/03/2015; Inclui referências : f. 120-134 2015-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/41269 Armazenamento de sementes, germinação in vitro e micropropagação de Hadrolaelia grandis (Lindley & Paxton) Chiron & V. P. Castro (Orchidaceae) Resumo: Hadrolaelia grandis está ameaçada de extinção e sua população está em declínio devido às coletas para fins ornamentais e destruição do habitat. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo de conservação de sementes, germinação in vitro e de propagação de H. grandis, em larga escala, utilizando a técnica "thin cell layer" (TCL) a partir de protocormos. O teste do tetrazólio (TZ) e a germinação in vitro foram realizados com sementes armazenadas a - 20 °C e - 80 °C, por 24, 30 e 36 meses. Os meios de cultura Woody Plant Medium (WPM), Murashige & Skoog (MS), Vacin & Went (VW) e Knudson C (KC) foram testados para a germinação in vitro e desenvolvimento dos protocormos. Para a regeneração de estruturas semelhantes à protocormos ("protocorm like bodies - PLBs") utilizando a técnica TCL foram realizadas secções transversais (TCLt) e secções longitudinais (TCLl) em protocormos com 60 e 90 dias de idade. Os explantes foram cultivados em meio Woody Plant Medium (WPM), acrescido de 6-benzilaminopurina (BAP): 1,1; 2,2; 4,4; 8,8 e 17,6 ?M, além do controle, sem regulador vegetal. O alongamento e enraizamento dos PLBs foi induzido em meio contendo carvão ativado (0; 1; 2 e 3 g.L-1) ou ácido indol-3-butírico (AIB) (0,0; 1,25; 2,5; 5,0 e 10,0 M). As mudas foram transplantadas em bandejas contendo: pó de coco, casca de pínus com húmus de minhoca e vermiculita. Os resultados indicaram que a temperatura de - 80 °C foi mais eficiente para o armazenamento de sementes, pois após 36 meses, a porcentagem de sementes viáveis foi mais elevada (81,86%), quando comparada a de - 20 °C (64,24%) pelo teste TZ. As sementes cultivadas no meio WPM apresentaram melhores respostas de germinação (94,71%, índice de velocidade de germinação de 25,33) e de desenvolvimento das plântulas, após 36 meses de armazenamento em temperatura de - 80 °C. A técnica TCL foi eficiente para a propagação in vitro de H. grandis, sendo que a idade e concentração de BAP influenciaram as respostas de regeneração de PLBs. Secções transversais de protocormos de 60 dias, cultivados em meio WPM, acrescido de 2,2 M de BAP apresentaram melhores respostas para a técnica TCLt (70,8% de regeneração de PLBs e 30,1 PLBs por explante). Para a técnica TCLl foi recomendado o uso de secções de protocormos de 90 dias de idade, cultivadas em meio contendo 8,8 M de BAP (83,3% de regeneração de PLBs e 34,4 PLBs por explante). O carvão ativado foi eficiente no alongamento e enraizamento, sendo recomendada a concentração de 1 g L-1. As mudas foram aclimatizadas com sucesso em casa de vegetação (98,21% de sobrevivência) utilizando vermiculita como substrato. O protocolo descrito nesse estudo foi eficiente para conservação de sementes, germinação in vitro e micropropagação utilizando a técnica TCL para a produção de mudas de H. grandis. Palavras chave: banco de sementes, viabilidade de sementes, "thin cell layer", regeneração de PLBs, 6-benzilaminopurina (BAP); Abstract: Hadrolaelia grandis is an endangered species and its population is declining due irregular collection for ornamental purposes and habitat destruction. The objective of this study was to establish a seed conservation protocol, in vitro germination and large-scale propagation of H. grandis seedlings using the "thin cell layer" (TCL) technique from protocorms. The tetrazolium test (TZ), and in vitro germination were performed with seeds stored at - 20 ° C and - 80 ° C for 24, 30 and 36 months. The culture media Woody Plant Medium (WPM), Murashige and Skoog (MS) Vacin & Went (VW) and Knudson C (KC) were tested for in vitro germination and protocorm development. For the regeneration of the protocorm-like bodies (PLBs) using TCL technique, transversal sections were performed (tTCL) and longitudinal sections (lTCL) in protocorm from 60 and 90 days of age. The explants were cultured in Woody Plant Medium (WPM), supplemented with 6-benzylaminopurine (BAP): 1.1, 2.2, 4.4, 8.8 and 17.6 ?M, and the control without plant growth regulation. The elongation and rooting of PLBs were induced in medium containing activated charcoal (0, 1, 2 and 3 g L-1) or indole-3-butyric acid (IBA) (0.0, 1.25, 2.5, 5.0 and 10.0 ?M). The seedlings were transplanted into trays containing: coco powder, pine bark with humus worm and vermiculite. The results indicated that the temperature of - 80 °C was more efficient for storing seeds, because after 36 months, the percentage of viable seeds was higher (81.86%), when compared to - 20 °C (64.24%) by TZ test. The seeds grown in the WPM medium showed better germination responses (94.71%, 25.33 germination speed index) and seedling development, after 36 months of storage at a temperature of - 80 °C. The TCL technique was efficient for the in vitro propagation of H. grandis, and the age and concentration of BAP influenced PLBs regeneration responses. Transversal sections from protocorm of 60 days old, cultured in WPM supplemented with 2.2 M BAP responded better to tTCL technique (70.8% of PLBs PLBs regeneration and 30.1 per explant). For lTCL technique has been recommended to use sections from protocorm 90 days old, grown in medium containing 8.8 M of BAP (83.3% of PLBs regeneration PLBs and 34.4 per explant. The activated charcoal was effective for elongation and rooting of PLBs, and we recommended the concentration of 1 g L-1. The seedlings were successfully acclimatized in greenhouse (98.21% survival) using vermiculite as substrate. The protocol described in this study was efficient for conservation, seed germination and in vitro micropropagation using TCL technique for mass production of H. grandis seedlings. Keywords: seed banks, seed viability, thin cell layer, PLBs regeneration, 6-benzylaminopurine (BAP) Orientadora : Profª. Drª. Luciana Lopes Fortes Ribas; Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Botânica. Defesa: Curitiba, 24/08/2015; Inclui referências : f. 21-25-47-50-78-81 2015-01-01T00:00:00Z https://hdl.handle.net/1884/45390 Estudo do desenvolvimento de alterações sensoriais e avaliação da participação do sistema endotelinérgico em um modelo experimental de carcinoma facial Resumo: O presente estudo teve como objetivo avaliar o desenvolvimento de alterações sensoriais em um modelo animal de carcinoma facial, bem como a participação das endotelinas e seus receptores nessas alterações. A inoculação unilateral de células tumorais na região direita de inserção das vibrissas de ratos promoveu crescimento tumoral e aumento do grooming espontâneo, além de induzir o desenvolvimento bilateral de hiperalgesia a estímulos térmicos (frio e calor) e mecânico, com pico no dia 6 após a inoculação. Para avaliar a influência dos tratamentos nas alterações associadas à indução do tumor na face, o limiar de resposta à estimulação térmica e mecânica foi avaliado antes e no dia 6 após a inoculação das células tumorais. O tratamento sistêmico com morfina (2,5 mg/kg, s.c.) reduziu a hiperalgesia térmica e mecânica, bem como o grooming espontâneo de ratos com tumor facial. No entanto, o tratamento local (30 µg/50 µL) reduziu apenas a hiperalgesia ao calor e o grooming espontâneo. O tratamento local com BQ-123 e/ou BQ-788 (antagonistas dos receptores de endotelina ETA e ETB, respectivamente; 30 nmol/50 µL) não reduziu a hiperalgesia ao calor ou o grooming espontâneo após a inoculação. No entanto, a hiperalgesia ao calor foi reduzida pelo tratamento local com bosentana (antagonista dual dos receptores de endotelina ETA e ET, 30 µg/50 µL). O tratamento sistêmico único ou repetido com bosentana na dose de 100 mg/kg, v.o., não foi capaz de reduzir a hiperalgesia ao calor e mecânica induzida pelo tumor. Por outro lado, uma única administração de bosentana na dose de 300 mg/kg aboliu a hiperalgesia ao calor, mas não afetou a hiperalgesia mecânica. Entretanto, a combinação de morfina e bosentana, em doses não efetivas, i.e. 0,625 e 100 mg/kg, respectivamente, promoveu um efeito potencializador na redução da hiperalgesia ao calor e mecânica nos animais inoculados. O tratamento local ou sistêmico com bosentana, nas doses de 30 µg/50 µL e 100 mg/kg, respectivamente também foi capaz de reduzir o grooming espontâneo avaliado no dia 6 após a inoculação. Corroborando este dado, na avaliação da preferência condicionada de lugar (CPP) somente o grupo dos animais com tumor demonstraram preferência pela câmara pareada com o tratamento sistêmico com bosentana (100 mg/kg), enquanto que o tratamento local não foi capaz de induzir preferência. Este estudo fornece evidências de que as endotelinas, atuando sistemicamente através de receptores ETA e ETB, podem participar no desenvolvimento da hiperalgesia e dor espontânea associada ao câncer de face e indicam um potencial efeito antinociceptivo sinérgico entre morfina e antagonistas de endotelinas nessa condição. Além disso, a eficácia da bosentana no controle da dor não evocada sugere uma nova estratégia farmacológica para o manejo dessa qualidade de dor.; Abstract: The current study aimed to evaluate the development of alterations associated with facial carcinoma, as well as the participation of endothelins and their receptors on these changes. The unilateral inoculation of tumor cells on the right vibrissal pad of rats induced a tumor growth and an increase of spontaneous grooming and bilateral hiperalgesia to thermal (cold and heat) and mechanical stimuli, which showed peak on day 6 after inoculation. To evaluate the influence of the treatments on alterations associated with facial tumor induction, the response threshold to thermal and mechanical stimulation was assessed before and on day 6 after tumor cell inoculation. The systemic treatment with morphine (2.5 mg/kg, s.c.) reduced thermal and mechanical hyperalgesia, as well as spontaneous grooming in rats with facial tumor. However, the local treatment (30 µg/50 µL) reduced only heat hyperalgesia and spontaneous grooming. The local treatment with BQ-123 and/or BQ-788 (ETA and ETB endothelin receptors antagonists, respectively; 30 nmol/50 µL) did not reduce heat hyperalgesia and spontaneous grooming after inoculation. However, heat hyperalgesia was reduced by local treatment with bosentan (dual ETA and ETB endothelin receptor antagonist, 30 µg/50 µL). The single or repeated systemic treatment with bosentan at 100 mg/kg, p.o., was unable to reduce heat and mechanical hyperalgesia induced by the tumor. In contrast, a single administration of bosentan at 300 mg/kg abolished the heat hyperalgesia, but did not affect mechanical hyperalgesia. The combination of morphine and bosentan, both at ineffective doses, i.e. 0.625 to 100 mg/kg, respectively, promoted a potentiated effect on the reduction of heat and mechanical hyperalgesia in tumor-bearing rats. The local or systemic treatment with bosentan, at doses of 30 µg/50 µL and 100 mg/kg, respectively, was also able to reduce spontaneous grooming, assessed on day 6 after inoculation. Corroborating these data, on the conditioned place preference (CPP) test, only the group of animals with tumor showed a preference for the paired chamber with systemic bosentan treatment (100 mg/kg), whereas local bosentan (30 µg/50 µL) treatment was not able to induce preference. This study provides evidence that endothelins, acting systemically through ETA and ETB receptors, could be involved in the development of hyperalgesia and spontaneous pain associated with facial cancer and indicate a potential synergistic analgesic effect of morphine and endothelin receptors antagonists on this condition. Moreover, the efficacy of bosentan in non-evoked pain control suggests a new pharmacological strategy for the management of this quality of pain. Orientador : Profª. Drª. Juliana Geremias Chichorro; Coorientadora : Profª. Drª. Alexandra Acco; Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 29/07/2016; Inclui referências : f. 99-112 2016-01-01T00:00:00Z