Efeitos da laserterapia na cicatrização de úlceras cutâneas em ratos utilizando modelos de animais com insuficiência arterial e Diabetes mellitus

Abstract

Resumo: A Doença Arterial Periférica (DAP) caracteriza-se por um processo crônico e obstrutivo ocasionado pela presença da aterosclerose onde ocorre redução do fluxo sanguíneo para os membros inferiores. Está associada a outros distúrbios como o diabetes mellitus. As úlceras cutâneas de origem arterial surgem devido à falta de suprimento sanguíneo arterial. Um dos recursos terapêuticos que vem sendo sugerido como parte integrante do tratamento das úlceras é o Laser de Baixa Intensidade (LBI). Sendo assim, o estudo teve os seguintes objetivos: 1) Avaliar a eficiência do modelo de insuficiência arterial pela análise do fluxo sanguíneo da artéria femoral após a cirurgia de oclusão total da artéria femoral (OAF) em ratos; 2) Avaliar os efeitos da aplicação do Laser de Baixa Intensidade na cicatrização de úlceras cutâneas de ratos utilizando um modelo animal de insuficiência arterial e diabetes mellitus. Inicialmente, os animais (n=14) foram divididos em grupo controle e cirurgia de OAF e foram avaliados por ultrassonografia com ecodoppler antes da cirurgia e após a cirurgia aos 5, 10 e 15 dias. Na etapa seguinte, os animais (n=106) foram divididos em 8 grupos: Controle (C, n=13), Doença Arterial Periférica (DAP, n=14), Doença Arterial Periférica com laser 12 joules (DAP L12, n=14), Diabetes Mellitus (DM, n=13), Diabetes Mellitus com laser 12 joules (DM L12, n=12), Doença Arterial Periférica e Diabetes Mellitus (DAP DM, n=14), Doença Arterial Periférica e Diabetes Mellitus com laser 12 joules (DAP DM L12, n=14) e Doença Arterial Periférica e Diabetes Mellitus com laser 6 joules (DAP DM L16, n=12). Os grupos C, DM, DM L12 não realizaram a cirurgia de OAF e todos os grupos foram submetidos à ferida cutânea. Os desfechos analisados foram área da ferida, atividade de metaloproteinase 2 (MMP-2) e quantificação do colágeno. Como resultados, o ecodoppler demonstrou que foi mantida a obstrução da artéria femoral durante o período avaliado; a associação de DAP e DM mostrou que ocorre um retardo na cicatrização dos ferimentos e quando foi utilizado o LBI como tratamento, a dose de 6 joules acelerou a cicatrização dos ferimentos na primeira semana de intervenção, enquanto a dose de 12 joules atrasou a cicatrização dos ferimentos; houve maior atividade da pro-MMP2 no grupo DAP DM L6 e não houve diferença entre os grupos quanto à distribuição de colágenos. Sendo assim, foi possível concluir que o modelo proposto foi eficaz na oclusão total da artéria femoral durante o tempo avaliado; o LBI atuou como um agente acelerador da cicatrização no início do tratamento apenas na dose de 6 joules, porém ele não influenciou a distribuição do colágeno na derme. Palavras-chave: Doença Arterial Periférica, Diabetes Mellitus, Cicatrização, Metaloproteinase, Laser de Baixa Intensidade.

Abstract: Peripheral Artery Disease (PAD) is characterized by a chronic and obstructive process caused by the presence of atherosclerosis where there is a reduction of blood flow to the lower limbs. It is associated with other disorders such as diabetes mellitus. Cutaneous ulcers of arterial origin are a result of the lack of arterial blood supply. One of the therapeutic resources that have been suggested as a part of wound treatment is the low-level laser therapy (LLLT). Therefore, the study had the following objectives: 1) To evaluate the efficiency of the arterial insufficiency model by analyzing the femoral artery blood flow after total femoral artery occlusion (OAF) surgery in rats; 2) To evaluate the effects of the application of LLLT on the healing of cutaneous ulcers of rats in an animal model of arterial insufficiency and diabetes mellitus. Initially, the animals (n = 14) were divided into a control group and a group that underwent OAF surgery and were evaluated by Doppler ultrasonography before surgery and after surgery at 5, 10 and 15 days. In the next step, the animals (n = 106) were divided into 8 groups: Control (C, n = 13), Peripheral Artery Disease (DAP, n = 14), Peripheral Arterial Disease with 12 joules laser (DAP L12, n = 14), Diabetes Mellitus (DM, n = 13), Diabetes Mellitus with 12 joules laser (DM L12, n = 12), Peripheral Artery Disease and Diabetes Mellitus (DAP DM, n = 14), Peripheral Artery Disease and Diabetes Mellitus with 12 joules laser (DAP DM L12, n = 14) and Peripheral Artery Disease and Diabetes Mellitus with 6 joules laser (DAP DM L16, n = 12). Groups C, DM, DM L12 did not have OAF surgery and all groups were submitted to cutaneous ulcer. The outcomes analyzed were ulcer area, metalloproteinase 2 activity (MMP-2), and collagen quantification. As a result, the Doppler ultrasonography showed that the femoral artery obstruction was maintained during the period evaluated; the association of DAP and DM showed a delay in the wound healing and when LBI was used as a treatment, the dose of 6 joules accelerated wound healing in the first week of intervention while the dose of 12 joules delayed the wound healing ; there was greater pro-MMP2 activity in the DAP DM L6 group and there was no difference between the groups regarding the collagen distribution. Thus, it was possible to conclude that the proposed model was effective in total occlusion of the femoral artery during the time evaluated; the LBI acted as an accelerating healing agent at the start of treatment only at the dose of 6 joules dose but it did not influence the distribution of collagen in the dermis. Keywords: Peripheral Artery Disease, Diabetes Mellitus, Healing, Metalloproteinase, Low-Level laser therapy.