Teses

Potencial bioativo de Endlicheria paniculata (Spreng.) J.F. Macbr. (Lauraceae) : abordagem integrada de caracterização química, atividades biológicas, capacidade antioxidante e formulação de microcápsulas poliméricas

2026-04-14T15:45:50Z

Potencial bioativo de Endlicheria paniculata (Spreng.) J.F. Macbr. (Lauraceae) : abordagem integrada de caracterização química, atividades biológicas, capacidade antioxidante e formulação de microcápsulas poliméricas Resumo: O presente estudo teve como objetivo investigar as potencialidades de Endlicheria paniculata por meio da caracterização de seus constituintes químicos e atividades biológicas. As folhas secas foram submetidas à extração contínua em Soxhlet com um solvente cetônico, obtendo-se o extrato bruto. Em seguida, procedeu-se à partição em frações de hexano, clorofórmio, acetato de etila e remanescente, de acordo com a polaridade. A fração de hexano apresentou o maior rendimento, enquanto flavonoides e taninos foram identificados principalmente na fração de acetato de etila. Na análise físico-química, foram determinados os teores de sólidos totais e de cinzas no extrato bruto, os quais indicaram boa qualidade do material vegetal e adequada eficiência de extração. Foram avaliados os fenólicos totais nas frações e no extrato bruto, verificando-se que todas apresentaram teores consideráveis, especialmente a de clorofórmio (751,66 µg EAG/mg). Ensaios de Cromatografia em Camada Delgada confirmaram a presença de taninos e flavonoides. Os extratos foram testados pelo método de difusão em ágar frente a linhagens bacterianas, sendo que a Escherichia coli apresentou sensibilidade significativa às frações de acetato de etila e remanescente, com halos de 12 mm e 11 mm, respectivamente. Nas atividades antioxidantes, foram aplicados os métodos de captura do radical DPPH e de formação do complexo fosfomolibdênio. A fração de acetato de etila apresentou a maior capacidade antioxidante no DPPH (87,58 µg ET/mg). Em relação à formação do complexo fosfomolibdênio, foram verificados resultados mais significativos quando comparados à rutina, especialmente nas frações de clorofórmio (111,39%) e hexano (98,66%). Os óleos essenciais das folhas, casca e lenho da espécie foram submetidos separadamente à hidrodestilação em aparelho tipo Clevenger e analisados por GC/MS. O maior rendimento foi obtido das folhas (1,8%). A composição química revelou predominância dos compostos majoritários Amorpha-4,9-dien-2-ol (41,12%) nas folhas, Muurola-4,10(14) -dien-1-ß-ol (43,54%) no lenho e Espatulenol (18,56%) na casca. O óleo essencial obtido das folhas foi testado contra as enzimas a glicosidase e acetilcolinesterase (AchE), apresentando elevadas taxas de inibição, com médias de 98,44% (a-glicosidase) e 97,71% (AchE). Testes in vitro foram realizados contra Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Nessa análise, o óleo essencial apresentou ação moduladora sinérgica, reduzindo a CIM de antibióticos (Ampicilina, Penicilina G, Gentamicina), bem como de Clorexidina e enxaguantes bucais, com reduções variando entre 44,9% e 87,5%. O óleo essencial das folhas também foi testado frente a larvas de Aedes aegypti, tendo apresentado forte atividade, com LC50 <100 µg/mL. Posteriormente, foi encapsulado em matriz polimérica de quitosana e alginato e avaliado por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). As microcápsulas mostraram morfologia adequada, sem excesso de rachaduras ou cavidades, indicando potencial para liberação controlada. Os resultados revelam E. paniculata como fonte de metabólitos secundários e sesquiterpenos, com atividades antioxidante, antibacteriana, anticolinesterásica, antidiabética e larvicida, evidenciando seu potencial para aplicações farmacêuticas e biotecnológicas; Abstract: This study aimed to investigate the potential of Endlicheria paniculata through the characterization of its chemical constituents and biological activities. Dried leaves were subjected to continuous extraction in a Soxhlet apparatus using a ketone solvent, yielding the crude extract. Subsequently, the extract was partitioned into hexane, chloroform, ethyl acetate, and residual fractions according to polarity. The hexane fraction showed the highest yield, while flavonoids and tannins were mainly identified in the ethyl acetate fraction. In the physicochemical analysis, the total solids and ash contents of the crude extract were determined, indicating good quality of the plant material and efficient extraction. Total phenolic contents were evaluated in the fractions and in the crude extract, and all showed considerable levels, especially the chloroform fraction (751.66 µg GAE/mg). Thin-layer chromatography (TLC) assays confirmed the presence of tannins and flavonoids. The extracts were tested using the agar diffusion method against bacterial strains, with Escherichia coli showing significant sensitivity to the ethyl acetate and residual fractions, with inhibition zones of 12 mm and 11 mm, respectively. Antioxidant activities were assessed using the DPPH radical scavenging method and the phosphomolybdenum complex formation assay. The ethyl acetate fraction exhibited the highest antioxidant capacity in the DPPH assay (87.58 µg TE/mg). In the phosphomolybdenum assay, results were more significant when compared with rutin, especially for the chloroform (111.39%) and hexane (98.66%) fractions. Essential oils from leaves, bark, and wood were obtained separately by hydrodistillation using a Clevenger-type apparatus and analyzed by GC/MS. The highest yield was obtained from the leaves (1.8%). The chemical composition revealed the predominance of the major compounds Amorpha-4,9-dien-2-ol (41.12%) in the leaves, Muurola-4,10(14)-dien-1-ß-ol (43.54%) in the wood, and Spathulenol (18.56%) in the bark. The essential oil from the leaves was tested against the enzymes a glucosidase and acetylcholinesterase (AChE), showing high inhibition rates, with averages of 98.44% (a-glucosidase) and 97.71% (AChE). In vitro tests were conducted against Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, and Escherichia coli. In this assay, the essential oil demonstrated synergistic modulatory action, reducing the MIC of antibiotics (ampicillin, penicillin G, and gentamicin), as well as chlorhexidine and mouthwashes, with reductions ranging from 44.9% to 87.5%. The leaf essential oil was also tested against Aedes aegypti larvae, exhibiting strong larvicidal activity, with LC50 < 100 µg/mL. Subsequently, it was encapsulated in a chitosan–alginate polymeric matrix and evaluated by scanning electron microscopy (SEM). The microcapsules showed suitable morphology, without excessive cracks or cavities, indicating potential for controlled release. Overall, the results demonstrate E. paniculata as a source of secondary metabolites and sesquiterpenes with antioxidant, antibacterial, anticholinesterase, antidiabetic, and larvicidal activities, highlighting its potential for pharmaceutical and biotechnological applications Orientador: Prof. Dr. Obdulio Gomes Miguel; Coorientadora: Profa. Dra. Josiane de Fátima Gaspari Dias; Banca: Obdulio Gomes Miguel (Presidente da Banca), Cintia Aparecida dos Anjos, Carolina Sette Barbosa e Letícia Mazepa; Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa : Curitiba, 14/08/2025; Inclui referências

Efeito dos sanitizantes naturais na redução de microrganismos e remoção de ovos e oocistos de parasitos em hortaliças folhosas

2026-04-14T15:31:32Z

Efeito dos sanitizantes naturais na redução de microrganismos e remoção de ovos e oocistos de parasitos em hortaliças folhosas Resumo: Desinfetantes à base de cloro, amplamente empregados na higienização de hortaliças, formam subprodutos de desinfecção, como trihalometanos (THMs) e ácidos haloacéticos (HAAs), pela reação do cloro com a matéria orgânica da matriz vegetal e da água. Evidências epidemiológicas associam a exposição crônica a esses compostos ao aumento do risco de câncer, sobretudo de bexiga e de neoplasias relacionadas ao sistema endócrino. Diante desse cenário, este estudo teve por objetivo sintetizar evidências científicas e avaliar a eficácia de soluções naturais, menos agressivas à saúde humana, na descontaminação microbiana e parasitológica de hortaliças folhosas. A tese foi organizada em três capítulos: (I) no primeiro, realizou-se uma revisão integrativa sobre a eficácia de sanitizantes naturais à base de extratos e óleos essenciais na redução de E. coli O157:H7 e Salmonella sp em folhas de alface; (II) no segundo, realizou-se uma revisão integrativa sobre a eficácia da glicina na recuperação de parasitos em hortaliças folhosas; (III) e, no terceiro, avaliou-se o efeito da combinação de óleos essenciais de alecrim e orégano com extrato da semente de quinoa (OEs + EQ) na redução de bactérias e remoção de ovos de helmintos em folhas de alface. As revisões integrativas seguiram as diretrizes do PRISMA, com buscas realizadas nas bases de dados PubMed, Scopus e literatura cinzenta, incluindo artigos em português, inglês ou espanhol, independentemente do desfecho. Para o experimento do terceiro capítulo, folhas de alface in natura e inoculadas com E. coli, Salmonella e ovos de Toxocara canis foram lavadas por 5 minutos com OEs + EQ, sendo comparadas a controles como hipoclorito de sódio, OEs + Tween 20, Tween 20, extrato da semente de quinoa, glicina e água potável. Os resultados mostraram que OEs + EQ reduziram mais de 2,5 logs UFC/g de aeróbios mesófilos e E. coli, e mais de 3 logs UFC/g de Salmonella Typhimurium, além de remover aproximadamente 50% dos ovos de Toxocara canis. A redução microbiana foi estatisticamente semelhante à obtida com hipoclorito de sódio e OEs + Tween 20, enquanto a eficácia na remoção de ovos de helmintos foi comparável aos tratamentos com Tween 20, glicina e extrato da semente de quinoa. Em adição, os resultados obtidos com OEs + EQ estão alinhados com a revisão integrativa realizada (Capítulo I), que demonstrou que os sanitizantes naturais apresentam eficácias semelhantes ao hipoclorito de sódio. Ademais, a eficácia global da glicina, evidenciada na revisão integrativa do Capítulo II, foi de 38,05%, valor inferior ao alcançado pelo extrato da semente de quinoa, que apresentou eficácia de 58,7% (Capítulo III). Conclui-se, portanto, que OEs + EQ representam uma alternativa viável para a higienização de hortaliças, destacando-se o extrato da semente de quinoa isolado como uma solução promissora para a remoção de ovos de helmintos e a redução dos riscos de contaminação parasitária; Abstract: Chlorine-based disinfectants, widely employed in the sanitization of vegetables, form disinfection by-products, such as trihalomethanes (THMs) and haloacetic acids (HAAs), through the reaction of chlorine with organic matter in the plant matrix and in water. Epidemiological evidence associates chronic exposure to these compounds with an increased risk of cancer, especially bladder cancer and neoplasms related to the endocrine system. In view of this scenario, this study aimed to generate scientific evidence and to evaluate the efficacy of natural solutions, less aggressive to human health, in the microbial and parasitological decontamination of leafy vegetables. The thesis was organized into three chapters: (I) in the first, an integrative review was conducted on the efficacy of natural sanitizers based on extracts and essential oils in reducing E. coli O157:H7 and Salmonella spp. on lettuce leaves; (II) in the second, an integrative review was conducted on the efficacy of glycine in the recovery of parasites in leafy vegetables; (III) and, in the third, the effect of combining rosemary and oregano essential oils with quinoa extract (OEs + EQ) on the reduction of bacteria and the removal of helminth eggs on lettuce leaves was evaluated. The integrative reviews followed PRISMA guidelines, with searches carried out in the PubMed and Scopus databases and the grey literature, including articles in Portuguese, English, or Spanish, regardless of outcome. For the experiment in the third chapter, lettuce leaves in natura and inoculated with E. coli, Salmonella, and Toxocara canis eggs were washed for 5 minutes with OEs + EQ, being compared with controls such as sodium hypochlorite, OEs + Tween 20, Tween 20, quinoa extract, glycine, and potable water. The results showed that OEs + EQ reduced aerobic mesophiles and E. coli by more than 2.5 log CFU/g, and Salmonella Typhimurium by more than 3 log CFU/g, in addition to removing approximately 50% of Toxocara canis eggs. The microbial reduction was statistically similar to that obtained with sodium hypochlorite and OEs + Tween 20, while the efficacy in the removal of helminth eggs was comparable to treatments with Tween 20, glycine, and quinoa extract. In addition, the results obtained with OEs + EQ are in line with the integrative review carried out (Chapter I), which showed that natural sanitizers present efficacies similar to sodium hypochlorite. Moreover, the overall efficacy of glycine, evidenced in the integrative review of Chapter II, was 38.05%, a value lower than that achieved by quinoa extract, which presented an efficacy of 58.7% (Chapter III). It is concluded, therefore, that OEs + EQ represent a viable alternative for the sanitization of vegetables, with isolated quinoa extract standing out as a promising solution for the removal of helminth eggs and the reduction of the risks of parasitic contamination Orientador: Prof. Dr. Obdulio Gomes Miguel; Coorientadora: Profa. Dra. Sila Mary Rodrigues Ferreira; Banca: Obdulio Gomes Miguel (Presidente da Banca), Josiane de Fátima Gaspari Dias, Luciana Gibbert e Luciane Dalarmi; Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa : Curitiba, 22/08/2025; Inclui referências

Associação de polimorfismos em genes envolvidos em processos inflamatórios no Diabetes mellitus tipo 1 de início na infância

2026-01-09T19:20:35Z

Associação de polimorfismos em genes envolvidos em processos inflamatórios no Diabetes mellitus tipo 1 de início na infância Resumo: O Diabetes mellitus tipo 1 (DM1) é uma doença crônica, heterogênea e multifatorial caracterizada pela hiperglicemia resultante da destruição das células ß pancreáticas. A associação de fatores genéticos e ambientais são responsáveis pelo início da doença. Polimorfismos de troca única em mais de 60 genes estão associados ao desenvolvimento de DM1 e em genes envolvidos em resposta inflamatória podem estimular a destruição das células ß. Neste estudo, investigamos as frequências genotípicas e alélicas de polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) localizados em genes relacionados à processos inflamatórios e verificamos possíveis associações com o DM1, parâmetros bioquímicos e antropométricos. Os polimorfismos foram avaliados em 141 crianças com DM1 e 165 crianças sem a doença, utilizando a técnica de Taqman® e PCR-RFLP. As concentrações plasmáticas de sRAGE, sEGFR, IL- 6, TNF-a foram medidas através do sistema Luminex®. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da UFPR (CAAE: 01038112.0.0000.0102). Os polimorfismos localizados no gene RAGE (rs2070600, rs1800625, rs1800624 e rs3134945) não foram associados ao DM1 na população em estudo, bem como os polimorfismos rs3729960 localizado no gene GP130, o rs2146323 e rs3025039 no gene VEGFA. Igualmente, não houve associação entre os polimorfismos rs664393 no gene VEGFR-1, rs1800629 no gene TNF-a e rs767455 no gene TNFR-1. O rs18007795 apresentou associação à proteção ao DM1 e rs8192284 não apresentou diferença significativas, ambos localizados o gene IL-6. Os polimorfismos rs1061622 (TNFR-2), rs448012 (VEGFR-3), rs107377 e rs2071559 (VEGFR-2) foram associados ao risco de desenvolvimento do DM1 na população em estudos, enquanto o rs2227983 (EGFR) foi associado à proteção. As frequências dos alelos de menor frequência dos polimorfismos em estudo foram comparadas com outras populações e, de maneira geral, se assemelharam às populações caucasoides.; Abstract: Type 1 Diabetes Mellitus is a chronic disease, heterogeneous and multifactorial disease characterized by hyperglycemia resulting from the destruction of pancreatic ß cells. The association of genetic and environmental factors is responsible for the onset of the disease. Polymorphisms of a single nucleotide in more than 60 genes are associated with the development of T1D and in genes involved in inflammatory response may stimulate the destruction of ß cells. In this study, we investigated the genotypic and allelic frequencies of single nucleotide polymorphism (SNP) located in genes related to inflammatory processes and examined their possible associations to T1D, biochemical parameters and anthropometrics.The polymorphisms were evaluated in 141 children with T1D and 165 children without the disease, using the Taqman® and PCR-RFLP techniques. The plasmatic concentrations of sRAGE, sEGFR, IL-6, TNF-a were measured using the Luminex® system. The project had the approval of the Ethics Research Committee of UFPR (CAAE: 01038112.0.0000.0102). The polymorphisms located in the RAGE gene (rs2070600, rs1800625, rs1800624 e rs3134945) were not associated with T1D in the study population, nor were the polymorphisms rs3729960 located in the GP130 gene, the rs2146323 and rs3025039 in the VEGFA gene. Equally, there was no association among the polymorphisms rs664393 in the VEGFR-1 gene, rs1800629 in the TNF-a gene and rs767455 in the TNFR-1 gene. The rs18007795 polymorphism presented a protective association with T1D and rs8192284 did not show significant differences, both located in IL-6 gene. The polymorphisms rs1061622 (TNFR- 2), rs448012 (VEGFR-3), rs107377, and rs2071559 (VEGFR-2) were associated to the risk of developing T1D in the study population, while rs2227983 (EGFR) was associated with protection.The frequency of the alleles with lower frequency of the studied polymorphisms was compared with other populations and, in general, resembled to the Caucasian populations. Orientadora: Profª. Drª. Fabiane G. de M. Rego; Coorientador: Prof. Dr. Geraldo Picheth; Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa : Curitiba, 20/11/2023; Inclui referências

Abordagem química de Botrytis cinerea e sua aplicação farmacêutica, veterinária e agrícola

2025-12-02T16:06:13Z

Abordagem química de Botrytis cinerea e sua aplicação farmacêutica, veterinária e agrícola Resumo: Os produtos naturais desempenham um importante papel na descoberta de novas substâncias químicas que sirvam de protótipos para novos fármacos. Uma das fontes utilizadas para a pesquisa e produção de novos produtos naturais são os fungos, principalmente os fungos endofíticos que têm demonstrado serem produtores de metabólitos secundários e atividades biológicas. Entre eles, encontra-se o fungo Botrytis cinerea Pers. (= Botryotinia fuckeliana), agente causal do mofo cinzento ou podridão cinza. De difícil controle, a podridão cinza causa prejuízos em vários tipos de culturas agrícolas. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi investigar o potencial farmacológico de B. cinerea, com a finalidade de se obter substâncias que possam ser potencialmente ativas. Foram realizados dois diferentes métodos de extração: maceração e Soxhlet a partir do caldo e micélio obtido do fungo. Dos extratos etanólicos brutos produzidos, foram preparadas partições com solventes de acordo com a polaridade crescente. Além disso, testes histoquímicos foram realizados previamente para identificação de compostos. Dessa forma, verificou-se a presença de proteínas totais, lipídeos, terpenos e subtâncias nitrogenadas. O perfil cromatográfico dos extratos brutos mostrou que o método de extração pode influenciar quantitativamente nos componentes do extrato. A partir de EEB, foram elucidadas duas moléculas com auxílio de RMN, manitol e um triglicerídeo foram isolados do extrato fúngico de B. cinerea. Extratos brutos e frações do fungo apresentaram potencial antioxidante moderado para DPPH, T-Bars e azul da prússia, com destaque para a fração hexano, fração acetato de etila e EEB obtidos por maceração. Para a atividade enzimática, Al2(SO4)3 foi utilizado como agente estressor exógeno, e foi observada a redução de biomassa e aumento da produção de enzimas hidrolíticas, celulolíticas e oxidativas. A pesquisa mostrou, ainda, efeito positivo para a ação inibitória das enzimas tirosinase e acetilcolisneterase. Os ensaios de toxicidade demonstraram que extratos e frações de B. cinerea não foram tóxicos para Artemia salina, entretanto, o ensaio realizado com células de linhagens neoplásicas mostrou citotoxicidade acentuada para células de câncer de cólon, monocíticas e glioma humano. Resultado positivo foi observado, também, para a atividade leishmanicida realizada com promastigotas. Porém a atividade larvicida foi pouco efetiva frente as larvas de Aedes aegypti. Foi observada atividade antimicrobiana significativa dos extratos e frações de B. cinerea em cepas bacterianas e fúngicas, com destaque para EEB e frações acetato de etila. O estudo também apresentou efetividade dos extratos do fungo quanto a atividade protetora gástrica, contudo pouco expressiva para motilidade e trânsito intestinal. As análises bioquímicas realizadas demonstraram que os extratos de B. cinerea exibiram toxicidade e alterações hepáticas. Os resultados sugerem que o fungo B. cinerea é fonte promissora para aplicações biotecnológicas.; Abstract: Natural products play an important role in the discovery of new chemicals that serve as prototypes for new drugs. One of the sources used for research and production of new natural products are fungi, mainly endophytic fungi that have been shown to produce secondary metabolites and biological activities. Among them is the fungus Botrytis cinerea Pers. (= Botryotinia fuckeliana), causal agent of gray mold or gray rot. Difficult to control, gray rot causes damage in several types of agricultural crops. Thus, the objective of this study was to investigate the pharmacological potential of B. cinerea, in order to obtain substances that can be potentially active. Two different extraction methods were performed: maceration and Soxhlet from the broth and mycelium obtained from the fungus. From the crude ethanol extracts produced, partitions with solvents were prepared according to the increasing polarity. In addition, histochemical tests were performed previously to identify compounds. Thus, the presence of total proteins, lipids, terpenes and nitrogenous substances was verified. The chromatographic profile of the crude extracts showed that the extraction method can influence quantitatively the components of the extract. From BSE, two molecules were elucidated with the aid of NMR, mannitol and a triglyceride were isolated from the fungal extract of B. cinerea. Crude extracts and fractions of the fungus showed moderate antioxidant potential for DPPH, T-Bars and Prussian blue, with emphasis on the hexane fraction, ethyl acetate fraction and BSE obtained by maceration. For the enzymatic activity, Al2(SO4)3 was used as an exogenous stressor, and a reduction in biomass and an increase in the production of hydrolytic, cellulolytic and oxidative enzymes was observed. The research also showed a positive effect for the inhibitory action of the enzymes tyrosinase and acetylcholisneterase. The toxicity tests demonstrated that B. cinerea extracts and fractions were not toxic to Artemia salina, however, the test performed with cells of neoplastic lineages showed marked cytotoxicity for colon cancer cells, monocytes and human glioma. A positive result was also observed for the leishmanicidal activity performed with promastigotes. However, larvicidal activity was ineffective against Aedes aegypti larvae. Significant antimicrobial activity of B. cinerea extracts and fractions was observed in bacterial and fungal strains, with emphasis on BSE and ethyl acetate fractions. The study also showed effectiveness of extracts of the fungus in terms of gastric protective activity, however little expressive for motility and intestinal transit. Biochemical analyzes carried out showed that B. cinerea extracts exhibited toxicity and liver changes. The results suggest that the fungus B. cinerea is a promising source for biotechnological applications. Orientadora: Profa Dra. Marilis Dallarmi Miguel; Coorientadores: Prof. Dr. Celso Garcia Auer e Profª Drª Cristiane Bezerra da Silva; Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa : Curitiba, 24/08/2020; Inclui referências: p. 127-144