Investigação sorológica e molecular de Leptospira sp. em búfalos (Bubalus bubalis) no leste da Ilha de Marajó, Pará, Brasil

Abstract

Resumo: A leptospirose é um problema de saúde pública mundial, sendo uma zoonose causada por bactérias do gênero Leptospira. Esta enfermidade possui grande importância para a produção animal, pois pode comprometer a sanidade do rebanho, causar problemas reprodutivos e queda na produção com consequentes impactos econômicos negativos. A bubalinocultura no Brasil é uma prática rentável, além de estar em plena expansão. Os búfalos são suscetíveis a diversas enfermidades infecciosas que podem comprometer a sanidade do rebanho, causando prejuízos econômicos ao produtor, além de oferecer riscos a saúde pública. Dessa forma, estudos sobre doenças que acometem os bubalinos são essenciais para determinar medidas sanitárias específicas. A Ilha do Marajó possui o maior rebanho de bubalinos do Brasil, refletindo a importância de estudos da epidemiologia da leptospirose na região. A soroaglutinação microscópica (SAM) é a técnica considerada padrão ouro e detecta anticorpos contra diversos sorovares de Leptospira sp. A reação em cadeia da polimerase (PCR) é um método de diagnóstico direto, rápido e atende aos requisitos de especificidade e sensibilidade. Nesse sentido, o objetivo do presente trabalho foi comparar as técnicas de soroaglutinação microscópica (SAM) e reação em cadeia da polimerase (PCR) em amostras de rim, fígado, sangue total e urina no diagnóstico de Leptospira sp. em búfalos na Ilha do Marajó. Em um primeiro estudo foram coletadas 212 amostras de soro e 140 amostras de sangue total de búfalos provenientes de 21 propriedades dos municípios de Salvaterra, Soure, Cachoeira do Arari e Muaná, localizados na Ilha do Marajó, Pará. Todas as amostras de sangue total foram negativas pela técnica de PCR, pela técnica de SAM 20,75% (44/212) dos animais foram positivos e 76,19% (16/21) das propriedades apresentaram ao menos um animal reagente. Os sorovares mais prevalentes foram Pomona (40%) e Hardjo CTG (26%) e o maior título encontrado (800) foi destes sorovares. Em um segundo estudo foram analisadas através das mesmas técnicas amostras de soro, sangue total, rim e fígado e urina, esses materiais foram provenientes de búfalos abatidos em um frigorífico no município de Soure. Das amostras de soro 45% (18/40) foram reagentes na técnica de SAM e os sorovares mais prevalentes foram Pomona (31,6%) e Hardjo CTG (31,6%). Na PCR 32,5% (13/40) das amostras foram positivas, sendo 10 amostras do rim, duas amostras do rim e fígado simultaneamente e apenas uma do fígado. Todas as amostras de sangue total e urina foram negativas. As análises das duas técnicas em conjunto, bem como o uso da PCR nas diferentes amostras, permitiram identificar a provável fase de infecção em que se encontravam os animais, além de ressaltar a importância do uso dessas técnicas de forma complementar no diagnóstico da leptospirose. Os resultados obtidos comprovam a participação dos búfalos no ciclo epidemiológico da leptospirose, inclusive como portadores renais do agente.

Abstract: Leptospirosis is a worldwide public health problem and is a zoonosis caused by bacteria of the genus Leptospira. This disease is very important for livestock production because it can compromise the health of the herd, cause reproductive problems and decline in production with consequent negative economic impacts. The buffalo raising in Brazil is a profitable practice, besides being in full expansion. Buffaloes are susceptible to a variety of infectious that can compromise the health of the herd, causing economic losses to the producer, besides offering risks to public health. Thus, studies on diseases that affect buffaloes are essential to determine specific sanitary measures. The Marajó Island has the largest buffalo herd in Brazil, highlighting the importance of leptospirosis epidemiology studies in the region. The microscopic agglutination test (MAT) is considered the gold standard technique and detects antibodies against a variety Leptospira sp. serovars. The polymerase chain reaction (PCR) is a direct diagnostic method, fast and complies with requirements of specificity and sensitivity. Therefore, the aim of this study was to compare the techniques of microscopic agglutination test (MAT) and polymerase chain reaction (PCR) in samples of kidney, liver, whole blood and urine in the diagnosis of Leptospira sp. in buffaloes Marajó Island. In a first study were collected 212 serum samples and 140 whole blood samples of buffalo from 21 properties from the municipalities of Salvaterra, Soure, Cachoeira do Arari and Muana, located on the Marajó Island, Pará. All whole blood samples were negative by PCR technique, for the SAM technique 20.75% (44/212) of the animals were positive and 76.19% (16/21) of the properties presented at least one reagent animal. The most prevalent serovars were Pomona (40%) and Hardjo CTG (26%) and the highest titer found (800) was of these serovars. In a second study were analyzed by the same techniques samples of serum, whole blood, kidney, liver and urine, these materials were obtained from slaughtered buffalo in the municipality of Soure. In serum samples 45% (18/40) were reactants to SAM technique and the most prevalent serovars were Pomona (31.6%) and Hardjo CTG (31.6%). In PCR 32.5% (13/40) of the samples were positive, with 10 samples from kidney, two samples from kidney and liver simultaneously, and only one from liver. All samples of whole blood and urine were negative. The analyzes of the two techniques together, as well as the use of PCR in the different samples, allowed to identify the probable stage of infection in which the animals were, in addition to highlighting the importance of using these techniques in the diagnosis of leptospirosis. The results confirm the participation of buffaloes in the epidemiological cycle of leptospirosis, even as kidney agent carriers.