Estudos cinéticos com a L-Malato desidrogenase mitocondrial de coração bovino

Abstract

Resumo: Um estudo cinético com a L-malato desidrogenase mitocondrial de coração bovino foi realizado, analisando-se as anomalias cinéticas causadas por altas concentrações de oxaloacetato, NADH e L-malato e o efeito da força iônica. A inibição de substrato pelo oxaloacetato pode ser enquadrada no mecanismo de adição ordenada sequencial de dois substratos, porém, a inibição por substrato causada pelo NADH não pode ser enquadrada. As anomalias cinéticas causadas por altas concentrações de L-malato que também não podem ser enquadradas no mecanismo de adição ordenada de dois substratos, sugerem a existência de vias alternativas que levam à formação de produtos. O efeito causado pela força iônica é em geral inibitório e é simples quando os eventos que tem lugar no centro ativo da enzima são relativamente simples. Há um efeito assimétrico da força iônica nas curvas de saturação de oxaloacetato e NADH. O efeito da força iônica nas curvas de saturação com oxaloacetato e NADH, em comparação com o efeito causado às curvas de pH, apresenta diversas semelhanças. Um aumento na força iônica em pouco altera a afinidade do NADH para com a enzima mas altera substancialmente as constantes de Michaelis de ambos os substratos bem como a velocidade máxima.