Avaliação do papel da Ficolina-1 e Ficolina-3 na febre reumática e cardiopatia reumática crônica

Abstract

Resumo: A febre reumática (FR) e sua manifestação clínica mais grave, a cardiopatia reumática crônica (CRC) são doenças inflamatórias crônicas decorrentes de infecção da orofaringe causada pelo Streptococcus pyogenes. O sistema complemento tem um papel chave na defesa do organismo contra infecções e na autoimunidade, já tendo sido relacionado a susceptibilidade e proteção contra a FR. As ficolinas são importantes moléculas na ativação do complemento pela via das lectinas atuando como receptores de reconhecimento de padrões (PRRs). Nosso grupo de pesquisa avaliou anteriormente o gene FCN2, que codifica a ficolina-2, na FR/CRC, porém não existem relatos envolvendo as ficolinas 1 e 3 na FR/CRC. Desta forma o objetivo deste trabalho foi avaliar a associação das concentrações séricas de ficolina-1 e ficolina-3, bem como, de polimorfismos nos genes FCN1 e FCN3, que codificam estas proteínas, com FR e CRC. Cinco polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) de FCN1 (rs2989727, rs10120023, rs17039495, rs10117466 e rs10858293) e três SNPs de FCN3 (rs532781899, rs28362807 e rs4494157) foram genotipados por PCR-SSP (amplificação sequência específica) em 193 pacientes (sendo 138 com CRC e 55 apresentaram FR, mas não evoluíram para CRC [FRo]) e 193 controles. As concentrações séricas de ficolina-1 e -3 foram realizadas em um subgrupo de pacientes e controles utilizando ensaio de imunoabsorbância enzimático (ELISA). Os pacientes apresentaram concentração de ficolina-1 33,8% menor comparados aos controles (medianas 800,5 vs. 1208,0 ng/mL respectivamente, mas não houve diferença entre CRC e FRo (p=0,990). Ficolina-3 foi 29,4% mais baixa em pacientes quando comparados aos controles (12,81 vs. 18,14 ?g/mL respectivamente, e 11,2% menor em CRC quando comparados a FRo (12,72 vs. 14,29 ?g/mL respectivamente, p=0,016). Além disso, baixas concentrações de ficolina-3 (As concentrações de ficolina-1 nos pacientes com o haplótipo de "suscetibilidade" *1 apresentaram concentrações 21% menores quando comparados aos pacientes com o haplótipo "protetor" *3C2 (770,8 vs. 975,9 ng/mL respectivamente, p=0,030). Por outro lado, polimorfismos/haplótipos do gene FCN3 não foram associados com concentrações de ficolina-3 ou com FR/CRC. Nossos resultados sugerem que polimorfismos de FCN1 podem ter um papel duplo na FR, com alguns polimorfismos associados a proteção contra a FR, pelo aumento da expressão do gene com consequente aumento da concentração da proteína, contribuindo para a melhor resposta do hospedeiro. Por outro lado, podem também predispor os pacientes à CRC, provavelmente por colaborar com a inflamação crônica e injúria tecidual, ressaltando a dupla importância da ficolina-1 em ambas as condições. Além disso, a concentração de ficolina-3 menor nos pacientes CRC do que nos FRo sugere uma associação com a progressão da doença, e pode ser sugestivo para maiores estudos como um promissor marcador de progressão da FR.

Abstract: Rheumatic fever (RF) and its most severe clinical manifestation, chronic rheumatic heart disease (RHD) are chronic inflammatory diseases resulting from oropharyngeal infection by Streptococcus pyogenes. The complement system plays a key role in both the defense against infections and autoimmunity, having already been related to susceptibility and protection against RF. Ficolins are important molecules of complement activation through the lectin pathway, acting as pattern recognition receptors (PRRs). Our research group has previously evaluated the FCN2 gene, which encodes ficolin-2, in RF and RHD, but there are no reports involving ficolins 1 and 3 in these conditions. Thus, the objective of this work was to evaluate the association of ficolin-1 and ficolin-3 serum levels, as well as polymorphisms in FCN1 and FCN3 genes, which encode these proteins, with RF and RHD. Five FCN1 single nucleotide polymorphisms (SNPs) (rs2989727, rs10120023, rs17039495, rs10117466 and rs10858293) and three FCN3 SNPs (rs532781899, rs28362807 and rs4494157) were genotyped by PCR-SSP (specific sequence amplification) in 193 RF patients (138 RHD and 55 patients who had RF but did not progress to RHD [RFo]) and 193 controls. The serum levels of ficolin-1 and-3 were quantified in a subgroup of patients and controls using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Patients had 33.8% lower ficolin-1 levels compared to controls (medians 800.5 vs. 1208.0 ng/mL respectively, p all known to be associated with FCN1 increased expression in the blood (gene expression database), were associated with protection against RF/RHD (p When assessing protein levels in these two haplotypes, patients with the "susceptibility" *1 haplotype had 21% lower ficolin-1 levels compared to patients with the "protective" *3C2 haplotype (770.8 vs. 975.9 ng / mL respectively, p=0.030). On the other hand, FCN3 gene polymorphisms/haplotypes were not associated with neither ficolin-3 levels nor RF/RHD. Our results suggest that FCN1 polymorphisms may have a double role in RF, with some polymorphisms associated with protection against RF, by increasing the gene expression and consequently increasing the protein level, contributing to host response. On the other hand, they might predispose patients to RHD, probably contributing to chronic inflammation and tissue injury, highlighting the dual importance of ficolin-1 in both conditions. In addition, the lower ficolin-3 levels in RHD vs. RFo patients suggests an association with disease progression and may be suggestive for further studies as a promising marker of RF progression.