Cultura in vitro de calos e quantificação de compostos fenólicos em gabirobeira (Campomanesia xanthocarpa O. Berg.).

Abstract

Resumo: Campomanesia xanthocarpa, conhecida como gabirobeira, é uma arvore frutífera, de grande importância ecológica. Popularmente as folhas e cascas são usadas no tratamento de diversas doenças, principalmente do sistema digestório. O objetivo do trabalho foi desenvolver um protocolo de cultura in vitro de calos de gabirobeira e estudar os compostos fenólicos presentes nesses calos. Primeiro realizou-se a germinação de sementes in vitro em meios de cultura WPM, WPM/2, ambos sem ou com sacarose (30 g.L^-1). As culturas foram realizadas em condições de luz (30 µmol.m^-2.s^-1 ) com fotoperíodo de 16h ou no escuro e temperatura de 25±2°C. As plântulas obtidas foram utilizadas como fonte de explante. Discos foliares de 5 mm foram inoculados em meio de cultura MS contendo ácido 2,4-diclorofenoxiacetico (2,4-D) nas concentrações 5, 10 e 20. Foram obtidas quatro linhagens de calos com crescimento superior as demais linhagens. A linhagem com maior crescimento foi cultivada em meio de cultura MS acrescido de 500 mg.L^-1 de quitosana por 60 dias. O conteúdo fenólico da linhagem 01 com e sem o tratamento com quitosana também foi comparado com a linhagem com segundo maior crescimento. A germinação ocorreu em todos os meios, não havendo diferença estatística entre os tratamentos. Também não houve diferença estatística entre os tratamentos com 2,4-D na formação de calos. Os calos tratados com quitosana apresentaram um incremento de duas vezes no conteúdo de compostos fenólicos. Quando comparadas as duas linhagens sem quitosana, a de maior crescimento também apresentou a maior concentração de compostos fenólicos. Com esse estudo foi possível estabelecer uma cultura de calos in vitro permitindo a avaliação do conteúdo de compostos fenólicos, que foi incrementada na presença de quitosana no meio de cultura. Palavras chave: Quitosana, 2,4-D, germinação in vitro, Myrtaceae.

Abstract: Campomanesia xanthocarpa, known as gabirobeira, is a fruit tree with ecological importance. In the medicinal folk its leaves and bark are employed for treatment of many diseases, mainly gastric illness. The aim of this study was to develop a protocol of in vitro callus culture of gabirobeira and to study the phenolic compounds present in the calli. Seeds were germinated in vitro on WPM and WPM/2 media, supplemented or not with sucrose (30 g.L^-1). The cultures were maintained under light (30 µmol.m^-2.s^-1) with a 16 h photoperiod or in the dark, at 25±2 ºC. The seedlings were used as explant source. Leaf discs with 5 mm diameter were introduced on MS culture media containing 2,4-diclorophenoxiacetic acid (2,4-D) at concentrations of 5, 10 and 20 µM. The four lines of calli with the greatest growth rate were selected. Among these the one with the greatest growth rate was cultured in MS medium supplemented or not with 500 mg.L^-1 chitosan by 60 days at least. The phenolic content of line 01 with or without chitosan, was also compared with the content of the line with the second greatest growth rate. The germination of seeds occurred in all treatments and conditions and no statistical difference was observed among them. The medium supplemented with 2,4-D in all concentrations showed callus formation without statistical difference among the concentrations. The calli treated with chitosan had the double of phenolic compound content. When compared the two lines with the greatest growth rate, both cultured in media without chitosan, it was found that the second line presented half the content of phenolic compounds of line 01. In this study it was possible to establish an in vitro callus culture that allows the evaluation of phenolic compound content, and to show that this content was increased in the presence of chitosan in the culture medium. Key words: chitosan, 2,4-D, in vitro germination, Myrtaceae