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dc.contributor.advisorQuoirin, Marguerite Germaine Ghislaine, 1948-pt_BR
dc.contributor.authorZanella, Laudiane Brunapt_BR
dc.contributor.otherGoldbach, Juliana Degenhardtpt_BR
dc.contributor.otherUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Agronomia - Produção Vegetalpt_BR
dc.date.accessioned2021-02-23T02:33:41Z
dc.date.available2021-02-23T02:33:41Z
dc.date.issued2016pt_BR
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/1884/69447
dc.descriptionOrientador : Profª. Drª. Marguerite G. G. Quoirinpt_BR
dc.descriptionCoorientador : Drª. Juliana Degenhardt-Goldbachpt_BR
dc.descriptionDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agronomia. Defesa: Curitiba, 18/08/2016pt_BR
dc.descriptionInclui referências : f. 37-45pt_BR
dc.descriptionÁrea de concentração: Produção vegetalpt_BR
dc.description.abstractResumo: A embriogênese somática (ES) consiste na formação de embriões a partir de células somáticas, num processo morfogenético semelhante àquele verificado para a embriogênese zigótica. Dentre as suas potencialidades encontram-se a propagação massal e clonal de genótipos elite, a criopreservação dos tecidos embriogênicos, além da conservação ex situ de germoplasma de espécies ameaçadas de extinção. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de embriogênese somática de Pinus caribaea var. hondurensis. Para tanto, na fase de indução da embriogênese somática foram comparados os meios DCR, QL e WV5 com e sem adição de ácido fólico (100 mgL-1); a seguir foram utilizados vários tipos de explantes iniciais: megagametófito maduro, acículas, hipocótilos e raízes de plântulas recém germinadas, e, finalmente, testadas três concentrações de 2,4-D (0, 10, 20 e 30 ?M) combinadas com BAP (0, 2, 4 e 8 ?M). O meio básico de indução da embriogênese continha os sais do meio QL, sacarose, mio-inositol, glutamina, caseína hidrolisada, tiamina, 2,4-D, BAP, ágar e (100 mgL-1) de ácido fólico. Na fase de maturação dos embriões somáticos, foi avaliado o efeito do PEG-3500 (10%) no meio básico sem 2,4D nem BAP e com a adição de ABA e carvão ativado. As culturas foram mantidas no escuro a 23±2ºC. Após 90 dias foram avaliadas a porcentagem de explantes com calos, a formação de embriões somáticos anormais e a oxidação. Além disso, foi realizada a coloração dos calos com carmim acético e azul de Evans para confirmar se eram embriogênicos. O formato e a coloração dos embriões no meio de maturação foram avaliados após 60 e 90 dias. Na fase de indução, o melhor meio foi o QL com adição de ácido fólico, com 48% de explantes formando calos. O megagametófito foi o único explante que apresentou o desenvolvimento de embriões somáticos anormais. Utilizando o megagametófito maduro como explante, observou-se que a melhor combinação de 2,4-D e de BAP foi 10 ?M de 2,4-D e 2 ?M de BAP. O teste de coloração indicou a presença de células embriogênicas em todos os tratamentos de todos os experimentos. Na fase de maturação, o uso de 10% de PEG-3500 não foi favorável para o desenvolvimento dos embriões somáticos. Na fase de indução da embriogênese somática, o melhor resultado foi obtido cultivando megagametófitos em meio QL suplementado com 100 mgL-1 de ácido fólico, 2,4-D (10 ?M) e BAP (2 ?M). No presente estudo não foi possível a obtenção de embriões somáticos normais. Palavras-chave: ácido fólico; megagametófitos; 2,4D; BAP; PEG3500.pt_BR
dc.description.abstractAbstract: Somatic embryogenesis (SE) is the formation of embryos from somatic cells, a morphogenetic procedure similar to that observed for the zygotic embryogenesis. Among its strengths are the mass and clonal propagation of elite genotypes, cryopreservation of embryogenic tissues, as well as ex situ conservation of germplasm of endangered species. This study aimed to develop a somatic embryogenesis protocol Pinus caribaea var. hondurensis. Therefore, the induction phase of somatic embryogenesis compared the DCR, QL and WV5 culture media with and without addition of folic acid. Various kinds of initial explants were used: mature megagametophyte, needles, hypocotyls and roots of newly germinated seedlings, and finally three concentrations of 2,4-D (0, 10, 20 and 30 ?M) in combination with BAP (0, 2, 4 and 8 ?M) were tested. The basic medium for embryogenesis induction contained the QL salts, sucrose, myo-inositol, glutamine, casein hydrolizate, thiamine, 2,4-D, BAP, agar and 100 mg L-1 of folic acid. During the maturation stage, we evaluated the effect of PEG-3500 (10%) in basal medium without 2,4-D and BAP or with the addition of ABA and activated charcoal. Cultures were maintained in the dark at 23 ± 2 ° C. After 90 days the percentage of explants with callus, somatic embryos formation and oxidation were evaluated. In addition, staining of callus was performed with acetic carmine and Evans Blue to confirm whether they were embryogenic. The format and staining of embryos in maturation medium were evaluated after 60 and 90 days. In the induction phase, the QL medium with the addition of folic acid was better, with 48% explants forming calli. The megagametophyte was the only explant forming abnormal somatic embryos. Using the mature megagametophyte, the best concentrations of 2,4-D combined with BAP were 10 and 2 uM respectively. The staining test indicated the presence of embryogenic cells in all treatments. During the maturation phase, the use of 10% PEG-3500 was not favorable for the development of somatic embryos. The best treatment for callus induction from megagametófitos was QL medium supplemented with 100 mg L-1 folic acid, 2,4-D (10 uM) and BAP (2 uM). In the present study normal somatic embryos were not observed. Keywords: Plant tissue culture, somatic embryos, embryogenic callus, folic acid.pt_BR
dc.format.extent47 f. : il., algumas color., grafs., tabs.pt_BR
dc.format.mimetypeapplication/pdfpt_BR
dc.languagePortuguêspt_BR
dc.relationDisponível em formato digitalpt_BR
dc.subjectAgronomiapt_BR
dc.titleEmbriogênese somática em Pinus caribaea var hondurensispt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR


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