Caracterização da avifauna e seu perfil de resistência aos antimicrobianos de Enterobacterales e Staphylococcus em um fragmento de floresta estacional semidecidual em Palotina, Paraná, Brasil
Resumo
Resumo: Bactérias resistentes a antimicrobianos em animais silvestres, especialmente na avifauna, vêm representando um problema emergente na saúde única. O objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento da avifauna em uma unidade de conservação inserida no bioma Mata Atlântica no oeste do Paraná e avaliar perfis fenotípicos de resistência a antimicrobianos em Enterobacterales e de Staphylococcus spp. que circulam em parte destes animais. O levantamento da avifauna foi realizado durante o período de março de 2021 a fevereiro de 2022 por meio de observação ativa e relatos de populares, já as capturas utilizando redes de neblina foram executadas no período de abril a dezembro de 2021. O material biológico das aves que caíram nas redes de neblina foi coletado utilizando suabe cloacal e suabe de orofaringe, os quais foram acomodados em tubos contendo caldo BHI tradicional e caldo BHI suplementado com 6,5% de NaCl, respectivamente. Em laboratório, as bactérias provenientes dos suabes cloacais foram semeadas em ágar MacConkey e as bactérias dos suabes de orofaringe foram incubadas em ágar Sangue Ovino a 5%. Posteriormente as bactérias foram identificadas por meio de provas bioquímicas em Enterobacterales, Staphylococcus Coagulase-Negativo (SCoN) e Staphylococcus aureus. O teste de sensibilidade a antimicrobianos pelo método de disco-difusão foi realizado para a verificação de perfis de resistência nestas bactérias. Um total de 181 espécies de aves foram inventariadas para a unidade de conservação, entre elas aves ameaçadas de extinção, endêmicas para a Mata Atlântica e sensíveis a impactos antrópicos. Tais aves apresentaram uma ampla variedade de nichos ecológicos, demonstrando a importância da unidade para a preservação destes animais. Em rede de neblina, foram capturadas 197 aves pertentences a 54 espécies, sendo obtido 180 isolados de Enterobacterales coletados de 116 indivíduos; 156 isolados de SCoN foram coletados de 105 animais e 29 isolados de S. aureus obtidos de 24 aves. As Enterobacterales demonstraram ampla resistência à gentamicina (69,7%), cefoxitina (29%) e tetraciclina (24%), sendo detectado 35 perfis de resistência distintos nestes organismos, onde 8,9% foram multirresistentes a antimicrobianos. Os SCoN foram resistentes à gentamicina (72,4%), amicacina (19,7%) e eritromicina (16%). Vinte e sete perfis de resistência foram encontrados em SCoN, sendo 11,5% dos isolados multirresistentes. Para Staphylococcus aureus, houve a detecção de resistência principalmente à clindamicina e eritromicina (72,4%) e gentamicina (65,5%), sendo que 51,7% destas bactérias isoladas foram multirresistentes. Cepas resistentes à meticilina foram detectadas tanto em SCoN, quanto em S. aureus. Aves independentes de ambiente florestal apresentaram Enterobacterales e SCoN com maior resistência a antimicrobianos em relação às aves que dependem deste ambiente, demonstrando que a movimentação em áreas antrópicas pode ser um importante fator para a obtenção de bactérias resistentes. Os dados obtidos neste trabalho evidenciam a circulação na natureza de cepas resistentes a antimicrobianos usualmente utilizados na medicina humana e veterinária, reforçando a importância das aves como sentinelas, reservatórios e possíveis disseminadores de bactérias multirresistentes no ambiente. Abstract: Antimicrobial-resistant bacteria in wild animals, especially in the avifauna, have been representing an emerging issue in one-health. This study aimed to survey the avifauna in a conservation unit inserted in the Atlantic Forest biome in western Paraná and to evaluate phenotypic profiles of antimicrobial resistance in Enterobacterales and Staphylococcus spp. circulating in part of these animals. The avifauna survey was carried out during the period from March 2021 to February 2022 by active observation and popular reports, the captures using mist nets were performed during the period from April to December 2021. The biological material from birds that were captured in mist nets was collected using cloacal swabs and oropharyngeal swabs, which were placed in tubes containing traditional BHI broth and BHI broth supplemented with 6.5% NaCl, respectively. In the laboratory, the bacteria from the cloacal swabs were streaked on MacConkey agar and the bacteria from the oropharyngeal swabs were incubated on 5% Ovine Blood agar. Afterwards, the bacteria were identified by biochemical tests as Enterobacterales, Coagulase-Negative Staphylococcus (SCoN) and Staphylococcus aureus. Antimicrobial susceptibility testing by the disc-diffusion method was performed to verify resistance profiles in these bacteria. A total of 181 bird species were inventoried for the conservation unit, including endangered birds, endemic to the Atlantic Forest and sensitive to human impacts. These birds presented a wide variety of ecological niches, demonstrating the importance of the unit for the preservation of these animals. In a mist net, 197 birds belonging to 54 species were captured. 180 isolates of Enterobacterales were collected from 116 individuals; 156 isolates of SCoN were collected from 105 animals and 29 isolates of S. aureus were obtained from 24 birds. Enterobacterales showed broad resistance to gentamicin (69.7%), cefoxitin (29%) and tetracycline (24%), and 35 distinct resistance profiles were detected in these organisms, where 8.9% were multidrug-resistant to antimicrobials. SCoN were resistant to gentamicin (72.4%), amikacin (19.7%) and erythromycin (16%). Twenty-seven resistance profiles were found in SCoN, with 11.5% of the isolates being multidrug-resistant. For Staphylococcus aureus, resistance was detected mainly to clindamycin and erythromycin (72.4%) and gentamicin (65.5%), and 51.7% of these bacteria isolates were multidrug-resistant. Methicillin-resistant strains were detected in both SCoN and S. aureus. Birds independent of the forest environment showed Enterobacterales and SCoN with greater resistance to antimicrobials than birds dependent on this environment, demonstrating that movement in anthropic areas can be an important factor in obtaining resistant bacteria. The data obtained in this study show the circulation in the environment of strains resistant to antimicrobials commonly used in human and veterinary medicine, reinforcing the importance of birds as sentinels, reservoirs and possible disseminators of multidrug-resistant bacteria in the environment.
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